Enzîma Termolabile Uracil-DNA Glycosylase (UNG) - Ji bo rakirina dU di PCR û NGS Sample Preparation de pir taybet e, kontrolkirina kalîteya DNA baştir dike

Desîrt

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile یەکێکە لە ناوەکانی پڕۆتێنی بازكردنی ژێرهەڵکراوەکان لە E. coli، کە لە ژێرەی باکتریاوا شێوانی دەریا دەبێتەوە. ئەم ژێرهەڵکراوەیە دەخستێت لە بەندی گلیکۆسیدی ئوراسیل لەو سیستەمەیەی خۆشەویستە و دووجایی DNA کە ئوراسیل دروست دەکات و سەرەتا دەستێکەوە لە سەرەکیابوونی ئەم سیستەمەیە لە ئەوەی کەسکەوتووە. ئەم ژێرهەڵکراوەیە نەکاریگەرە لە RNA و DNAیەکەی ئەصیلەکەی نەکەواتە ئوراسیل. چونکە Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile هیچ گرێدانی مەتەڵ نیە، ئەوە لە ڕاستەوخۆدا کاریگەرە لە ڕاستەوخۆدا لەسەر EDTA.

ئوراسیل-دێنە گلیکوسیلەس (UNG)، تەرمۆلاوەب لەگەڵ dUTP بەکاردێت بۆ سڕینەوەی گرنگبوونەکانی PCR “carry over” لە بەرچاوەکانی پێشووی سینتەزی DNA. بۆ ئەوەی نەتیجەکانی PCR بە شێوەیەکی بەردەşt بە کارهێنان بێت، dTTP لە میشەی ڕەکتیۆنی PCR بە dUTP گۆڕان دێت. میشەی ڕەکتیۆنی PCRی ڕووبەرەوە بە زیندەکاری Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، تەرمۆلاوەب بەپێی پێشەوەستیەکان بە کارهێنێت بۆ دەستکاری DNAی ئوراسیلدار. DNAی نەخۆش نەتوانێت ئوراسیل دروست بێت بۆیە نموونەکە نابێت لەو ڕووداوەدا دەستکاری بێت.

Çêlk: E. coli ya newekirî

Civîna û Meça: 1U/μL

بەکارهێنان:

qPCR û Digital PCR: Rakin uracil ji produktekên PCR-yê ya berî re destpêkirin da ku bidoheja vegerandina pêwîst di reaktsiyonên paşîn de piştîkirin, hêsanî û çewtirî yên teshtê zêde bikin.

Seqansa Nivîker (NGS): Bûyer li ser jî tevahî ya karûbar ên NGS-ê ji bo rakin uracil baseên ji DNA-ên mîn dustkar re, hêsanî ya seqansa zêde bikin û girêdanekî pêşdîtin.

Analîz Forensîk: Dideka bi minimîzekirina cross-contaminationê wekî taybetmend bi lê kêmî hejmarên DNA di nîşanên forensîk de diwekareyekî bibîne û tişt bike.

Dideka Metilasyonê: Ji bo metoda convertiya bisulfîtê, trîta UNG ewlehatine ku uracil-ê ya ji cytosine-ên netmetil kirin re rakin be, analîza metilasyonê destpêkirin.

Rakin Inhibitor: Bi digestkirina DNA-ê ya xwestî ya ya derbasdar re destpêkirina DNA-ê bi rakin uracilê, hêsanî ya sequensekên DNA-ê ya dixwazê zêde bikin.

ئەنزایمی Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase ڕێکخراوێکی بەرپرسیارە لەسەر ئەو ساینسدانانەی بیولۆژیی مۆلێکولی و پشکانی کاریگەریان لە تاقیکردنی چالاکیترین تجربەکانی بەرگیراوەکانی نووسینەوەی نووسینەوە، دەستی بەرەوەی کۆنتروڵی زۆر لەسەر ئەوەی بەهایی هەڵبژاردەکانی نمونەی DNA بەردەستبکات و دەستی بەرەوەی کاهێنی چاڵاکانێکی نەدۆزرێتی کە دەتوانێت نتایجی تجربەکان بدرێژێت.

Paşnav Bîrêvebûnê

Yek yekîti heye ku mîqdarê ya Uracil-DNA Glycosylase (UNG) dike ku destpêkê yên pêwanên tenê DNA-ya ku urasil hene di 37°C de li 60 xulan destpê kirîne.

Buffer Girtin

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) glycerol.

Kontrola Calakiyê

Paşîyet >99% ji bo SDS page

Neheviya Endonuclease, Nickase, Exonuclease û RNase.

Destpêkê ji aliyê mezmûran

50°C li 2 xulan

دەرچوونی ڕاکتیۆن

٢٠~٣٧°س بۆ ١٠ خولەک.

سەبارەتی کاربەردن

٠,١~١U لە زانیاری UNG بەرەو ٥٠ول راکتیۆن.

دانەکردن و گەڕان

داخستن لە -٢٠°س، دانەکردن لەگەڵ یەگ ژله.