çareseriya inhibîtorê ribonukleazê ya pir paqij - inhibîtorê rnase 40u/μl, ji bo parastina rna ya herî baş di senteza cdna û sepanên biyolojîya molekular de

şîrovekirina berhemê

Introducing our Highly Pure Ribonuclease Inhibitor Solution, a premium quality reagent featuringînîbîterên rnaseat an ultra-concentrated 40 Units/μl. This solution is specifically engineered to provide maximum protection against ribonucleases during RNA handling in various molecular biology procedures.

taybetmendiyên sereke

• paqijîyeke bêhempa: inhibitor ribonuclease bi rêya rekombînan çêkirin û bi awayekî hişk hatiye paqijkirin da ku asta bilind a paqijî were misoger kirin, ku ewle bike ku tu mudaxeleyên bi ceribandinên we re tune ne.

• formûla ultra-pêşketî: bi konsantrasyonê 40u / μl ve tê peyda kirin, ev înîbîter bikar anîna bi bandor di sepanên dijwar de ku heta mîqdarên trace yên rnase dikarin encamên têk bibin.

• çalakiya bi spektrumê fireh: înîbîter bi bandor curbecur a rnases a, b, c û endorî û exoribonucleasesên din bêbandor dike, ku nimûneyên RNAyê ji hilweşandinê diparêze.

• aram û çalak: ji bo aramî li ser rêjeya germahî û mercên ph, inhibitor di dema depoyê de û di nav protokolên ceribandinê de çalak dimîne.

• lihevhatî: ji bo bikaranîna bi pergalên otomatîk û reaksiyonên bi dest ve amade kirin, ew bi temamî lihevhatî bi buffers û enzaymên ku bi gelemperî di senteza CDNA û teknîkên manipulasyona asîdên nukleîk de tê bikaranîn.

serlêdan

• Sîntêza CDNA: ji bo pêşîgirtina kontaminahiya rnase di dema reaksiyonên transkripsiyona veguherî de girîng e, bi vî awayî hilberîn û yekparçeyî ya CDNA ya sentezkirî baştir dike.

• tecrîdkirina rna û paqijkirina: pêkhateyeke girîng di kitên derxistina rna û rêbazên karên paqijkirina ji bo parastina yekparçeyîya rna berî û piştî tecrîdkirinê.

• Northern blotting: veguhestina RNA ya kalîte û hibrîdkirina bi rêya astengkirina çalakiya rnase ku dikare RNA li ser membranan hilweşîne.

• qpcr û rt-qpcr: di testên pcr yên quantitative û transcription reverse de şablonên RNA diparêze, hesasîyet û taybetîbûnê zêde dike.

• Lêkolînên hevkariya RNA-protein: molekula RNA di dema co-immunoprecipitation (rip) û ceribandinên din ên hevkariya RNA-protein de diparêze.

çavkaniya

e. coli ku kloneke rekombînanta ku ji placenta mirovan genê înîbîterê ribonuklease dihewîne.

konsantrasyon

40 u/μl.

yekîneya

yek yekîneyek wek miqdara inhibitorê ribonuclease ya rekombînan tê pênasînkirin ku pêwîst e ji bo pênasîna çalakiya 5ng ya ribonuclease a bi rêjeya 50% tê pênasîn kirin.

çalakiya bi rêya astengkirina hydrolysis ji cytidine 23-cyclic monophosphate ji aliyê ribonuclease a pîvandî ye.

bufferê depoyê

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) gliserol

depoya

di -20°C de bêne veşartin

kontrolkirina kalîteyê

ne hebûna endonukleazê

1μg DNA ya lambda bi 200 yekîneyên inhibitorê ribonuclease ji bo 16 saetan di 37 °C de têne kuşt.

Piştî ku diçû, DNAya lambda wek bêbandor li ser gelê agaroseyê ku bi ethidium bromide ve têne qewitandin tê nîşandan da ku bêdengiya endonukleazê dîtbar were piştrastkirin.

nebûna nikase

1μg type i supercoiled pbr322 bi 200 yekîneyên inhibitor ribonuclease ji bo 4 saetan di 37 °C de tê incubated.

Piştî ku diçû, DNAya supercoiled li ser gelê agaroseyê ku bi ethidium bromide ve têne qewitandin tê dîtin da ku bêyî ku ji berçavkirin an qutkirinê were dîtin.

nebûna exonuclease

1μg ji markêrên lambda dna/hindiii bi 200 yekîneyên inhibitorê ribonuclease ji bo 16 saetan di 37 °C de têne kuşt.

Piştî ku diçînin, markêrên DNA-ya lambda/hindiii bi gelê agaroseyê ya 1% ve tên veqetandin û bi bromîda etidiyumê tên rengkirin. Markêrên bêyî ku bêne şûştin, wek şûşeyên bêkûçî dimînin.

nebûna rnase û rnaseya nepenî

ji bo ceribandina hebûna çalakiya rnase, 1ug rna bi 200 yekîneyên inhibitor ribonuclease ji bo 4 saetan di 37 °C de tê incubated.

Piştî ku diçû, RNA wek bandek bêbandor li ser gelê agaroseyê ku bi ethidium bromide ve têne qewitandin tê nîşandan da ku nebûna rnaseyê dîtbar were piştrastkirin.

ji bo ceribandina hebûna çalakiya rnase ya nepenî, 200 yekîneyên inhibitorê ribonuclease di 70 °C de ji bo 15 deqîqeyan germî-denatured û bi 1ug rna ji bo 4 saetan di 37 °C de têne kuşt.

Piştî ku diçû, RNA wek bandek bêbandor li ser gelê agaroseyê ku bi ethidium bromide ve têne qewitandin tê nîşandan da ku nebûna rnaseyê dîtbar were piştrastkirin.

paqijiya fîzîkî

paqijî ≥95% e, wek ku bi gelê sds-polyacrylamide bi rengê coomassie blue tê dîtin.

nota bikaranînê

bi awayekî standard rt û transkripsiyona in vitro bi kar anîn bi rêya inhibîtorê ribonukleazê di konsantrasyoneke dawî ya 1u/ul de.