paketa paketa polîmerase ya taq dna - rastgirîyeke bilind, aramîyeke termal a bihêz, çareseriya enzimê ya ji bo pêvajoya çêtirkirî ji bo bandora zêdekirina pcr ya bilind û performansa pêbawer a rt-pcr di sepanên bilind de, ji bo genotyping
- pêşniyar
pêşniyar
şîrovekirin
taq polîmerase DNAJi Thermus aquaticus ya E. coli cloning ve hatî veqetandin. Nirxa molekularê
bi qasî 94 kda ye. polîmeraseya easytaq dna xwedî çalakiya polîmeraseya 5′ heta 3′ dna û 5′ heta 3′
çalakiya exonuclease bê çalakiya exonuclease 3′ -5′. leza dirêjkirina 1-2 kb/min e. li dawîya 3′ a heye. berhema pcr dikare di ta vector de klon bibe.
conc. 5 u/μl
di -20°C de bêne veşartin
taybetmendiyên sereke
format bulk pir-pêçkirî: bes ji bo piştgiriya run PCR mezin-scale û setups experimental multiple.
aramî termal superior: bi berdewamî cycle of denaturation, annealing, û dirêjkirina bêyî windabûna çalakiya, misoger amplification robust li ser range germahîya berfireh.
pcr-ya rastgirî ya bilind: rêjeya şaşiyên di dema senteza DNA de kêm dike, di encamê de ampliconên rastgir ji bo sepanên jêrîn ên wekî rêzkirina û klonkirinê.
performansa rt-pcr ya bi bandor: bandorek diyarkirî di senteza CDNA ji şablonên RNA de, ji bo analîza ekspresyonê gen û tespîta vîrusê îdeal e.
bikaranîna piralî: ji bo teknîkên molekular ên cuda, di nav de genotyping, klonkirin, amadekirina pirtûkxaneya rêziknameya nifşê nû û ceribandinên teşhîsê.
paketa taq DNA polymerase bi awayekî giştî bi hewcedariyên bikarhênerê dawî hatiye dîzaynkirin, hem ew pêbawerî ku ji aliyê protokolên laboratorê yên rojane ve tê xwestin û hem jî pîvanên pêdivî yên ji bo lêkolînên bilind-serûber û cîhên pîşesaziyê
taybetmendiyên
1.Hîndurîyeke bilind
2.efîksiyonê bilind amplification
yekîneya
yek yekîneyeke polîmeraseya DNA ya platinum taq a bi dilsozî bilind 10 nmol deoksîribonukleotîdê dihewîne
di 30 deqîqeyan de di 74°C de di nav madeya asîd-qewimî de.
kontrolkirina kalîteyê
bêdengiya fonksîyonel a çalakiya endonukleazê ya du qatî û yek qatî;
paqijî> 90% bi elektrophoresis gel sds homogen.
her lûtkeya polîmeraseya DNA ya easytaq ji bo zêdekirinê ji 10 ng ji mirovan tê ceribandin
DNAya genomîk.
bufferê depoyê
20 mm tris-hcl (ph 8.0),0.1 mm edta,1 mm dtt,100 mm kcl,stabilîzer,50% gliserol.
tevna reaksiyonê saz kirin
pêkhateya | volume | konsantrasyonê dawî |
şablon | DNA <0.5 ug | wek pêwîstî |
pêşînkerê pêşînkerê (10 μm) | 1 μl | 0.2-0.4 μm her yek |
primerê veguherî (10 μm) | 1 μl | 0.2-0.4 μm her yek |
10xpcr bufferê reaksiyonê | 5 μl | 1x |
2.5 mm dntps | 4 μl | 0.2 mm |
taq polîmerase DNA | 0.5μl | 2.5 yekîneyî |
hd2o ji bo volume dawî | 50μl | ne pêkan e |
şertên thermal cycle pêşniyar
94°c 2-5 deqîqe
94°c 30 sec
50-60°C 30 sec 30-35 cycle
72°c 1-2 kb/min
72°C 5-10 deqîqe
hûrgilîyên pakêta
pakêtên mezin di -20 dereceyê de bi şandina germahîya nizm de depo bikin