Termo-mo'ljallangan uracil-dna glikozilaz (ung) ferment - pcr va ngs namunalarini tayyorlashda du ni olib tashlash uchun yuqori spetsifik, DNK sifatini nazorat qilishni yaxshilaydi

tavsif

Uracil-dna glikozilaza (ung), termolabil dengiz bakteriyasidan olingan E. coli hujayrasidagi rekombinant oqsil hisoblanadi. Ferment urasil-glikozid bogʻlamalarini u-DNAda bir va ikki zanjirli DNKda idroliz qiladi, urasilni kesib tashlaydi va DNKda alkali

Pcr sintez reaksiyalaridan olingan ifloslanishni bartaraf etish uchun pcr mahsulotlarini buzilishga qobiliyatli qilish uchun pcr reaksiya aralashmasida DTPni DTP bilan almashtirish kerak. keyingi pcr reaksiya aralashmalarini pcr aralashmasidan oldin pcr urasil- DNK glikozilazi (ung) bilan qayta is

Manba: rekombinant E. coli

konsentratsiya va kattalik: 1 u/μl

qo'llanmalar:

qpcr va raqamli pcr: uratsilni oldingi pcr mahsulotlaridan olib tashlash, keyingi reaksiyalarda qayta kuchaytirishni oldini olish, testning sezgirligi va xususiyatini oshirish.

keyingi avlod sekvensiyasini aniqlash (NGS): DNK molekulalarini ifloslantiruvchi uracil asoslarini olib tashlash, sekvensiya aniqligini oshirish va fon shovqini kamaytirish uchun NGS namuna tayyorlash ish jarayonining muhim tarkibiy qismi.

forensik tahlil: chorrahyollanishni kamaytirish orqali forensik namunalarda DNKning iz miqdorlarini aniqroq va ishonchli aniqlash imkonini beradi.

metillashni aniqlash: bisulfitni konversiya qilish usullari bilan birgalikda, unga ishlov berish metillanmagan sitosinlarni uratsilga aylantirib, metillash tahlilini osonlashtiradi.

inhibitorlarni olib tashlash: uracilga ega boʻlgan buzilgan yoki shikastlangan DNKni hazm qilib, DNKni tozalashga yordam beradi, bu esa maqsadli DNK sekvenslarining sofligini oshiradi.

Termo-mo'ljallangan uracil-DNK glikozilaza fermentlari nozik nukleik kislota asosida tajribalar olib boruvchi molekular biologlar va tadqiqotchilar uchun zarur vosita bo'lib, DNK namunasining yaxlitligini nazorat qilish va tajriba natijalariga putur yetkazishi mumkin bo'lgan istalmagan artefaktlarni kamay

birlikning taʼrifi

bir birlik - 1 μg tozalangan bir zanjirli uracil tarkibidagi DNKni 37 °C da 60 daqiqa ichida to'liq parchalash uchun zarur bo'lgan uracil-dna glikozilaz (ung) miqdori sifatida aniqlanadi.

saqlash buferi

20 mm tris- hcl (ph8. 0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0, 5% (v/ v) - 20, 0, 5% (v/ v) np - 40, 50% (v/ v) gliserol.

sifatni nazorat qilish

sofligi> 99% sds sahifasi bo'yicha

endonukleaz, nikase, eksonukleaz va rnase bilan ifloslanmagan.

issiqlik inaktivatsiyasi

50°C gacha 2 daqiqa davomida

reaksiya harorati

10 daqiqa davomida 20 ~ 37 °C.

Foydalanish miqdori

50 ul reaksiyasiga 0,1 ~ 1 u ung fermentlari.

tashish va saqlash

20 °C da saqlang, gel muz bilan jo'nating.