Yuqori soflikdagi ribonukleaz inhibitori eritmasi - RNase inhibitori 40U/μl, cDNA sintezi va molekular biologiya dasturlarida RNKni himoya qilish uchun optimal

Mahsulot tavsifi

Bizning Yuqori Sof Ribonukleaza Inhibitori Erishmasi bilan tanishing, premium sifatli reaktiv rnaza inhibitori ultra-konsentratsiyalangan 40 Birlik/μl ni o'z ichiga olgan. Ushbu erishma RNA bilan ishlov berish jarayonlarida ribonukleazalardan maksimal himoya ta'minlash uchun maxsus ishlab chiqilgan.

Asosiy xususiyatlari

• Ajoyib Tozalik: Ribonukleaz Inhibitori rekombinant usulda ishlab chiqarilgan va toza holatga qo'yilgan, tadbiqlaringiz bilan urinmaydigan toza darajani ta'minlaydi.

• Ultra-Konsentrirovanniy Formulya: 40U/μl konsentratsiyada taqdim etilgan ushbu inhibitor talabli tadbiqlarda effektiv ishlatish imkonini beradi, bunda hatta ichki miqdordagi RNase natijalariga zarar bera oladi.

• Keng Spektr Faoliyat: Inhibitor A, B, C va boshqa endo- va eksoribonukleazlardan tashqari bir necha turdagi RNaselarni effektiv tarzda neytralizlaydi, RNA namunalaringizni razvaldan himoya qiladi.

• Stable and Active: Harorat va pH shartlari orasida stabillik uchun formulalangan, inhibitor saqlanish davomida va turli eksperimental protokollarda faol qoladi.

• Compatibility: Avtomatlashtirilgan tizimlar va qo'llab-quvvatlangan reaksiyalarda ishlatish uchun muhim, uning cDNA sintezi va nukleotid manipulyatsiyalarda umumiy ravishda ishlatiladigan bufferlar va enzym lar bilan to'liq uyumlanishi mumkin.

Qo'llanish sohaları

• cDNA Synthesis: Teskari transkripsiya reaksiyalarida RNase sirlashmasini oldini olish uchun asosiy, bu esa sintezlangan cDNA miqdori va integriteti yaxshilaydi.

• RNA Isolation and Purification: RNA ajratish va tozalash setlari va ish jarayonlari to'plamida muhim komponent bo'lib, izolatsiya oldidan va keyin RNA integritetini saqlaydi.

• Northern Blotting: RNase faoliyatini membranlarda RNA ni buzilishi oldiniga ega bo'lgan holda RNA transferi va hibridatsiya sifatini ta'minlaydi.

• qPCR and RT-qPCR: Quantitative PCR va teskari transkripsiya quantitative PCR testlarida RNA shablonlarini himoyalaydi, bu esa sensitivlik va spestifikatsiyani yaxshilaydi.

• RNA-protein aloqalari uchun tadqiqotlar: Ko-immunoprecipitatsiya (RIP) va boshqa RNA-protein aloqalari tadqiqotlari jarayonida RNA molekularini saqlaydi.

Manba

E. coli shirikasi rekombinant klonni ifodalaydi, bunda odam platsentali Ribonuclease Inhibitor geni joylashtirilgan.

Mutaxassislik

40 U/μl.

Vahidning belgilash usuli

Bitta vahid ribonuklease A ning faoliyatini 5 ng gacha 50% darajada to'xtatish uchun talab qilinadigan Recombinant Ribonuclease Inhibitor miqdori sifatida aniqlanadi.

Faoliyat ribonuklease A yordamida cytidine 2’3’-tsiklik monofosfatni hidroliz qilishdan oldin o'ldiriladi.

Saqlash bufferi

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(h/h) glyserol

Saqlash

-20°C da saqlang

Sifatni tekshirish

Endonuklezaning yo'qligi

1μg Lambda DNA, 200 unit Ribozanaza Inhibitori bilan 37°C da 16 soat inkubatsiyadan o'tkaziladi.

Inkubatsiya dan keyin, Lambda DNA, etidium brom-stirov agaroz gelida butun holatda ko'rinishini olib, nazoratli Endonukleza yo'qligini tekshirish uchun ishlatiladi.

Nikasenining yo'qligi

1μg I turdagi superzavitan pBR322, 200 unit Ribozanaza Inhibitori bilan 37°C da 4 soat inkubatsiyadan o'tkaziladi.

Inkubatsiya dan keyin, superzavitan DNA, etidium brom-stirov agaroz gelida nikalash yoki kesishishning yo'qligini tekshirish uchun ko'rishga yetarlicha.

Ekzonuklezaning yo'qligi

1μg Lambda DNA/HindIII belgilari, 200 unit Ribozanaza Inhibitori bilan 37°C da 16 soat inkubatsiyadan o'tkaziladi.

Inkubatsiya dan keyin, Lambda DNA/HindIII belgilari 1% agaroz gilda ajratiladi va etidium brom bilan ranglangan. Belgilar butun bandlar sifatida saqlangan, smearing yo'q.

RNase va latentskiy RNase mavjud emas

RNase faoliyati mavjud bo'lishini tekshirish uchun, 1ug RNA-ni Ribonuklease Inhibitorining 200 birlik bilan 37°C da 4 soat inkubatsiyaga o'tkaziladi.

Inkubatsiya dan so'ng, ko'rinishda RNase mavjud emasligini tekshirish uchun, RNA-ni etidium bromid bilan ranglangan agarose gel-da butun band sifatida ko'rsatiladi.

Latentskiy RNase faoliyati mavjud bo'lishini tekshirish uchun, Ribonuklease Inhibitorining 200 birlikni 70°C da 15 daqiqa guruhlandiriladi va 1ug RNA-bilan 37°C da 4 soat inkubatsiyaga o'tkaziladi.

Inkubatsiya dan so'ng, ko'rinishda RNase mavjud emasligini tekshirish uchun, RNA-ni etidium bromid bilan ranglangan agarose gel-da butun band sifatida ko'rsatiladi.

Jismoniy tozalik

SDS-poliakrilamid gel bilan Coomassie blue ranglanganda tozalik ≥95% hisoblanadi.

Foydalanish qoidasi

Ribonuklease Inhibitor pH ning keng oraliqda (pH5.5-9) faol hisoblanadi. Standart RT va in vitro transkriptsiya uchun Ribonuklease Inhibitorining oxirgi konsentratsiyasi 1u/ul hisoblanadi.