taq dna polimeraz bulk paketi - yuqori sodiqlik, kuchli issiqlik barqarorligi, yuqori pcr amplifikatsiya samaradorligi va yuqori ishlashli dasturlarda ishonchli rt-pcr ishlashini oshirish uchun jarayon uchun optimallashtirilgan fermentli eritma, genotiplash, klonlash, kutubxona tayyorlash uchun ideal
- kirish soʻzlari
kirish soʻzlari
tavsif
taq DNK polimerazasiE. coli klonlashdan ajratilgan Thermus aquaticus. Molekulyar og'irligi
taxminan 94 kda. easytaq dna polimeraza 5′ dan 3′ gacha dna polimeraza faolligiga ega va 5′ dan 3′ gacha
3′ -5′ eksonukleaz faolligi bo'lmagan holda. kengaytiruvchi tezlik 1-2 kb/min. 3′ uchida a bor. pcr mahsuloti ta vektorda klonlanishi mumkin.
conc. 5 u/μl
-20°C haroratda saqlang
asosiy xususiyatlari
yuqori konsentratsiyalashgan bulk formatida: katta miqyosdagi PCR-lar va ko'p martalik tajribalarni qo'llab-quvvatlashga etarli.
yuqori issiqlik barqarorligi: faolligini yo'qotmasdan, qayta-qayta denaturatsiya, qaynatish va kengaytirish tsikliga chidaydi, bu keng harorat oralig'ida kuchli kuchaytirishni ta'minlaydi.
yuqori ishonchlilik pcr: DNK sintezi paytida xatolarni kamaytiradi, natijada sekvensiyalash va klonlash kabi pastki dasturlar uchun aniq amplikonlar hosil boʻladi.
samarali rt- pcr ishlashi: rna namunalaridan CDNA sintez qilishda samaraliligi isbotlangan, gen ekspressiyasi tahlilini va virusni aniqlash uchun ideal.
ko'p qirrali foydalanish: genotiplash, klonlash, keyingi avlod sekvensiyalash kutubxonalarini tayyorlash va diagnostika sinovlari kabi turli xil molekular usullarga mos keladi.
taq dna polimeraz bulk paketi yakuniy foydalanuvchining ehtiyojlarini hisobga olgan holda ishlab chiqilgan bo'lib, u odatdagi laboratoriya protokollari talab qiladigan ishonchlilik va yuqori ishlashli tadqiqotlar va sanoat sharoitlarida talab qilinadigan skalabillik bilan ta'minlanadi.
xususiyatlari
1. yuqori sezgirlik
2. yuqori kuchaytirish samaradorligi
birlikning taʼrifi
bir birlik platina taq DNK polimerazasi yuqori sodiqlik 10 nmol deoksiribonukleotidni oʻz ichiga oladi
74°C haroratda 30 daqiqa ichida kislota bilan tushishi mumkin bo'lgan materialga.
sifatni nazorat qilish
ikki va bir zanjirli endonukleaz faolligining funksional yo'qligi;
sofligi> 90% sds gel elektroforez orqali homogen.
har bir lotda inson DNK polimerazining 10 ng dan kam boʻlgan qismi amplifikatsiya qilinishi uchun sinovdan oʻtkaziladi
genomik DNK.
saqlash buferi
20 mm tris- hcl (ph 8.0), 0,1 mm edta, 1 mm dtt, 100 mm kcl, stabilizatorlar, 50% gliserol.
reaksiya aralashmasi o'rnatilgan
tarkibiy qism | hajmi | yakuniy konsentratsiya |
namuna | dna < 0,5 ug | talabga koʻra |
oldingi boshlang'ich (10 μm) | 1 μl | har biri 0,2-0,4 μm |
orqaga burilish (10 μm) | 1 μl | har biri 0,2-0,4 μm |
10xpcr reaksiya bufferi | 5 μl | 1 x |
2,5 mm dntps | 4 μl | 0,2 mm |
taq DNK polimerazasi | 0,5 μl | 2,5 birlik |
d2o yakuniy hajmga | 50 μl | qo'llanilmaydi |
tavsiya etilgan issiqlik siklini boshqarish sharoitlari
94°C 2-5 daqiqa
94°C 30 soniya
50-60°C 30 sek 30-35 tsikl
72°C 1-2 kb/min
72°C 5-10 daqiqa
paket tafsilotlari
-20 daraja haroratda yukni yuklab jo'natish