Термолабільна Ураціл-ДНК Глікосилаза (UNG) - Високоспецифічна для видалення dU у PCR та підготовці вибірки для NGS, покращуючи контроль якості ДНК

Опис

Урацил-ДНК гликозилаза (UNG), термолабільна - рекомбінантний протеїн, виробляється в E. coli з морської бактерії. Ензим гідролізує урацил-глікозидні зв'язки в U-ДНК односпрямної та двоспрямної ДНК, видаляючи урацил і створюючи основок-чутливі абазичні сайти в ДНК. Ензим неактивний щодо РНК та природної ДНК без урацилу. Оскільки Урацил-ДНК гликозилаза (UNG), термолабільна, не має потреб у металевих іонах, вона повністю активна в наявності EDTA.

Ураціл-ДНК Глікозилаза (UNG), Термолабільна може використовуватися разом із dUTP для видалення забруднень PCR "переносу" з попередніх реакцій синтезу ДНК. Для того, щоб зробити продукти PCR вразливими до розпаду, dTTP необхідно замінити на dUTP у мішку реакції PCR. Наступні мішки реакції PCR необхідно попередньо обробляти Ураціл-ДНК Глікозилазою (UNG), Термолабільною перед PCR для розкладу ДНК, що містить ураціл. Природна ДНК не містить урацілу, тому зразок не розпадається за допомогою цієї процедури.

Джерело: рекомбінантна E. coli

Концентрація та об'єм: 1Е/мкЛ

Застосування：

qPCR та Дигітальний PCR: Видалення урацілю з попередніх продуктів PCR, щоб запобігти повторній ампліфікації у наступних реакціях, збільшуючи чутливість і специфічність аналізу.

Секвенування наступного покоління (NGS): Критичний компонент у процесах підготовки вибірки NGS для видалення урацільових основ із забруднюючих молекул ДНК, поліпшуючи точність секвенування і зменшуючи фоновий шум.

Форензична аналітика: Надає більш точне та надійне виявлення слідків ДНК у форензичних вибірках шляхом мінімізації перехресного забруднення.

Виявлення метилів: У сполученні з методами бісульфітової конверсії, обробка UNG забезпечує видалення неметилованих цитозинів, які конвертувалися у ураціль, сприяючи аналізу метилів.

Видалення інгібіторів: Допомагає очистити ДНК шляхом гострожування пошкодженої або знищеної ДНК, що містить ураціль, таким чином покращуючи чистоту цільових послідовностей ДНК.

Термолабільний ураціл-ДНК глікозилазний ензим є незамінним інструментом для молекулярних біологів та дослідників, які займаються чутливими експериментами на основі нуклеїнових кислот, забезпечуючи вищій контроль над цілісністю вибірки ДНК та зменшуючи небажані артефакти, які могли б компрометувати результати експерименту.

Визначення одиниці

Одна одиниця визначається як кількість Урацил-ДНК гликозилази (UNG), необхідної для повного розкладання 1мкг очищеної одноживельової ДНК, що містить ураціл, при температурі 37°C протягом 60 хвилин.

Буфер зберігання

20мМ Tris-HCl (pH8.0), 0.1мМ EDTA, 100мМ KCl, 1мМ DTT, 0.5%(об/об) Tween-20, 0.5%(об/об) NP-40, 50%(об/об) глицерол.

Контроль якості

Чистота >99% за методом SDS-PAGE

Не містить забруднень ендонаucleазами, никазами, екзонуклеазами та RNase.

Термічна інактивація

50°C протягом 2 хвилин

Температура реакції

20~37°C протягом 10 хвилин.

Кількість використання

0.1~1U ензимів UNG на 50ул реакції.

Доставка та зберігання

Зберігати при -20°C, доставляти з гелевим льодом.