Продукти

Суперчистий Рибонуклеаза Інгібітор Розчин - RNase Інгібітор 40U/μl, Оптимальний для захисту РНК під час синтезу cDNA та молекулярно-біологічних досліджень

Вступ

Вступ

Опис продукту

Представляємо наш розчин інгібітора рибонуклеази високої чистоти, реактив преміум якості з інгібітор RNase в ультраконцентрованій формі 40 одиниць/мкл. Цей розчин спеціально розроблений для забезпечення максимальної захисту від рибонуклеаз під час обробки РНК у різних процедурах молекулярної біології.

Основні особливості

Неймовірна Чистота: Інгібітор Рибонуклеази виробляється рекомбінаційно та строго очищується, щоб гарантувати високий рівень чистоти, забезпечуючи відсутність впливу на ваші експерименти.
Суперконцентрована Формула: Доставляється у концентрації 40U/μl, цей інгібітор дозволяє ефективне використання у вимогливих застосуваннях, де навіть слідкі кількості RNase можуть пошкодити результати.
Широкодіюча Активність: Інгібітор ефективно нейтралізує велику кількість RNases A, B, C та інших ендо- та ексорибонуклеаз, захищаючи ваші проби RNA від деградації.
Стійкість та Активність: Створений для стійкості в розповсюдженні температур та рівня pH, інгібітор залишається активним під час зберігання та протягом різних експериментальних протоколів.
Сумісність: Ідеальний для використання з автоматизованими системами та реакціями, підготовленими вручну, він повністю сумісний з буферами та ензимами, які загалом використовуються при синтезі cDNA та маніпуляціях з нуклеїчними кислотами.

Заявки

Синтез cDNA: Незамінний для запобігання забруднення RNазою під час реакцій зворотнього транскриптування, що покращує виробництво та цілісність синтезованого cDNA.
Ізолювання та очищення RNA: Важливий компонент у наборах для екстракції RNA та робочих процесах очищення для збереження цілісності RNA до та після ізолювання.
Північний блотинг: Зabezпечує високоякісний перенос та гібридизацію RNA шляхом інгібування діяльності RNази, яка може розрушувати RNA на мембрани.
qPCR та RT-qPCR: Захищає шаблони RNA у количественних PCR-асаях та асаях зворотнього транскриптування количественної PCR, покращуючи чутливість та специфічність.
Дослідження взаємодії РНК-белки: зберігає молекули РНК під час ко-імунопrecипітації (RIP) та інших експериментів з дослідження взаємодії РНК-белок.

джерело

Штам E. coli, що виражає рекомбінантну копію гену інгібітора рибонуклеази з людської плаценти.

Концентрація

40 U/μl.

Визначення одиниці

Одна одиниця визначається як кількість рекомбінантного інгібітора рибонуклеази, необхідна для інгібування діяльності 5 нг рибонуклеази A на 50%.

Діяльність вимірюється шляхом інгібування гідролізу цитидину 2’3’-циклічного монофосфату рибонуклеазою A.

Буфер зберігання

20мM HEPES-KOH(PH7.6), 50мM KCl, 8мM DTT, 50%(v/v) глицерин

Сховище

Зберігати при -20°C

Контроль якості

Відсутність ендонуклеази

1μg ДНК Лямбда інкубуються з 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 16 годин при 37°C.

Після інкубації, ДНК Лямбда виявляється незміненою на агарозному гелі, забарвленому бромовою етیدіумом для підтвердження відсутності видимої ендонуклеази.

Відсутність нікейз

1μg типу I надвитківого pBR322 інкубуються з 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 4 годин при 37°C.

Після інкубації, надвиткову ДНК виявляють на агарозному гелі, забарвленому бромовим етідіумом, щоб підтвердити відсутність видимих розрізів або зрізів.

Відсутність ексонуклеази

1μg маркерів ДНК Лямбда/HindIII інкубуються з 200 одиницями інгібітора рибонуклеази протягом 16 годин при 37°C.

Після інкубації, маркери ДНК Лямбда/HindIII розділяються за допомогою 1% агарозного геля та забарвлюються бромовим етідіумом. Маркери залишаються у вигляді цілих смуг без розмазування.

Відсутність RNase та латентної RNase

Для перевірки наявності діяльності RNase, 1μg РНК є інкубованим з 200 одиницями Инhibiтору Рибонуклеази протягом 4 годин при 37°C.

Після інкубації, РНК визуалізується як цілий пас у гелі агарози, забарвленому бромовою етідіумом, для підтвердження відсутності видимої RNase.

Для перевірки наявності латентної діяльності RNase, 200 одиниць Инhibiтору Рибонуклеази денатуруються при 70°C протягом 15 хвилин і інкубуються з 1μg РНК протягом 4 годин при 37°C.

Фізична чистота

Чистота склада ≥95% за оцінкою методом SDS-поліакріламідного гелевого електрофорезу з забарвленням кобальтовим блакитом.

Примітки до використання

Инhibiтор Рибонуклеази активний у широкому діапазоні pH (pH5.5-9). Стандартне RT та in vitro транскрипція використовує Инhibiтор Рибонуклеази з кінцевою концентрацією 1μ/μl.