Thermolabile uracil-DNA glykosylase (ung) - enzym - mycket specifikt för avlägsnande av du vid pcr- och ngsprovberedning, vilket förbättrar DNA-kvalitetskontrollen

Beskrivning

Uracyl-dna glykosylase (ung), thermolabile är ett rekombinant protein i E. coli, från en marin bakterie. enzymet hydrolyserar uracyl-glykosidbindningar vid u-dna i enkel- och dubbelsträngad DNA, exciserar uracyl och skapar alkalisens

För att göra pcr- produkter misstänkta för nedbrytning måste dttp ersättas med dutp i pcr- reaktionsblandningen. Efterföljande pcr- reaktionsblandningar måste förbehandlas med uracil- dna- glykosylase (ung), termobild innan pcr för att nedbryta uracil- inneh

Källa: rekombinant E. coli

Koncentration och storlek: 1 u/μl

Tillämpningar:

qpcr och digital pcr: eliminering av uracil från tidigare pcr- produkter för att förhindra reamplifikation i efterföljande reaktioner, vilket ökar testens känslighet och specificitet.

Nästa generations sekvensering (NGS): En kritisk komponent i ngs provberedningsarbetsflöden för att avlägsna uracilbaser från förorenande DNA-molekyler, förbättra sekvensens noggrannhet och minska bakgrundsbuller.

rättsmedicinsk analys: gör det möjligt att på ett mer exakt och tillförlitligt sätt upptäcka spårmängder av DNA i rättsmedicinska prover genom att minimera korskontaminering.

Metylering: i kombination med bisulfitkonverteringsmetoder säkerställer ungbehandlingen att omvandlade metylerade cytosiner avlägsnas till uracil, vilket underlättar metyleringsanalysen.

Inhibitor- borttagning: hjälper till att rensa DNA genom att smälta nedbrytts eller skadat DNA som innehåller uracil, vilket ökar renheten hos måldna DNA- sekvenser.

Det termobildbara urasil-dna-glykosylasenzymet är ett oumbärligt verktyg för molekylära biologer och forskare som utför känsliga nukleinsyror baserade experiment, vilket ger överlägsen kontroll över DNA-provets integritet och minskar oönskade artefakter som kan äventyra experimentets resultat.

Enhetsdefinition

En enhet definieras som den mängd uratsildna-glykosylase (ung) som krävs för att helt nedbryta 1 μg renat ensträngat uratsildna-innehållande dna vid 37°c på 60 minuter.

lagringsbuffert

20 mm tris- hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0, 5% (v/ v) mellan 20, 0, 5% (v/ v) np-40, 50% (v/ v) glycerol.

Kvalitetskontroll

renhet> 99% per sds-sida

Ingen kontaminering av endonukleas, nikase, exonukleas och rnase.

värmeinaktivering

50°c i 2 min.

Reaktionstemperatur

20-37°C i 10 min.

Användningsmängd

0,1 till 1 u ungenzymer per 50 ul-reaktion.

Transport och förvaring

Förvaras vid 20°C, skickas med gelis.