Hög ren ribonukleashämmare lösning - rnasehämmare 40 u/μl, optimal för rna-skydd i cdna-syntes och molekylärbiologi

Produktbeskrivning

Introducerar vår Högt Ren Ribonukleas Inhibitorlösning, ett högkvalitativt reagens medRnasehämmarevid en ultrakoncentrerad 40 Enheter/μl. Denna lösning är specifikt utformad för att ge maximalt skydd mot ribonukleaser under RNA-hantering i olika molekylärbiologiska procedurer.

Huvudsakliga egenskaper

• Exceptionell renhet: ribonukleashämmaren tillverkas genom rekombination och renas strikt för att garantera en hög renhet, vilket säkerställer att inga störningar sker i dina experiment.

• Ultrakoncentrerad formel: levereras i en koncentration av 40 u/μl, gör denna hämmare effektiv för användning i krävande tillämpningar där även spårmängder av rnase kan äventyra resultaten.

• brett spektrum: Hämmaren neutraliserar effektivt ett brett spektrum av rnaser a, b, c och andra endo- och exoribonukleaser, vilket skyddar dina RNA- prover från nedbrytning.

• stabil och aktiv: formulerad för stabilitet över ett antal temperaturer och pH- förhållanden, förblir hämmaren aktiv under lagring och under olika experimentella protokoll.

• Kompatibilitet: Perfekt för användning med automatiserade system och handberedda reaktioner, fullt kompatibel med buffrar och enzymer som vanligtvis används i CDNA-syntes och nukleinsyramanipulationsteknik.

Ansökningar

• CDNA- syntes: nödvändig för att förhindra rnaskontaminering under omvänd transkriptionsreaktioner, vilket förbättrar avkastningen och integriteten av syntetiserat CDNA.

• Rna-isolerande och rening: en viktig komponent i rna-extraktionssatser och reningsarbetsflöden för att upprätthålla rna-integriteten före och efter isolering.

• Northern blotting: säkerställer högkvalitativ RNA-överföring och hybridisering genom att hämma rnasaktivitet som kan degraderas av RNA på membran.

• qpcr och rt- qpcr: skyddar RNA- mönster i kvantitativa pcr- och omvänd transkription kvantitativa pcr- tester, vilket ökar känsligheten och specificiteten.

• Studier av RNA- proteininteraktioner: bevarar RNA- molekyler under coimmunprecipitation (rip) och andra RNA- proteininteraktionsförsök.

Källa

E. coli-stam som uttrycker en rekombinant klon som bär ribonukleashämmaregen från mänsklig placenta.

koncentration

40 m/l.

Enhetsdefinition

En enhet definieras som den mängd rekombinant ribonukleashämmare som krävs för att hämma aktiviteten hos 5 ng ribonukleas a med 50%.

Aktiviteten mäts genom hämning av hydrolysen av cytidin 23-cykliskt monofosfat av ribonukleas a.

lagringsbuffert

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% (v/v) glycerol

Förvaring

Förvaras vid -20°c

Kvalitetskontroll

avsaknad av endonukleas

1 μg lambda-dna inkuberas med 200 enheter ribonukleashämmare i 16 timmar vid 37°c.

Efter inkubation visualiseras lambda-DNA som intakt på en ethidiumbromidfärgad agarosgel för att kontrollera att det inte finns synlig endonukleas.

brist på nikase

1 μg typ i superspårat pbr322 inkuberas med 200 enheter ribonukleashämmare i 4 timmar vid 37°c.

Efter inkubation visualiseras det superspinnade DNA:t på en agarosgel färgad med ethidiumbromid för att kontrollera att det inte finns synliga snitt eller skärningar.

frånvaro av exonukleas

1 μg av lambda-dna/hindiii-markörer inkuberas med 200 enheter ribonukleashämmare i 16 timmar vid 37°c.

Efter inkubation separeras lambda-DNA/hindiii-markörerna med 1% agarosgel och färgas med ethidiumbromid. Markörerna förblir intakta band utan att smörjas.

Avsaknad av rnaser och latent rnaser

För att undersöka närvaron av rnasaktivitet inkuberas 1 ug rna med 200 enheter ribonukleashämmare i 4 timmar vid 37°c.

Efter inkubation visualiseras RNA som intakt band på en ethidiumbromidfärgad agarosgel för att kontrollera att rnase inte är synlig.

För att undersöka närvaron av latent rnaseaktivitet, denatureras 200 enheter av ribonukleashämmare i värme vid 70°C i 15 minuter och inkuberas med 1 ug rna i 4 timmar vid 37°C.

Efter inkubation visualiseras RNA som intakt band på en ethidiumbromidfärgad agarosgel för att kontrollera att rnase inte är synlig.

fysisk renhet

renheten är ≥ 95% enligt sds-polyacrylamidgel med coomassieblå färgning.

Användningsnot

Den standardiserade transkriptionen och in vitro transkriptionen använder en ribonukleashämmare vid en slutkoncentration på 1 u/ ul.