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Enzimas pcr e rt pcr

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Enzima termo-moleável uracil-DNA glicosilase (ung) - altamente específica para a remoção de du na preparação de amostras pcr e ngs, melhorando o controlo da qualidade do ADN

  • Introdução
Introdução

Descrição

A uracil-DNA glicosilase (ung), termolábil é uma proteína recombinante em E. coli, de bactéria marinha. A enzima hidrolisiza ligações uracil-glicosídicas em u-DNA em DNA de cadeia única e dupla, excisando uracil e criando locais abasicos sensíveis a

Para tornar os produtos de ADN suspeitos de degradação, o DTP deve ser substituído por DTP na mistura de reação de ADN. As misturas de reação de ADN subsequentes devem ser pré- tratadas com DTP antes de serem tratadas para degradar o ADN que contém uracil. O ADN nativo não contém uracil para


Fonte: E. coli recombinante


concentração e dimensão: 1 u/μl


Aplicações:

qpcr e pcr digital: eliminação de uracil de produtos pcr anteriores para evitar a reamplificação em reacções subsequentes, aumentando a sensibilidade e especificidade do ensaio.

sequenciamento de próxima geração (NGS): componente crítico nos fluxos de trabalho de preparação de amostras de NGS para remover as bases de uracila das moléculas de DNA contaminantes, melhorando a precisão da sequência e reduzindo o ruído de fundo.

Análise forense: permite a detecção mais precisa e confiável de quantidades de rastreio de ADN em amostras forenses, minimizando a contaminação cruzada.

Detecção da metilação: em conjunto com os métodos de conversão de bissulfito, o tratamento da ung assegura a remoção das citocinas não metiladas convertidas em uracil, facilitando a análise da metilação.

remoção de inibidores: ajuda na purificação do ADN, digerindo o ADN degradado ou danificado que contém uracil, aumentando assim a pureza das sequências de ADN alvo.

A enzima termo-moleável uracil-DNA glicosilase é uma ferramenta indispensável para biólogos moleculares e pesquisadores envolvidos em experiências sensíveis baseadas em ácidos nucleicos, oferecendo um controle superior sobre a integridade da amostra de DNA e reduzindo artefatos indesejados que podem comprometer os resultados exper


definição de unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de glicosilase de uracil-ADN (ung) necessária para degradar completamente 1 μg de ADN purificado unicondado que contenha uracil a 37°C em 60 minutos.


buffer de armazenamento

20 mm tris- hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0,5% (v/v) entre 20, 0,5% (v/v) np-40, 50% (v/v) glicerol.


controlo de qualidade

Purificação> 99% por página de SDS

Não há contaminação de endonuclease, nicase, exonuclease e rnase.


inativação por calor

50°C durante 2 minutos


temperatura de reação

20~37°C durante 10 minutos.


quantidade de utilização

0,1 a 1 u de enzimas ung por reação de 50 ul.


transporte marítimo e armazenagem

armazenar a 20°C, enviar com gel de gelo.


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