Solução de inibidor da ribonuclease de alta pureza - inibidor da rnase 40 u/μl, ideal para a proteção do RNA na síntese de cdna e aplicações de biologia molecular

Descrição do produto

Apresentando nossa Solução Inibidora de Ribonuclease de Alta Pureza, um reagente de qualidade premium comInibidor da rnaseem uma concentração ultra-concentrada de 40 Unidades/μl. Esta solução é especificamente projetada para fornecer máxima proteção contra ribonucleases durante o manuseio de RNA em vários procedimentos de biologia molecular.

Características principais

• Pureza excepcional: o inibidor da ribonuclease é produzido de forma recombinante e rigorosamente purificado para garantir um elevado grau de pureza, garantindo que não haja interferências nas suas experiências.

• Fórmula ultraconcentrada: fornecida a uma concentração de 40 u/μl, este inibidor permite uma utilização eficiente em aplicações exigentes, onde mesmo quantidades traços de rnase podem comprometer os resultados.

• atividade de amplo espectro: o inibidor neutraliza eficazmente uma ampla gama de RNAs a, b, c e outras endo- e exoribonucleases, salvaguardando as amostras de RNA da degradação.

• estável e ativo: formulado para estabilidade numa gama de temperaturas e condições de pH, o inibidor permanece ativo durante o armazenamento e durante vários protocolos experimentais.

• Compatibilidade: ideal para utilização com sistemas automatizados e reacções preparadas à mão, é totalmente compatível com tampões e enzimas comumente utilizadas na síntese de CDNA e técnicas de manipulação de ácidos nucleicos.

Aplicações

• Síntese de CDNA: essencial para prevenir a contaminação por rnase durante as reacções de transcrição reversa, melhorando assim o rendimento e a integridade do CDNA sintetizado.

• Isolamento e purificação do RNA: componente vital dos kits de extracção e dos fluxos de trabalho de purificação do RNA para manter a integridade do RNA antes e depois do isolamento.

• O Northern Blot: garante transferência e hibridação de RNA de alta qualidade inibindo a atividade da RNA que pode degradar o RNA nas membranas.

• qpcr e rt-qpcr: protege os modelos de RNA nos ensaios de pcr quantitativo e transcrição reversa, aumentando a sensibilidade e especificidade.

• Estudos de interacções RNA-proteína: preserva moléculas de RNA durante a co-imunoprecipitação (rip) e outros experimentos de interacção RNA-proteína.

fonte

Estirpe de e. coli que expressa um clone recombinante que transporta um gene inibidor da ribonuclease da placenta humana.

concentração

40 u/μl.

definição de unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de inibidor da ribonuclease recombinante necessária para inibir a actividade de 5ng de ribonuclease a em 50%.

A actividade é medida pela inibição da hidrólise do monofosfato ctidina 23-cíclico pela ribonuclease a.

buffer de armazenamento

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) glicerol

armazenamento

armazenar a -20°c

controlo de qualidade

ausência de endonuclease

1 μg de ADN lambda é incubado com 200 unidades de inibidor da ribonuclease durante 16 horas a 37°C.

Após a incubação, o ADN lambda é visualizado intacto num gel de agarose manchado com brometo de etidio para verificar a ausência de endonuclease visível.

ausência de niquase

1 μg de pbr322 de tipo i superenrolado é incubado com 200 unidades de inibidor da ribonuclease durante 4 horas a 37°C.

Após a incubação, o ADN superenrolado é visualizado num gel de agarose manchado com brometo de etidio para verificar a ausência de cortes ou cortes visíveis.

ausência de exonuclease

1 μg de marcadores de ADN lambda/hindiii é incubado com 200 unidades de inibidor da ribonuclease durante 16 horas a 37°C.

Após a incubação, os marcadores de ADN/hindiii de lambda são separados por 1% de gel de agarose e tingidos com brometo de etidio. Os marcadores permanecem como faixas intactas sem manchar.

ausência de rnase e rnase latente

Para testar a presença de actividade da rnase, 1 ug de rna é incubado com 200 unidades de inibidor da ribonuclease durante 4 horas a 37°C.

Após a incubação, o RNA é visualizado como uma banda intacta num gel de agarose manchado com brometo de etidio para verificar a ausência de rnase visível.

Para testar a presença de actividade latente da rnase, 200 unidades de inibidor da ribonuclease são desnaturadas a 70°C durante 15 minutos e incubadas com 1 uG de rna durante 4 horas a 37°C.

Após a incubação, o RNA é visualizado como uma banda intacta num gel de agarose manchado com brometo de etidio para verificar a ausência de rnase visível.

Purificação física

A pureza é ≥ 95%, avaliada por gel de poliacrilamida sds com coloração azul coomassie.

Nota de utilização

A transcrição padrão rt e in vitro utiliza um inibidor da ribonuclease numa concentração final de 1 u/ ul.