အပူထိန်းနိုင်သော Uracil-DNA Glycosylase (UNG) အင်ဇိုင်း - PCR နှင့် NGS နမူနာပြင်ဆင်မှုတွင် dU ကိုဖယ်ရှားရန်အတွက် အလွန်ထူးခြားပြီး DNA အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။

ဖော်ပြချက်

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile သည် E. coli တွင် ပြန်လည်ဖြစ်ပွားသော ပရိုတီန်ဖြစ်ပြီး၊ မာရင်းဘက်တီးရီယမ်မှ ဆင်းသက်သည်။ ဒီအင်ဇိမ်းက single- နှင့် double-stranded DNA တွင် U-DNA တွင် uracil-glycosidic ချိတ်ဆက်မှုများကို hydrolyzes လုပ်ပြီး uracil ကို excising လုပ်ပြီး DNA တွင် alkali sensitive abasic sites ကို ဖန်တီးသည်။ အင်ဇိမ်းက RNA တွင် နှင့် uracil-free DNA တွင် လုပ်ဆောင်မှုမရှိပါ။ Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile သည် metal ion requirements မရှိသောကြောင့် EDTA ရှိပြီးလည်း ပြည့်စုံစွာလုပ်ဆောင်နိုင်သည်။

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile သည် dUTP နှင့်အတူ သုံးလိုက်ပြီး ရှေ့ဆုံး DNA ဖြစ်စေခြင်းမှာယူမှု PCR “carry over” ကာကွယ်များကို ဖယ်ရှားရန်အတွက် အသုံးပြုနိုင်သည်။ PCR ထုတ်ကုန်များကို ဖျက်သိမ်းရန်အတွက် ပြောင်းလဲမှုများတွင် dTTP ကို PCR реакွင်မှာ dUTP ဖြင့် အစားထိုးရန်လိုအပ်ပါသည်။ Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile ကို PCR မှ ကြိုးပမ်းမှုများတွင် ပြုလုပ်ခြင်းအားလုံးမှာ ပြုလုပ်ခြင်းများကို ရှေ့ဆုံးမှာ ပြုလုပ်ရန်အတွက် အသုံးပြုရန်လိုအပ်ပါသည်။ မူရင်း DNA မှာ uracil မပါဝင်သောကြောင့် ဒေတာမှာ ဖျက်သိမ်းမှုမှ ကာကွယ်မှုများကို မပါဝင်ပါ။

Source: Recombinant E. coli

Concentration and Size: 1U/μL

အသုံးပြုမှု:

qPCR နှင့် Digital PCR: ရှေ့ဆုံး PCR ထုတ်ကုန်များမှ uracil ကို ဖယ်ရှားရန်အတွက်၊ နောက်ဆုံးမှာ ပြန်လည်ထုတ်ကုန်မှုများကို ကန့်သတ်ရန်အတွက်၊ စစ်ဆေးမှုသို့မဟုတ် အထူးသတ်မှတ်မှုကို တိုးတက်စေရန်အတွက် အသုံးပြုသည်။

Next-Generation Sequencing (NGS): NGS 샘플ပြုလုပ်မှုလုပ်ငန်းများတွင် ကာကွယ်မှု DNA မူလများမှ uracil bases ကို ဖယ်ရှားရန်အတွက် အရေးကြီးသောအစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်ပြီး၊ sequence accuracy ကို တိုးတက်စေရန်နှင့် background noise ကို လျော့ချရန်အတွက် အသုံးပြုသည်။

တရားဝင်ဆေးပညာဆိုင်ရာ ဆန်းစစ်မှု: အပြန်အလှန် ညစ်ညမ်းမှု လျော့နည်းစေခြင်းဖြင့် တရားဝင်ဆေးပညာဆိုင်ရာ နမူနာများတွင် DNA အနည်းငယ်ကို ပိုမိုတိကျပြီး ယုံကြည်စိတ်ချရစွာ ရှာဖွေနိုင်သည်။

မီသီလစ်ခြင်း ရှာဖွေခြင်း: ဘီဆူလ်ဖိုက် ပြောင်းလဲမှု နည်းစနစ်များနှင့်အတူ UNG ကုသမှုသည် မီသီလစ်မထားသော ဆိုက်တိုစင်များကို ယူရာဆစ်လ်သို့ ပြောင်းလဲပစ်ခြင်းဖြင့် မီသီလစ်မှု ဆန်းစစ်မှုကို လွယ်ကူစေသည်။

အတားအဆီးများ ဖယ်ရှားခြင်း: ယူရာဆစ်လ်ပါဝင်သော ပျက်စီးနေသော သို့မဟုတ် ပျက်စီးနေသော DNA ကို အစာခြေခြင်းဖြင့် DNA ကို သန့်စင်စေခြင်းဖြင့် ပစ်မှတ်ထားသော DNA အစဉ်များ၏ သန့်ရှင်းမှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။

Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase Enzyme သည် အာရုံခံသော နျူးကလိယက်အက်ဆစ်အခြေခံ စမ်းသပ်မှုများတွင် ပါဝင်နေသော မော်လီကျူး ဇီဝဗေဒပညာရှင်များနှင့် သုတေသီများအတွက် မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်ပြီး DNA နမူနာ၏ တည်ကြည်မှုအပေါ် ပိုမိုကောင်းမွန်သော ထိန်း

ယူနစ်အဓိပ္ပါယ်

One unit သည် 37°C တွင် 60min အတွင်း purified single-stranded uracil-containing DNA 1μg ကို ပြီးစီးစေရန်လိုအပ်သော Uracil-DNA Glycosylase (UNG) ၏ ပမာဏဖြစ်သည်။

Storage Buffer

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) glycerol.

အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု

Purity>99% by SDS page

Endonuclease, Nickase, Exonuclease နှင့် RNase မှ contamination မရှိပါ။

Heat inactivation

၅၀°စီ အတွက် ၂ မိနစ်

ပြောင်းလဲမှုအပူချိန်

၂၀~၃၇°စီ အတွက် ၁၀ မိနစ်.

သုံးစွဲရမည့်ပမာဏ

UNG အင်ဇိမ်း ၀.၁~၁U အတွက် ၅၀ul ပြောင်းလဲမှုတွင်.

ပို့ဆောင်ခြင်းနှင့် ထိ:both

-၂၀°စီ တွင် သိမ်းဆည်းပါ၊ ဂယ်လ်အိုင်ဖြင့် ပို့ဆောင်ပါ.