အပူပျော့ပျောင်းသော uracil-dna glycosylase (ung) enzyme - pcr နှင့် ngs နမူနာပြင်ဆင်ရာတွင် du ကိုဖယ်ရှားရန်အတွက် အလွန်ထူးခြားသော DNA အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှုကိုတိုးမြှင့်ပေးသည်။

သရုပ်ဖော်ချက်

uracil-dna glycosylase (ung), thermolabile သည် ပင်လယ် ဘက်တီးရီးယားမှ E. coli တွင် ပြန်လည်ပေါင်းစပ်သော ပရိုတင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ အင်ဇိုင်းသည် u-DNA တွင် တစ်မျှင်နှင့် နှစ်မျှင် DNA တွင် uracil-glycosidic bond များကို hydrolyzes လုပ်ပြီး uracil ကိုဖြတ်တောက်

Pcr-DNA glycosylase (ung) ကို Pcr နှင့်အတူ အသုံးပြုနိုင်ပြီး ယခင် DNA synthesis ဓာတ်ပြုမှုမှ pcr carry over ညစ်ညမ်းမှုများကို ဖယ်ရှားနိုင်သည်။ Pcr ထုတ်ကုန်များအား ဆွေးမြေ့မှုအတွက် သံသယရှိစေရန်အတွက် Pcr ဓာတ်ပြုမှု ရောစပ်မှုတွင် Dtt

အရင်းအမြစ်: recombinant E. coli

စုစည်းမှုနှင့် အရွယ်အစား: 1u/μl

အသုံးပြုမှု:

qpcr နှင့် digital pcr: နောက်ဆက်တွဲ ဓာတ်ပြုမှုတွေမှာ ပြန်လည်တိုးပွားမှုကို တားဆီးဖို့ ယခင်က pcr ထုတ်ကုန်တွေကနေ uracil ကို ဖယ်ရှားခြင်း၊ စမ်းသပ်မှု အာရုံခံနိုင်မှုနဲ့ တိကျမှုကို မြှင့်တင်ခြင်း။

next-generation sequencing (ngs): sequence တိကျမှုကို တိုးတက်စေပြီး နောက်ခံအသံကို လျှော့ချခြင်းဖြင့် ညစ်ညမ်းနေတဲ့ DNA မော်လီကျူးများမှ uracil base များကို ဖယ်ရှားရန် ngs နမူနာပြင်ဆင်မှု လုပ်ငန်းစဉ်များတွင် အရေးပါတဲ့ အစိတ်အပိုင်းဖြစ်သည်။

forensic analysis: cross-contamination ကို လျှော့ချခြင်းဖြင့် forensic နမူနာများတွင် DNA အနည်းငယ်ကို ပိုမိုတိကျပြီး ယုံကြည်စိတ်ချရစွာ ရှာဖွေနိုင်သည်။

methylation ကို ရှာဖွေခြင်း: bisulfite ကို ပြောင်းလဲမှု နည်းများနှင့်အတူ, ung ကုသမှုသည် methylated မဖြစ်သော cytosines ကို uracil သို့ပြောင်းခြင်းမှဖယ်ရှားခြင်းဖြစ်သည်, methylation ကိုစူးစမ်းမှုကိုကူညီသည်။

inhibitor remove: uracil ပါရှိသော degraded သို့မဟုတ် ပျက်စီးသော DNA ကို အစာခြေခြင်းဖြင့် DNA ကိုသန့်စင်စေခြင်းဖြင့် ပစ်မှတ် DNA အစဉ်၏သန့်ရှင်းမှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။

အပူထိန်းနိုင်သော uracil-dna glycosylase enzyme သည် အာရုံခံနိုင်သော nucleic acid အခြေခံ စမ်းသပ်မှုများတွင် ပါဝင်နေသော မော်လီကျူး ဇီဝဗေဒပညာရှင်များနှင့် သုတေသီများအတွက် မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်ပြီး DNA နမူနာ၏ တည်ကြည်မှုအပေါ် ပိုမိုကောင်းမွန်သော ထိန်းချုပ်မှုကို ပေးနိုင်ပြီး စမ်းသပ်

ယူနစ်အနက်ဖွင့်ချက်

ယူနစ်တစ်ခုကို uracil-dna glycosylase (ung) ပမာဏအဖြစ် သတ်မှတ်ထားပြီး ၁μg သန့်စင်ထားတဲ့ တစ်မျှင် uracil ပါတဲ့ DNA ကို ၃၇°c မှာ မိနစ် ၆၀ အတွင်း အပြည့်အဝ ဆွေးမြေ့ဖို့ လိုအပ်ပါတယ်။

သိုလှောင်ရေး ဘူဖာ

20mm tris-hcl (ph8.0), 0.1mm edta, 100mm kcl, 1mm dtt, 0.5% (v/v) ကြား-20, 0.5% (v/v) np-40, 50% (v/v) glycerol ကို

အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု

စင်ကြယ်မှု > ၉၉%

endonuclease, nickase, exonuclease နဲ့ rnase တို့နဲ့ ညစ်ညမ်းမှု မရှိပါ။

အပူဓာတ်မဝင်ရောက်ခြင်း

၅၀ ဒီဂရီစီ ၂ မိနစ်ကြာ

ဓာတ်ပြုမှု အပူချိန်

၁၀ မိနစ်ကြာ ၂၀ ~ ၃၇ ဒီဂရီစီ

အသုံးပြုမှု ပမာဏ

50ul ဓာတ်ပြုမှုတစ်ခုမှာ ung အင်ဇိုင်း ၁ ယူနစ်

ပို့ဆောင်ရေးနှင့် သိုလှောင်ခြင်း

-၂၀ ဒီဂရီ စင်တီဂရိတ်မှာ သိမ်းထားပြီး ရေခဲခဲနဲ့ ပို့ပေးပါ။