super high fidelity DNA polymerase ကို သုံးပါတယ်။

52x taq ရဲ့သစ္စာရှိမှု၊ hotstar၊ super amplification၊ ရှုပ်ထွေးတဲ့ high fidelity pcr အတွက်

သရုပ်ဖော်ချက်

super high fidelity DNA polymerase ဟာ မြန်ဆန်၊ မြင့်မားတဲ့ အသံချဲ့ထွင်မှု ထိရောက်မှုနဲ့ မြင့်မားတဲ့ DNA polymerase မျိုးပါ။
5′ မှ 3′ dna polymerase activity နှင့် 3′ မှ 5′ exonuclease activity တို့ကို ပြသပေးသည်။

၎င်းရဲ့ လှုပ်ရှားမှုဇုန်က ပိုလီမာပေါင်းစပ်ထားတဲ့ ပိုမိုကောင်းမွန်တဲ့ ဇုန်ပါ၊ အထူးဖွဲ့စည်းမှုက သစ္စာရှိမှုနဲ့ အသံချဲ့ထွင်မှု ထိရောက်မှုကို ကြီးမားစွာ မြှင့်တင်ပေးတယ်။
သစ္စာရှိမှုက ယေဘုယျ taq polymerase ရဲ့ ၅၂ ဆနဲ့ pfu polymerase ရဲ့ ၆ ဆပါ။

အသံချဲ့နှုန်းက 15-30 sec/kb ဖြစ်လို့ တုံ့ပြန်မှု အချိန်ကို အများကြီး လျှော့ချပေးပါတယ်။

အထူးသဖြင့် DNA အပိုင်းအခြားရှည် clone အတွက် အသုံးဝင်ပြီး > 10kb အပိုင်းအခြားချဲ့ထွင်မှုမှာ ကြီးမားတဲ့ အကျိုးရှိပြီး ချဲ့ထွင်မှု အပိုင်းအခြားဟာ 20kb အထိ ကြာနိုင်ပါတယ်။

3' အဆုံးမှာ "a" မရှိရင် blunt end vector မှာ clone လုပ်လို့ရပါတယ်။ clone လုပ်ချင်ရင် pcr ထုတ်ကုန်တွေ အဆုံးမှာ "a" ကို ထည့်ပေးသင့်ပါတယ်။

မြင့်မားတဲ့ အချဲ့အထက်နှုန်း၊ မြင့်မားတဲ့ အချဲ့အထက်ထိရောက်မှုနဲ့ မြင့်မားတဲ့ သစ္စာရှိမှု လက္ခဏာတွေရှိပါတယ် ဗီဇကို ကလော့၊ နေရာအလိုက် အပြောင်းအလဲဖြစ်စဉ်နဲ့ snp စတာတွေမှာ သုံးလို့ရပါတယ်

လက္ခဏာများ

super high fidelity: super fi polymerase ရဲ့ fidelity က taq polymerase ရဲ့ ၅၀ ဆနဲ့ pfu polymerase ရဲ့ ၆ ဆပါ။

အမြန်နှုန်းမြင့်: တိုးပွားမှုနှုန်းက 15-30 sec/kb ဖြစ်ပြီး pfu ရဲ့ လျှော့ချမှုထိရောက်မှုနဲ့ လျှော့ချမှုနှုန်းအမှားကို အောင်မြင်စွာ ကျော်လွှားနိုင်ပါတယ်

အထူးသဖြင့် အရှည်ကြီးတဲ့ အပိုင်းအစအတွက်ပါ။ အပိုင်းအစဟာ 20kb အထိ ရှိနိုင်ပါတယ်။

လျှောက်ထားခြင်း

genome DNA clone, cdna clone, long pcr, high fidelity pcr, complex DNA pcr site-specific mutagenesis နဲ့ snp စတာတွေပေါ့။

သတ်မှတ်ချက်များ

စုစည်းမှု: ၂ ယူနစ်/မီလီတာ

သိုလှောင်ခြင်း- ၂၀ ဒီဂရီ စင်တီဂရိတ် အပူချိန်တွင် သိုလှောင်ထားပါ

အိတ်: အဝယ်အထည်များ

အမိန့်