Super High Fidelity DNA Polymerase ကို အသုံးပြုခြင်း
- အကြောင်းအရာ
အကြောင်းအရာ
Taq, Hotstar ထက် 52 ဆိုင်း မြင့်မားသော သီးသန့်စွမ်းအင်၊ ရှုပ်ထွေးသော PCR High Fidelity PCR အတွက်
ဖော်ပြချက်
Super High Fidelity DNA Polymerase သည် မြန်မားသော၊ မြင့်မားသော အထူးသဖွယ်မှုနှင့် သီးသန့်စွမ်းအင်ကို ပိုမိုမြင့်မားစေသော DNA Polymerase အမျိုးအစားဖြစ်သည်။
5′ မှ 3′ သို့ DNA polymerase activity နှင့် 3′ မှ 5′ သို့ exonuclease activity.
Polymeric enhanced area နှင့် ပေါင်းစပ်ထားသော ဒေသ၏ လုပ်ဆောင်မှုအတွက် အထူးဖွဲ့စည်းပုံက သီးသန့်စွမ်းအင်နှင့် ရှုပ်ထွေးမှုကို အများကြီးတိုးတက်စေသည်။
အများသူငှာ Taq Polymerase ထက် 52 ဆိုင်း၊ Pfu polymerase ထက် 6 ဆိုင်း သီးသန့်စွမ်းအင်ရှိသည်။
ရှုပ်ထွေးမှုအမြန်မှာ 15-30 စက္ကန့်/KB ဖြစ်ပြီး၊ реакောင်းအချိန်ကို အများကြီးလျော့နည်းစေသည်။
အထူးသဖွယ်အားဖြင့် >10KB fragment amplification တွင် ရှုပ်ထွေးမှုအတွက် အသုံးဝင်သည်၊ ရှုပ်ထွေးမှုပိုင်းကို အရှည်ဆုံး 20 KB အထိ ရှိနိုင်သည်။
အဆုံးမှာ "A" မရှိ၊ blunt end vector ထဲသို့ clone လုပ်နိုင်သည်။ T/A clone လုပ်ချင်ရင် PCR ထုတ်ကုန်တွင် အဆုံးမှာ "A" ထည့်ရမည်။
အမြင့်ဆုံးထိန်းသိမ်းမှု၊ အမြင့်ဆုံးထုတ်လုပ်မှုအစွမ်းနှင့် အမှန်တကယ်ဖြစ်စေသည့် ဂုဏ်သို့မဟုတ် site-specific mutagenesis နှင့် SNP တို့အတွက်အသုံးပြုနိုင်သည်။
အင်္ဂါရပ်များ
Super High Fidelity: Super Fi polymerase ၏ မှန်ကန်မှုသည် Taq Polymerase ထက် 50 ဆ ပိုမြင့်ပြီး Pfu polymerase ထက် 6 ဆ မြင့်သည်။
High Speed: ထုတ်လုပ်မှုအမြန်သည် 15-30 sec/KB ဖြစ်ပြီး Pfu ၏ အမြန်ဆုံးထိန်းသိမ်းမှုနှင့် အမြန်ဆုံးထုတ်လုပ်မှုအစွမ်းကို အောင်မြင်စွာ ဖျက်သိမ်းနိုင်သည်။
အရှည်ဆုံး fragment မှာ 20KB အထိ ဖြစ်နိုင်သည်။
အသုံးပြုမှု
genomic DNA clone၊ cDNA clone၊ Long PCR၊ High Fidelity PCR၊ complex DNA PCR site-specific mutagenesis နှင့် SNP စသည်တို့အတွက်အသုံးပြုနိုင်သည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
Hot Start | မရှိ |
Fidelity (vs. Taq) | 52X |
Polymerase | Super Fidelity DNA Polymerase |
အဆုံးမှတ်ထုတ်ကုန်အရွယ်(များ) | ၂၀ ကီဘီ သို့မဟုတ် ပိုမို |
တောင်းဆိုခြင်းပုံစံ | ခွဲထားသောအစိတ်အပိုင်းများ |
တောင်းဆိုခြင်းအမြန် | ၁၅-၃၀ ဒet/ကီဘီ |
GC-Rich PCR | သက်ဆိုင်မှု |
အထုပ်အရွယ်အစား | အစုလိုက် |
PCR ထုတ်ကုန် Overhang | Blunt |
ပို့ဆောင်မည့် အခြေအနေ | သံချိုးရေ / ရေလေးချိုးတောင်း |
Exonuclease Activity | 3' - 5' |
အရေအတွက် : 2 u/µl
သိမ်းဆည်းမှု : -20°C တွင် ထိန်းသိမ်းပါ
ထုပ်ပိုး : Bulk
အမိန့်
PC06 | Super Fidelity DNA Polymerase | Taq, Hotstar ထက် 52 ဆိုင်း မြင့်မားသော သီးသန့်စွမ်းအင်၊ ရှုပ်ထွေးသော PCR High Fidelity PCR အတွက် |