အလွန်သန့်စင်သော ribonuclease inhibitor solution - rnase inhibitor 40u/μl၊ CDNA synthesis နှင့် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒ အသုံးများတွင် rna ကာကွယ်မှုအတွက် အကောင်းဆုံး

ထုတ်ကုန်ဖော်ပြချက်

ကျွန်ုပ်တို့၏ အထူးသန့်ရှင်းသော Ribonuclease Inhibitor ဖြေရှင်းချက်ကို မိတ်ဆက်ပါ၊ အထူးပြုလုပ်ထားသောrnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnase inhibitor rnaseအလွန်အထူးပြုလုပ်ထားသော 40 Units/μl အဆင့်မြင့်အရည်အသွေးရှိသော ရေဓာတ်ဖြေရှင်းချက်။ ဤဖြေရှင်းချက်သည် မျိုးစိတ်ဗေဒလုပ်ငန်းစဉ်များတွင် RNA ကို ကိုင်တွယ်ရာတွင် ribonucleases များမှ အများဆုံးကာကွယ်မှုကို ပေးရန် အထူးပြုလုပ်ထားသည်။

အဓိက လက္ခဏာများ

• ထူးခြားတဲ့ စင်ကြယ်မှု: ribonuclease inhibitor ကို ပြန်လည်ပေါင်းစပ်ထုတ်လုပ်ပြီး စင်ကြယ်မှု အဆင့်မြင့်ကို အာမခံဖို့ တင်းကျပ်စွာ သန့်စင်ပေးထားပြီး သင့်စမ်းသပ်မှုတွေမှာ အနှောက်အယှက်မရှိတာ သေချာစေတယ်။

• ultra-concentrated formula: 40u/μl ပမာဏဖြင့် ပေးပို့ထားသော ဤ inhibitor သည် rnase ၏ သေးနုပ်သော ပမာဏများပင် ရလဒ်များကို ထိခိုက်စေနိုင်သည့် စိန်ခေါ်မှုရှိသည့် အသုံးများတွင် ထိရောက်စွာ အသုံးပြုနိုင်သည်။

• ကျယ်ပြန့်သော သက်ရောက်မှု: ပိတ်ပင်ဆေးသည် rnases a, b, c နှင့် အခြား endo- နှင့် exoribonucleases များ၏ ကျယ်ပြန့်သော အစိတ်အပိုင်းများကို ထိရောက်စွာ သယ်ဆောင်သွားပြီး သင့်ရဲ့ rna နမူနာများကို ပျက်စီးခြင်းမှ ကာကွယ်ပေးသည်။

• တည်ငြိမ်ပြီး တက်ကြွပါတယ်။ အပူချိန်နဲ့ ph အခြေအနေ အမျိုးမျိုးမှာ တည်ငြိမ်မှုအတွက် ပြုစုထားပြီး ထိန်းချုပ်ဆေးဟာ သိုလှောင်ထားစဉ်နဲ့ စမ်းသပ်မှု မူဝါဒ အမျိုးမျိုးအတွင်း တက်ကြွနေတုန်းပါ။

• Compatibility: အလိုအလျောက်စနစ်များနှင့် လက်နဲ့ပြင်ဆင်သော ဓာတ်ပြုမှုများနှင့် အသုံးပြုရန်အသင့်တော်သည်။ CDNA synthesis နှင့် nucleic acid manipulation နည်းပညာများတွင် အများအားဖြင့် အသုံးပြုသော buffers နှင့် enzyme များနှင့် အပြည့်အဝ ကိုက်ညီသည်။

လျှောက်ထားမှု

• CDNA synthesis: ပြန်လှန်ရေးကူးယူမှု ဓာတ်ပြုမှုများအတွင်း rnase ညစ်ညမ်းမှုကို ကာကွယ်ရန်အတွက် အရေးကြီးပြီး ထို့ကြောင့် synthesized CDNA ၏ထုတ်လုပ်မှုနှင့် တည်ကြည်မှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။

• rna သီးခြားခွဲခြားခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်း: rna သီးခြားခွဲခြားခြင်းမတိုင်မီနှင့်နောက်ပိုင်း rna တည်ကြည်မှုကို ထိန်းသိမ်းရန် rna extraction kits များနှင့် သန့်စင်မှု လုပ်ငန်းစဉ်များတွင် အရေးပါတဲ့ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။

• northern blotting: အသားလွှာပေါ်တွင် RNA ကို ပြိုကွဲစေနိုင်သော rnase လှုပ်ရှားမှုကို တားဆီးခြင်းဖြင့် အရည်အသွေးမြင့် RNA လွှဲပြောင်းခြင်းနှင့် မျိုးစပ်ခြင်းများကို အာမခံပေးသည်။

• qpcr နှင့် rt-qpcr: အရေအတွက် pcr နှင့် ပြောင်းပြန်ကူးယူမှု အရေအတွက် pcr စမ်းသပ်မှုများတွင် rna ပုံစံများကို ကာကွယ်ပေးပြီး အာရုံခံနိုင်ရည်နှင့် တိကျမှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။

• rna-protein interaction လေ့လာမှုများ- co-immunoprecipitation (rip) နှင့် အခြား rna-protein interaction စမ်းသပ်မှုများအတွင်း rna မော်လီကျူးများကို ထိန်းသိမ်းပေးသည်။

အရင်းအမြစ်

လူ့အိမ်တင်ကနေ ribonuclease inhibitor ဗီဇကို သယ်ဆောင်တဲ့ recombinant clone ကို ဖော်ပြတဲ့ e. coli မျိုးစိတ်ပါ။

စုစည်းမှု

၄၀ ယူနစ်/မီလီလီတာ

ယူနစ်အနက်ဖွင့်ချက်

တစ်ယူနစ်ကို 5ng ribonuclease a ရဲ့ လုပ်ဆောင်မှုကို ၅၀% နှိမ့်ချဖို့ လိုအပ်တဲ့ ပြန်လည်ပေါင်းစပ်တဲ့ ribonuclease inhibitor ပမာဏအဖြစ် သတ်မှတ်ပါတယ်။

cytidine 23-cyclic monophosphate ကို ribonuclease a က hydrolysis ကို တားဆီးခြင်းဖြင့် တိုင်းတာသည်။

သိုလှောင်ရေး ဘူဖာ

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) glycerol ကို

သိုလှောင်ခြင်း

-၂၀ ဒီဂရီ စင်တီဂရိတ် အပူချိန်တွင် သိုလှောင်ထားပါ

အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု

endonuclease မရှိခြင်း

lambda DNA 1μg ကို ribonuclease inhibitor 200 unit နဲ့ 37°c မှာ ၁၆ နာရီကြာ စိုက်ပျိုးပေးတယ်။

အပျိုးဖော်ပြီးနောက် မြင်သာတဲ့ endonuclease မရှိတာကို စစ်ဆေးဖို့ ethidium bromide နဲ့ ဆေးခြယ်ထားတဲ့ agarose gel ပေါ်မှာ lambda DNA ကို မပျက်စီးဘဲ မြင်နိုင်အောင် မြင်နိုင်ပါတယ်။

နီကာဇ မရှိခြင်း

Type I supercoiled pbr322 ရဲ့ 1μg ကို ribonuclease inhibitor ယူနစ် ၂၀၀ နဲ့ 37°c မှာ ၄ နာရီကြာ စိုက်ပျိုးပေးတယ်။

အပင်ကို စိုက်ပျိုးပြီးနောက်မှာ မြင်သာတဲ့ အခြစ်အယှက်တွေ မရှိတာကို စစ်ဆေးဖို့ အီသီဒျမ်ဘရိုမီဒနဲ့ ညစ်ညမ်းထားတဲ့ အာဂါရိုဇီ ဂျယ်တစ်ခုပေါ်မှာ အပေါ်ကွင်းထားတဲ့ DNA ကို မြင်နိုင်အောင် မြင်နိုင်ပါတယ်။

exonuclease မရှိခြင်း

lambda dna/hindiii အမှတ်အသား ၁μg ကို ribonuclease inhibitor ယူနစ် ၂၀၀ နဲ့ ၃၇°c မှာ ၁၆ နာရီကြာ စိုက်ပျိုးပေးတယ်။

အပင်ကို စိုက်ပျိုးပြီးနောက် lambda DNA/hindiii အမှတ်အသားတွေကို ၁% agarose gel နဲ့ ခွဲထုတ်ပြီး ethidium bromide နဲ့ ဆေးခြယ်ပါတယ်။ အမှတ်အသားတွေဟာ မလိမ်းဘဲ မပျက်စီးတဲ့ ဘားတွေအဖြစ် ကျန်ရစ်ပါတယ်။

rnase မရှိခြင်းနှင့် latent rnase မရှိခြင်း

rnase လှုပ်ရှားမှုရှိမရှိကို စမ်းသပ်ရန် rnase 1ug ကို ribonuclease inhibitor 200 unit ဖြင့် 37°c တွင် ၄ နာရီကြာ စိုက်ပျိုးပေးသည်။

အပင်ကို စိုက်ပျိုးပြီးနောက်မှာ မြင်သာတဲ့ rnase မရှိတာကို စစ်ဆေးဖို့ ethidium bromide နဲ့ ဆေးခြယ်ထားတဲ့ agarose gel ပေါ်မှာ intact band အဖြစ် RNA ကို မြင်ယောင်ကြည့်တယ်။

rnase လှုပ်ရှားမှုရှိမရှိကို စမ်းသပ်ရန် ribonuclease inhibitor 200unit ကို 70°c တွင် ၁၅ မိနစ်ကြာ အပူပိုင်းမှွဲပြီး 37°c တွင် rna 1ug ဖြင့် ၄ နာရီကြာ စိုက်ပျိုးပေးသည်။

အပင်ကို စိုက်ပျိုးပြီးနောက်မှာ မြင်သာတဲ့ rnase မရှိတာကို စစ်ဆေးဖို့ ethidium bromide နဲ့ ဆေးခြယ်ထားတဲ့ agarose gel ပေါ်မှာ intact band အဖြစ် RNA ကို မြင်ယောင်ကြည့်တယ်။

ရုပ်ပိုင်း သန့်ရှင်းမှု

အသားအရေဟာ ≥95% ဖြစ်ပြီး coomassie blue staining နဲ့ sds-polyacrylamide gel နဲ့ အကဲဖြတ်ထားတယ်။

အသုံးပြုမှု မှတ်စု

ပုံမှန် rt နှင့် in vitro transcription သည် ribonuclease inhibitor ကို 1u/ ul ၏ နောက်ဆုံးအကျပ်အတည်းတွင်အသုံးပြုသည်။