Enżima termolabbli Uracil-DNA Glycosylase (UNG) - Speċifika ħafna għat-Tneħħija tad-DU fil-PCR u l-Preparazzjoni tal-kampjun NGS, li ttejjeb il-kontroll tal-kwalità tad-DNA

Deskrizzjoni

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabile hija proteina riċombinanti f’E. coli, minn bacterju marittimu. L-enzim idroliża liġamentijiet uracil-glicosidika f’U-DNA fi DNA bħaddija u żofa excizzjoni uracil u ikkrea sitijiet abasiku sensibli għall-alkali fi l-DNA. L-enzim ma jkunx attiv fuq RNA u DNA oriġinali, liberu minn uracil. Mintech l-Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabile ma tħtieġixx xi rekwizitu ta' jonijiet meta, jiġri kumplutament attiv f’preżenza ta' EDTA.

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabile jistgħu jkunu uża bil-dUTP biex jneħdu b’kontaminazzjoni ‘carry over’ f’produkti PCR minn reazioni preċedenti ta’ sintesi tal-DNA. Biex jġibu l-prodotti PCR susseptibli għall-degradazzjoni, dTTP għandek tisostitwi bill-dUTP fil-miks tal-reakżjoni PCR. Il-miksi tal-reakżjoni PCR li jvieni dwar għandhom jiġu prettatati bl-Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Termolabile qabel il-PCR biex jagħmlu degradazzjoni tal-DNA li jiekli uracil. Il-DNA nativ ma jikkonteniex uracil, ikkollha l-isempli ma jkunx magħmud mill-proċedura.

Sors: E. coli riċombinanti

Konċentrazzjoni u Dimanzi: 1U/μL

Applikazzjonijiet:

qPCR u Digital PCR: Eliżżija tal-uracil minn prodotti PCR preċedenti biex jimpedi re-amplifikazzjoni f’reazioni sussegwenti, mgħaddem sensibilità u speċifika tal-assaj.

Sequenċarju ta’ Generazzjoni li Jmiss: Komponenti kritiku fl-apreparazzjoni tal-isempi NGS biex jneħdu b’basijiet uracil minn molekuli DNA kontaminanti, mgħaddem l-preċiżzzjoni tal-sekwenza u jridu ż-noj tal-bakkground.

Analisi Forense: Jippermeti detekzjoni aktar u piżżabli ta' kwantitajiet żgħar ta' DNA fili sampjoli foreneki biex minimizzja l-inkross kontaminazzjoni.

Detekzzjoni ta' Metilazzjoni: Fil-konjunt mal-metodi ta' konverżjoni bisulfitika, it-treatament UNG jimgħid il-rimuvali tal-citosini mimetilati li jagħmlu konverżjoni għal uracil, ipperfissandu l-analizz tal-metilazzjoni.

Rimuvali ta' Inhibitori: Tisperma purifikazzjoni tal-DNA bħala digestja tal-DNA degradat jew dammiegħa li jiekonteċja uracil, inkjużendu l-purità tal-sekwenzi tal-DNA obbiettivu.

L-Enzim Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase huwa strument indispensabbli għall-bioloġi molekulari u għall-riċercanti li jkunu magħmul fi eskperjenzi sensibli bbażati fuq nukleiku, offrend kontroll supirjuri wara l-integrità tal-sampjoli ta' DNA u miemminend effetti indesirabili li jistgħu jkompromittu l-iskopjett tal-esperiment.

Definizzjoni Unità

Unità waħda tigħdef kif ukoll kantità ta' Uracil-DNA Glycosylase (UNG) meħtieġa biex tkompliti degradazzjoni ta' 1μg ta' DNA purifikat singoli-strand li jiekonteċja uracil bażati fuq 37°C f’60 minuti.

Kuċċetta ta' Konservazzjoni

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) glicerol.

Kontroll ta' Qualità

Nettuna>99% bil-SDS page

Ma jkun kontaminazzjoni ta' Endonuclease, Nickase, Exonuclease u RNase.

Deattivazzjoni bil-għerq

50°C għal 2 min

Temperatura tal-reazzjoni

20~37°C għal 10 min.

Kantità ta' użu

0.1~1U tal-enzimi UNG fis-singlij reazzjoni ta' 50ul.

Trasport u konservazzjoni

Ħażma fl-20°C, iskona ma' gel ice.