Enżima termolabbli uracil-DNA glikożilażi (ung) - speċifika ħafna għat-tneħħija tad-du fil-preparazzjoni tal-kampjun pcr u ngs, li ttejjeb il-kontroll tal-kwalità tad-DNA
- introduzzjoni
introduzzjoni
deskrizzjoni
L- enżima tiddrawlizza rabtiet urasil- glikożidiku f' u- DNA b' ħbula waħda u doppja u toħloq siti abasċi sensittivi għall- alkali fid- DNA. L- enżima hija inattiva fuq l- RNA u fuq l- DNA naturali, mingħajr urasil.
URACIL- DNA GLYCOZYLASE (UNG), thermomobile jista'jintuża ma'DUTP biex jelimina l- pcr jġorr aktar kontaminazzjonijiet minn reazzjonijiet ta'sinteżi ta'DNA preċedenti. biex il- prodotti ta'PCR ikunu suspettati li jistgħu jiġu degradati
sors: E. coli rikombinanti
konċentrazzjoni u daqs: 1 u/μl
applikazzjonijiet:
qpcr u pcr diġitali: l- eliminazzjoni ta'uracil minn prodotti ta'pcr preċedenti biex tiġi evitata l- amplifikazzjoni mill- ġdid f' reazzjonijiet sussegwenti, li jżidu s- sensittività u l- speċifiċità tal- assay.
sekwenzjar ta' ġenerazzjoni li jmiss (ngs): komponent kritiku fil-flussi ta' ħidma ta' preparazzjoni ta' kampjuni ngs biex jitneħħew il-bażijiet ta' uracil minn molekuli ta' DNA li jkunu qed jikkontaminaw, tittejjeb il-preċiżjoni tas-sekwenza u jitnaqqas l-istor
analiżi forensika: tippermetti dettestjar aktar preċiż u affidabbli ta' traċċi ta' DNA f'kampjuni forensiki billi timminimizza l-kontaminazzjoni inkroċjata.
Dettestjar tal-metilazzjoni: flimkien ma' metodi ta' konverżjoni tal-bisulfite, it-trattament tal-ung jiżgura t-tneħħija taċ-ċitosiini mhux metilati li jinbidlu f'uracil, u dan jiffaċilita l-analiżi tal-metilazzjoni.
tneħħija tal- inibitur: jgħin fit- tindif tad- DNA billi jiddiġerixxi d- DNA degrada jew bil- ħsara li fiha l- uracil, u b' hekk itejjeb il- purità tas- sekwenzi tad- DNA fil- mira.
L-enżima thermolabile uracil-DNA glycosylase hija għodda indispensabbli għall-bijoloġi molekulari u r-riċerkaturi involuti f'esperimenti sensittivi bbażati fuq aċidi nukleini, li joffru kontroll superjuri fuq l-integrità tal-kampjun tad-DNA u jnaqqsu artifatti mhux mixtie
definizzjoni ta' unità
unità waħda hija definita bħala l-ammont ta' glikożilażi ta' uracil-dna (ung), meħtieġa biex 1μg ta' dna purifikat li fih uracil b'katina waħda jiġi degradat kompletament f'37°c fi 60 minuta.
buffer tal-ħażna
20 mm tris- hcl (ph8.0), 0. 1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0. 5% (v/v) bejn-20, 0. 5% (v/v) np-40, 50% (v/v) gliserol.
kontroll tal-kwalità
Purità > 99% skont il-paġna sds
l-ebda kontaminazzjoni ta' endonukleasi, nikkażi, eżonukleasi u rnażi.
inattivazzjoni bis-sħana
50°c għal 2 minuti
temperatura tar-reazzjoni
20 ~ 37 °C għal 10 minuti.
ammont ta' użu
0.1 ~ 1 u ta' enzimi ung għal kull reazzjoni ta' 50ul.
trasport u ħażna
maħżun f'-20°C, mibgħut bil-ġel tal-ġelu.