soluzzjoni ta' inibitur ta' ribonuclease pur ħafna - inibitur ta' rnase 40u/μl, ottimali għall-protezzjoni ta' rna fis-sintesi ta' cdna u applikazzjonijiet fil-bijoloġija molekulari

deskrizzjoni tal-prodott

Introducing our Highly Pure Ribonuclease Inhibitor Solution, a premium quality reagent featuringInibitur ta'rnasef'konċentrazzjoni ultra għolja ta' 40 Units/μl. Din is-soluzzjoni hija speċifikament inġiniera biex tipprovdi protezzjoni massima kontra r-ribonukleasi waqt it-trattament tal-RNA f'varji proċeduri tal-bijoloġija molekulari.

karatteristiċi ewlenin

• purità eċċezzjonali: l-inibitur tar-ribonuclease huwa prodott b'mod rikombinanti u purifikat b'mod strett biex jiggarantixxi grad għoli ta' purità, li jiżgura li ma jkun hemm l-ebda interferenza mal-esperimenti tiegħek.

• formula ultra-konċentrata: ipprovduta f'konċentrazzjoni ta' 40 u/μl, dan l-inibitur jippermetti użu effiċjenti f'applikazzjonijiet li jitolbu ħafna fejn anki ammonti żgħar ta' rnase jistgħu jikkompromettu r-riżultati.

• attività ta'spettru wiesa': l- inibitur jinnewtralizza b' mod effettiv firxa wiesgħa ta'rnases a, b, c, u endo- u exoribonucleases oħra, u jipproteġi l- kampjuni ta'rna tiegħek mid- degradazzjoni.

• stabbli u attiv: ifformulati għall- stabbiltà fuq firxa ta'temperaturi u kundizzjonijiet ta'ph, l- inibitur jibqa'attiv waqt il- ħażna u matul diversi protokolli sperimentali.

• kompatibilità: ideali għall-użu ma' sistemi awtomatizzati u reazzjonijiet ippreparati bl-idejn, hija kompletament kompatibbli ma' buffers u enżimi użati komunement fis-sintesi ta' CDNA u tekniki ta' manipolazzjoni ta' aċidi nukleini.

applikazzjonijiet

• Sinteżi ta'CDNA: essenzjali għall- prevenzjoni ta'kontaminazzjoni ta'rnase waqt reazzjonijiet ta'traskrizzjoni inversa, u b' hekk tittejjeb il- rendiment u l- integrità ta'CDNA sintetizzata.

• iżolament u purifikazzjoni tar-RNA: komponent vitali fil-kits ta' estrazzjoni tar-RNA u fl-iskemi ta' purifikazzjoni biex tinżamm l-integrità tar-RNA qabel u wara l-iżolament.

• Il-blotting tat-tramuntana: jiżgura trasferiment u ibridazzjoni ta'RNA ta'kwalità għolja billi jinibixxi l-attività ta'rnase li tista'tiddegrada l- RNA fuq il- membrani.

• qpcr u rt- qpcr: jipproteġi l- mudelli ta'RNA f' testijiet kwantitattivi ta'pcr u traskrizzjoni bil- mod, u dan itejjeb is- sensittività u l- speċifiċità.

• Studji ta'interazzjonijiet ta'RNA- proteina: jippreserva l- molekuli ta'RNA waqt il- ko- immunopreċipitazzjoni (rip) u esperimenti oħra ta'interazzjoni ta'RNA- proteina.

sors

razez ta' e. coli li jesprimu klon rikombinanti li jġorr ġene ta' inibitur tar-ribonuclease mill-plaċenta umana.

konċentrazzjoni

40 u/μl.

definizzjoni ta' unità

unità waħda hija definita bħala l-ammont ta' inibitur rikombinanti tar-ribonuclease meħtieġ biex inibixxi l-attività ta' 5ng ta' ribonuclease a b'50%.

L- attività hija mkejla bl- inibizzjoni tal- idroliżi tas- cytidine 23- cyclic monophosphate minn ribonuclease a.

buffer tal-ħażna

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) gliserol

ħażna

maħżun f' -20°c

kontroll tal-kwalità

nuqqas ta'endonuclease

1 μg ta' lambda dna jiġi inkubat b' 200 unità ta' inibitur tar- ribonuclease għal 16- il siegħa f' 37°c.

wara l-inkubazzjoni, id-DNA tal-lambda jiġi viżwalizza bħala intatt fuq ġel ta' agarose mdawwar bil-bromur tal-etjidu biex jiġi vverifikat l-assenza ta' endonukleasi viżibbli.

assenza ta' nikasa

1 μg ta' pbr322 tip i superkollat jiġi inkubat b'200 unità ta' inibitur tar-ribonuclease għal 4 sigħat f'temperatura ta' 37°c.

wara l-inkubazzjoni, id-DNA super-coiled jiġi viżwalizza fuq ġel ta' agarose mdawwar bil-bromur tal-etjidu biex jiġi vverifikat l-assenza ta' xquq jew qtugħ viżibbli.

nuqqas ta'exonuclease

1 μg ta' markers tal-DNA lambda/hindiii jiġu inkubati b'200 unità ta' inibitur tar-ribonuclease għal 16-il siegħa f'temperatura ta' 37°c.

wara l-inkubazzjoni, il-markaturi tal-DNA tal-lambda/indiii jiġu separati minn ġel ta' 1% agarose u mdawra bil-bromur tal-etjidu. Il-markaturi jibqgħu bħala strixxi intatti mingħajr ma jitnaddfu.

assenza ta'rnase u rnase latenti

biex jiġi ttestjat il-preżenza ta' attività ta' rnase, 1 ug ta' rna tiġi inkubata b'200 unità ta' inibitur ta' ribonuclease għal 4 sigħat f'temperatura ta' 37°c.

Wara l-inkubazzjoni, l-RNA jiġi viżwalizza bħala band intatt fuq ġel ta' agarose mdawwar bil-bromur tal-etidju biex jiġi vverifikat l-assenza ta' rnase viżibbli.

Biex jiġi ttestjat il-preżenza ta' attività latenti ta' rnase, 200 unità ta' inibitur tar-ribonuclease jiġu denaturati bis-sħana f'temperatura ta' 70°c għal 15-il minuta u inkubati b'1 ug ta' rna għal 4 sigħat f'temperatura ta' 37°c

Wara l-inkubazzjoni, l-RNA jiġi viżwalizza bħala band intatt fuq ġel ta' agarose mdawwar bil-bromur tal-etidju biex jiġi vverifikat l-assenza ta' rnase viżibbli.

purità fiżika

il-purità hija ≥95% kif ġudikat bil-ġel ta' sds-polyacrylamide b'kulur blu ta' coomassie.

nota ta' użu

L- inibitur tar- ribonuclease huwa attiv fuq firxa wiesgħa ta'pH (ph5. 5-9). it- traskrizzjoni standard rt u in vitro tuża inibitur tar- ribonuclease f' konċentrazzjoni finali ta'1 u/ ul.