Enzima termomobile uracil-DNA glicosilasi (ung) - altamente specifico per la rimozione del du nella preparazione del campione pcr e ngs, migliorando il controllo della qualità del DNA
- Introduzione
Introduzione
Descrizione
L' enzima idrolizza i legami urasi-glicosidici all' u-DNA in DNA a singolo e doppio filamento, escludendo l' uracile e creando siti abascici sensibili agli alcali nel DNA. L' enzima è inattiva sull' RNA e sul DNA nativo, senza uracile.
Per rendere i prodotti di pcr suscettibili di degradazione, il dttp deve essere sostituito con dutp nel miscuglio di reazione pcr. Le successive miscele di reazione pcr devono essere pretrattate con uracil-dna glicosilasi (ung), termomobili prima di pcr per degradarne
fonte: E. coli ricombinante
concentrazione e dimensione: 1 u/μl
applicazioni:
qpcr e pcr digitale: eliminazione dell'uracile dai prodotti precedenti di pcr per evitare la reamplificazione nelle reazioni successive, aumentando la sensibilità e la specificità del test.
sequenziamento di nuova generazione (ngs): componente critico nei flussi di lavoro di preparazione del campione ngs per rimuovere le basi di uracile dalle molecole di DNA contaminanti, migliorando la precisione della sequenza e riducendo il rumore di fondo.
analisi forense: consente di rilevare in modo più preciso e affidabile tracce di DNA nei campioni forensi riducendo al minimo la contaminazione incrociata.
rilevazione della metilazione: in combinazione con i metodi di conversione della bisulfite, il trattamento a base di ung assicura la rimozione delle citosine non metilate convertite in uracile, facilitando l'analisi della metilazione.
eliminazione degli inibitori: aiuta a purificare il DNA digerendo il DNA degradato o danneggiato contenente uracile, migliorando così la purezza delle sequenze di DNA bersaglio.
L'enzima termoalimentare uracil-DNA glicosilasi è uno strumento indispensabile per i biologi molecolari e i ricercatori impegnati in esperimenti sensibili basati su acidi nucleici, offrendo un controllo superiore sull'integrità del campione di DNA e riducendo gli artefatti indesiderati che potrebbero compromettere i
definizione di unità
una unità è definita come la quantità di glicosilasi di uracile-DNA (ung) necessaria per degradare completamente 1 μg di DNA purificato a un filo singolo contenente uracile a 37°C in 60 minuti.
buffer di stoccaggio
20 mm tris- hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0,5% (v/v) tra 20, 0,5% (v/v) np-40, 50% (v/v) glicerolo.
controllo della qualità
Purezza > 99% per pagina di SDS
Nessuna contaminazione di endonucleasi, nicasi, esonucleasi e rnasi.
inattivazione termica
50°c per 2 minuti
temperatura di reazione
20°C a 37°C per 10 minuti.
quantità di utilizzo
0,1 - 1 u di enzimi ung per reazione di 50 ul.
spedizione e stoccaggio
conservare a 20°C, spedire con ghiaccio.