Soluzione inibitore della ribonucleasi di alta purezza - inibitore della rnasi 40 u/μl, ottimale per la protezione dell'RNA nella sintesi del cdna e nelle applicazioni di biologia molecolare

Descrizione del prodotto

Introducendo la nostra soluzione di inibitore di ribonucleasi altamente pura, un reagente di qualità premium conInibitore della rnasinaa una concentrazione ultra-concentrata di 40 Unità/μl. Questa soluzione è specificamente progettata per fornire la massima protezione contro le ribonucleasi durante la manipolazione dell'RNA in varie procedure di biologia molecolare.

caratteristiche principali

• Purezza eccezionale: l'inibitore della ribonucleasi è prodotto in modo ricombinante e rigorosamente purificato per garantire un elevato grado di purezza, garantendo l'assenza di interferenze nei vostri esperimenti.

• formula ultraconcentrata: fornita a concentrazione di 40 u/μl, questo inibitore consente un uso efficiente in applicazioni impegnative in cui anche tracce di rnasi possono compromettere i risultati.

• attività ad ampio spettro: l' inibitore neutralizza efficacemente una vasta gamma di RNA a, b, c e altre endo- ed esoribonucleasi, salvaguardando i campioni di RNA dalla degradazione.

• stabile e attivo: formulato per la stabilità in una gamma di temperature e condizioni di pH, l'inibitore rimane attivo durante lo stoccaggio e durante i vari protocolli sperimentali.

• Compatibilità: ideale per l'uso con sistemi automatizzati e reazioni preparate a mano, è pienamente compatibile con tamponi ed enzimi comunemente utilizzati nella sintesi di CDNA e nelle tecniche di manipolazione degli acidi nucleici.

Applicazioni

• Sintesi di CDNA: essenziale per prevenire la contaminazione da rnasi durante le reazioni di trascrizione inversa, migliorando così la resa e l' integrità del CDNA sintetizzato.

• Isolamento e depurazione dell'RNA: componente vitale dei kit di estrazione dell'RNA e dei flussi di lavoro di depurazione per mantenere l'integrità dell'RNA prima e dopo l'isolamento.

• Northern blotting: garantisce un trasferimento di RNA e un'ibridazione di alta qualità inibendo l'attività delle rnases che potrebbero degradare l'RNA sulle membrane.

• qpcr e rt-qpcr: protegge i modelli di RNA nei test quantitativi di pcr e di trascrizione inversa, migliorando sensibilità e specificità.

• Studi di interazioni RNA-proteine: conserva le molecole RNA durante la co-immunoprecipitazione (rip) e altri esperimenti di interazione RNA-proteina.

fonte

e. coli che esprime un clone ricombinante che porta il gene inibitore della ribonucleasi dalla placenta umana.

concentrazione

40 u/μl.

definizione di unità

una unità è definita come la quantità di inibitore della ribonucleasi ricombinante necessaria per inibire l'attività di 5ng di ribonucleasi a del 50%.

L' attività è misurata inibendo l' idrolisi del monofosfato ciclico di citidina 23 da parte della ribonucleasi a.

buffer di stoccaggio

20 mm di hepes-koh ((ph7.6), 50 mm di kcl, 8 mm di dtt, 50% di glicerolo

immagazzinamento

conservare a -20°c

controllo della qualità

assenza di endonucleasi

1 μg di DNA lambda viene incubato con 200 unità di inibitore della ribonucleasi per 16 ore a 37°C.

Dopo l'incubazione, il DNA lambda viene visualizzato intatto su un gel di agarosio macchiato di bromuro di etidio per verificare l'assenza di endonucleasi visibile.

assenza di nicchia

1 μg di pbr322 supercoiled di tipo i viene incubato con 200 unità di inibitore della ribonucleasi per 4 ore a 37°C.

dopo l'incubazione, il DNA supercolato viene visualizzato su un gel di agarosio macchiato di bromuro di etidio per verificare l'assenza di tagli o tagli visibili.

assenza di esonucleasi

1 μg di marcatori di lambda dna/hindiii viene incubato con 200 unità di inibitore della ribonucleasi per 16 ore a 37°c.

Dopo l'incubazione, i marcatori di lambda-DNA/hindiii vengono separati da un gel di agarosio all'1% e colorati con bromuro di etidio. I marcatori rimangono intatti come bande senza macchiare.

assenza di rnasi e rnasi latente

per verificare la presenza di attività rnasica, 1 ug di rna viene incubato con 200 unità di inibitore della ribonucleasi per 4 ore a 37°C.

Dopo l'incubazione, l'RNA viene visualizzato come banda intatta su un gel di agarosio macchiato di bromuro di etidio per verificare l'assenza di rnasi visibile.

Per verificare la presenza di attività latente della rnasi, 200 unità di inibitore della ribonucleasi vengono denaturate termicamente a 70°C per 15 minuti e incubate con 1 ug di rna per 4 ore a 37°C.

Dopo l'incubazione, l'RNA viene visualizzato come banda intatta su un gel di agarosio macchiato di bromuro di etidio per verificare l'assenza di rnasi visibile.

purezza fisica

la purezza è ≥ 95%, valutata con gel di sds-poliacrilammide con colorazione blu coomassie.

nota di utilizzo

La trascrizione standard rt e in vitro utilizza un inibitore della ribonucleasi a una concentrazione finale di 1 u/ ul.