Enzim urasil-DNA glikosilase (ung) yang mudah terbakar - sangat spesifik untuk penghapusan du dalam persiapan sampel pcr dan ngs, meningkatkan kontrol kualitas DNA
- pengantar
pengantar
deskripsi
uracil-dna glikosilase (ung), termolabil adalah protein rekombinan dalam E. coli, dari bakteri laut. enzim hidrolisis ikatan urasil-glikosida di u-DNA dalam DNA berantai tunggal dan ganda yang mengecualikan uracil dan menciptakan situs abasik sensitif alkali di DNA. enzim tidak aktif pada RNA dan
Urasil-DNA glikosilase (ung), termolabil dapat digunakan dengan DTP untuk menghilangkan pcr membawa lebih dari kontaminasi dari reaksi sintesis DNA sebelumnya. untuk membuat produk pcr yang dicurigai terdegradasi, DTP harus diganti dengan DTP dalam campuran reaksi pcr. campuran reaksi pcr berikutnya harus diproses terlebih dahulu
sumber: rekombinan E. coli
konsentrasi dan ukuran: 1 u/μl
aplikasi:
qpcr dan pcr digital: penghapusan uracil dari produk pcr sebelumnya untuk mencegah re-amplifikasi dalam reaksi berikutnya, meningkatkan sensitivitas dan spesifisitas tes.
Next-generation sequencing (NGS): komponen penting dalam alur kerja persiapan sampel ngS untuk menghilangkan basa uracil dari molekul DNA yang terkontaminasi, meningkatkan akurasi urutan dan mengurangi kebisingan latar belakang.
analisis forensik: memungkinkan deteksi lebih akurat dan dapat diandalkan dari jejak jumlah DNA dalam sampel forensik dengan meminimalkan kontaminasi silang.
Deteksi metilasi: dalam hubungannya dengan metode konversi bisulfit, pengolahan ung memastikan penghapusan sitosin yang tidak metilasi yang dikonversi menjadi uracil, memfasilitasi analisis metilasi.
Penghapusan inhibitor: membantu dalam memurnikan DNA dengan mencerna DNA terdegradasi atau rusak yang mengandung uracil, sehingga meningkatkan kemurnian urutan DNA target.
enzim glikosilase uracil-dna yang mudah terbakar adalah alat yang sangat diperlukan bagi ahli biologi molekuler dan peneliti yang terlibat dalam eksperimen berbasis asam nukleat sensitif, menawarkan kontrol yang lebih baik atas integritas sampel DNA dan mengurangi artefak yang tidak diinginkan yang dapat membahayakan hasil eksperimen.
definisi unit
satu unit didefinisikan sebagai jumlah glikosilase uracil-dna (ung), yang dibutuhkan untuk sepenuhnya mendegradasi 1μg uracil tunggal-stranded yang dimurnikan yang mengandung DNA pada 37°c dalam 60 menit.
Buffer penyimpanan
20 mm tris-hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0,5% (v/v) antara 20, 0,5% (v/v) np-40, 50% (v/v) gliserol.
Kontrol kualitas
kemurnian > 99% per halaman sds
tidak ada kontaminasi endonukleasa, nikase, eksonukleasa dan rnase.
Inaktivasi panas
50°c selama 2 menit
suhu reaksi
20 ~ 37 ° C selama 10 menit.
jumlah penggunaan
0,1 ~ 1 u enzim ung per reaksi 50ul.
Pengiriman dan penyimpanan
Simpan pada suhu 20°C, kirim dengan es gel.