Termolabiilne uracil-DNA glükosülaas (ung) ensüüm - väga spetsiifiline pcr ja ngs proovivalmistamisel du eemaldamiseks, parandades DNA kvaliteedi kontrolli

kirjeldus

Uracill-DNA glükosülaas (ung), termolütabil on e. coli rekombineeriv valk, mis on saadud merebakterist. Ensüüm hüdrolüüsib uracill-glükosüüdi sidemeid u-DNA-s ühekordses ja topeltkiudses DNA-s,

et teha pcr- tooted lagunemisele kahtlusaluks, tuleb pcr- reaktsiooni segu asendada dttp- ga. Järgmised pcr- reaktsiooni segude esmakordne töötlemine peab olema uracil- DNA glükosülaasiga (ung), enne pcr- degradeerimist on termomobiilne uracilli sisaldav DNA

allikas: rekombineeriv E. coli

kontsentratsioon ja suurus: 1 u/μl

rakendused:

qpcr ja digitaalne pcr: uracilli eemaldamine varasemast pcr- toodetest, et vältida järgnevate reaktsioonide kordusamplifikatsiooni, suurendades analüüsi tundlikkust ja spetsiifsust.

Järgmise põlvkonna järjestus (ngs): oluline osa ngs proovivalmistusprotsessist, et eemaldada uracillibaasid DNA molekulidest, parandades järjestuse täpsust ja vähendades taustamüra.

õigusekspertiisi analüüs: võimaldab tuvastada DNA jälgimiskoguseid õigusekspertiisi proovides täpsemini ja usaldusväärsemalt, vähendades ristsaastet.

Metüleerimise tuvastamine: koos bisulfiidi konverteerimismeetoditega tagab ung-ravi metüleerimata tsütosiinide eemaldamise, mis muundatakse uraciliks, hõlbustades metüleerimise analüüsi.

Inhibiitorite eemaldamine: aitab DNA puhastamisel uracilli sisaldavat lagunenud või kahjustatud DNA' t seedides, suurendades seega sihtDNA järjestuste puhtust.

termomoduliivne uracil-DNA glükosülaasi ensüüm on molekulaarbioloogide ja tundlike nukleonsaadide põhjal tehtud katsete jaoks hädavajalik vahend, pakkudes DNA proovi terviklikkuse üle paremat kontrolli ja vähendades soovimatuid artefakte, mis võivad ohustada eksperimentaalseid tulemusi.

üksuse määratlus

üks ühik on uracilli-dna glükosülaasi (ung) kogus, mis on vajalik 1 μg puhastatud ühekordse uracilli sisaldava DNA täielikuks lagunemiseks 37 °C juures 60 minuti jooksul.

säilituspuffer

20 mm tris- hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0, 5% (v/v) gliserooli, 0, 5% (v/v) np-40, 50% (v/v).

kvaliteedi kontroll

puhtus> 99% SDS-leheküljel

ei ole endonukleaasi, nikaaasi, eksonukleaasi ja rnaasi saastumist.

soojus- inaktiveerimine

50°C 2 minuti jooksul

reaktsiooni temperatuur

20~37°C 10 minutit.

kasutuse kogus

0,1 kuni 1 u ung-ensüüme 50 ul reaktsiooni kohta.

veoteenindus ja ladustamine

säilitada temperatuuril 20 °C, saata geelijääga.