Kõrge puhtusest ribonukleaasi inhibiitori lahus - rnaasi inhibiitor 40 u/μl, optimaalne rna kaitseks CDNA sünteesis ja molekulaarbioloogia rakendustes

Toote kirjeldus

Tutvustame meie kõrgelt puhast ribonukleaasi inhibiitori lahust, kvaliteetset reaktiivi, mis sisaldabrnaasi inhibiitorultra-kontsentreeritud 40 Üksust/μl. See lahus on spetsiaalselt loodud maksimaalse kaitse tagamiseks ribonukleaaside eest RNA käsitlemisel erinevates molekulaarbioloogia protseduurides.

Peamised omadused

• erandlik puhtus: ribonukleaasi inhibiitor on toodetud rekombinantselt ja rangelt puhastatud, et tagada kõrge puhtusastme, tagades, et teie katsed ei häiri.

• ultrakontsentreeritud valem: toodetud 40 u/μl kontsentratsioonis, võimaldab see inhibiitor tõhusat kasutamist nõudlikel rakendustel, kus isegi väikesed rnaasi kogused võivad kahjustada tulemusi.

• laias spektris toimimine: inhibiitor neutraliseerib tõhusalt paljude rnaasi a, b, c ja teiste endo- ja eksoribonukleaaside hulka, kaitses teie rna proove lagunemisest.

• stabiilne ja aktiivne: inhibiitor on koostatud stabiilsuse tagamiseks erinevates temperatuurides ja pH- tingimustes ning jääb aktiivseks ladustamise ajal ja erinevate katsetöötlusprotseduuride ajal.

• ühilduvus: ideaalne kasutamiseks automaatsete süsteemidega ja käsitsi valmistatud reaktsioonidega, on täielikult ühilduv puhvri ja ensüümidega, mida kasutatakse tavaliselt CDNA sünteesi ja nukleonhapete manipuleerimise tehnikates.

taotlused

• CDNA süntees: oluline rnaasi saastumise vältimiseks pöördtranskriptsiooni reaktsioonide ajal, parandades seega sünteesitud CDNA tootlikkust ja terviklikkust.

• RNS isolatsioon ja puhastamine: RNS ekstraktsiainetes ja puhastamisprotsessides on oluline komponent, et säilitada RNS terviklikkus enne ja pärast isolatsiooni.

• Põhjalik blotting: tagab kvaliteetse RNA- üleandmise ja hübriidi, inhibeerides rnaasi aktiivsust, mis võib kahjustada rna- t membraanidel.

• qpcr ja rt- qpcr: kaitseb rna näidiseid kvantitatiivses pcr- ja pöördtranskriptsiooni kvantitatiivses pcr- analüüsis, suurendades tundlikkust ja spetsiifsust.

• RNS-valgu koostoimete uuringud: säilitab RNS molekule koimmunoprecipitatsiooni (rip) ja muude RNS-valgu koostoimete eksperimentide ajal.

allikas

e. coli tüve, mis väljendab rekombinantset klooni, mis kannab inimplatsenta ribonukleaasi inhibiitori geeni.

kontsentratsioon

40 u/μl.

üksuse määratlus

üks ühik on määratletud kui rekombineeriva ribonukleaasi inhibiitori vajalik kogus, mis inhibeerib 5 ng ribonukleaasi a aktiivsust 50% võrra.

Cytediin 23- tsüklilisest monofosfaatist ribonukleaasi a poolt hidrolüüsi inhibeerimisega mõõdetakse selle aktiivsust.

säilituspuffer

20 mm hepes-koh (ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% (v/v) glütserool

säilitamine

säilitada temperatuuril -20°c

kvaliteedi kontroll

endonukleaasi puudumine

1 μg lambda DNA inkubeeritakse 200 ühikut ribonukleaasi inhibiitorit 16 tunni jooksul temperatuuril 37°C.

Pärast inkubatsiooni kujutatakse lambda DNA-d eetiidiumbromiidiga värvitud agarosegelil tervena, et kontrollida nähtava endonukleaasi puudumist.

nikasa puudumine

1 μg I tüüpi superkoelist pbr322 inkubeeritakse 200 ühikut ribonukleaasi inhibiitorit 4 tundi 37°C juures.

Pärast inkubatsiooni visualiseeritakse superkooritud DNA etiidiumbromidiga värvitud agarosegelil, et kontrollida nähtavate näpistuste või lõikuste puudumist.

eksonukleaasi puudumine

1 μg lambda DNA/hindiii markereid inkubeeritakse 200 ühikut ribonukleaasi inhibiitorit 16 tunni jooksul temperatuuril 37°C.

Pärast inkubatsiooni eraldatakse lambda DNA/hindiii markeri 1% agarosegeliga ja värvitakse etiidiumbromidiga. Markerid jäävad tervena, ilma et neid määritaks.

rnaasi puudumine ja latentne rnaas

Rnaasi aktiivsuse tuvastamiseks inkubeeritakse 1 ug rna 200 ühikut ribonukleaasi inhibiitorit 4 tundi 37°C juures.

Pärast inkubatsiooni kujutatakse RNA-d ehteta ribana etiidiumbromiidiga värvitud agarosegelil, et kontrollida nähtava rnaasi puudumist.

Kui uuritakse latentse rnaasi aktiivsuse esinemist, denatureeritakse 200 ühikut ribonukleaasi inhibiitorit kuumuses 70°C juures 15 minutit ning inkubeeritakse 1 ug rnaga 4 tundi 37°C juures.

Pärast inkubatsiooni kujutatakse RNA-d ehteta ribana etiidiumbromiidiga värvitud agarosegelil, et kontrollida nähtava rnaasi puudumist.

füüsiline puhtus

puhtus on ≥ 95%, mida hinnatakse sds-polüakrülamiidgeeliga koos coomassie sinise värvusega.

kasutamismärkus

Ribonukleaasi inhibiitor on aktiivne laias pH vahemikus (ph5. 5-9).