Kõrgelt puhas ribonukleaasi inhibiitor lahus - RNase inhibiitor 40U/μl, optimaalne RNA kaitseks cDNA sünteesis ja molekulaarbioloogia rakendustes

Toote kirjeldus

Tutvustame meie kõrgelt puhast ribonukleaasi inhibiitori lahust, kvaliteetset reaktiivi, mis sisaldab rnaasi inhibiitor ultra-kontsentreeritud 40 Üksust/μl. See lahus on spetsiaalselt loodud maksimaalse kaitse tagamiseks ribonukleaaside eest RNA käsitlemisel erinevates molekulaarbioloogia protseduurides.

Peamised omadused

• Erakordne Puhastus: Ribonukleasi Inihibitor toodetakse rekombinantsete meetodite abil ja puhastatakse rangelt, et tagada kõrge puhastuse tase ning kindlustada, et need ei sega sinu eksperimente.

• Ülemine Tugevusvormel: Pakutav 40U/μl tugevuses, lubab selle inihibitori efektiivset kasutamist nõudvaides rakendustes, kus isegi väiksed RNase jäägid võivad tulemusi kompromitteerida.

• Lai Aktiivsus: Inihibitor neutraalibefektiliselt laia spektri RNase A, B, C ning muude endo- ja eksoribonukleaside, kaitseb sinu RNA näidiseid degradatsiooni eest.

• Stabiilne ja aktiivne: On vormistatud stabiilsuseks erinevates temperatuurides ja pH tingimustes, inhibiitor jääb aktiivseks salvestamise ajal ja erinevates eksperimentaalsetes protokollides.

• Kompatiiblus: Sobib kasutada automaatsystemidega ja käe ette valmistatud reaktsioonidega, see on täielikult kompatiibilne puhastite ja enzyymi ningoksünteesi ja nukleiinhape manipuleerimismeetoditega tavaliselt kasutatavate.

Rakendused

• cDNA süntees: Oluline RNase kontsentratsiooni vältimiseks pöörde transkriptsiooni reaktsioonides, mis parandab süntetiseeritud cDNA tootlikkust ja puhtaolu.

• RNA eraldamine ja puhastamine: Väga oluline osa RNA eraldussetest kitsidest ja puhastusprotsessidest, et säilitada RNA puhasolu enne ja pärast eraldamist.

• Põhja pliid: Tagab kvaliteetse RNA ülekanumise ja hübriidisatsiooni, takistades RNase tegevust, mis võiks RNA membraanidel halvustada.

• qPCR ja RT-qPCR: Kaitses RNA malli定量 PCR ja pöörde transkriptsiooni quantitatiivsesse PCR-assajdes, suurendades tundlikkust ja spetsiifika.

• RNA- ja proteiinide vaheliste suhete uuringud: säilitab RNA molekuleid ko-immunoprecipitatsiooni (RIP) ajal ja teistes RNA-proteiinide vaheliste suhete eksperimentides.

allikas

E. coli strand, mis väljendab rekombinantset klooni, mis kandeb inimplasentas olevat ribonukleasi inhibiitorigeeni.

Kontsentraatsioon

40 U/μl.

Ühikute defineerimine

Üks ühik on määratletud kui see osa rekombinantsest ribonukleasi inhibiitorist, mis vajalik on ribonukleasi A tegevuse 50% hävimiseks, kui selle kogus on 5 ng.

Tegevus mõõdetakse ribonukleasi A poolt toodud sitiidini 2’3’-tsükliline monofosfaatihütlemise hävimisega.

Hoidmispuhu

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v/v) glycerool

salvestus

Hoida temperatuuril -20°C

Kvaliteedi juhtimine

Endonuklease puudumine

1μg Lambda DNA ühendatakse 200 uniti Ribonukleasi Inhibiitoriga 16 tundi temperatuuril 37°C.

Ühendamise järel nähtakse Lambda DNA täielikuna etiidibroomidega värvestatud agarose geelil, et kinnitada nähtava Endonukleasi puudumist.

Nickase puudumine

1μg tüübi I superkoolne pBR322 ühendatakse 200 uniti Ribonukleasi Inhibiitoriga 4 tundi temperatuuril 37°C.

Ühendamise järel visualiseeritakse superkoolne DNA etiidibroomidega värvestatud agarose geelil, et kinnitada nähtava nickimise või lõigamise puudumist.

Exonukleasi puudumine

1μg Lambda DNA/HindIII Märksed ühendatakse 200 uniti Ribonukleasi Inhibiitoriga 16 tundi temperatuuril 37°C.

Ühendamise järel eraldatakse Lambda DNA/HindIII Märksed 1% agarose geeliga ja neid värivistatakse etiidibroomidiga. Märksed jäävad täielikkuina bandideks ilma sumeerumiseta.

RNase ja latentiivse RNase puudumine

RNase tegevuse olemasolu testimiseks ühendatakse 1ug RNA 200 uniti Ribonukleasi Inhibiitoriga 4 tundi temperatuuril 37°C.

Pärast inkubatsiooni visualiseeritakse RNA täielikuna jalga etiidium bromiidiga värvestatud agarosegeelil, et kinnitada nähtava RNase puudumist.

Loodumatute RNase tegevuse olemasolu testimiseks denatureeritakse 200 ühikut Ribonukleasi inhibiitorit temperatuuril 70°C 15 minutiks ja see inkubeeritakse 1 µg RNA-ga 4 tundi temperatuuril 37°C.

Pärast inkubatsiooni visualiseeritakse RNA täielikuna jalga etiidium bromiidiga värvestatud agarosegeelil, et kinnitada nähtava RNase puudumist.

Füüsiline puhasus

Puhasus on ≥95%, nagu hinnati SDS-polyacrylaamidgeeliga koos Coomassie siniväravuga.

Kasutamisnäide

Ribonukleasi inhibiitor on aktiivne laias pH vahemikus (pH 5.5–9). Tavaline RT ja in vitro transkriptsioon kasutab Ribonukleasi inhibiitorit lõplikus kontsentratsioonis 1 u/µl.