Termo-mobilabilní enzym uracil-DNA glykosylázy (UNG) - vysoce specifický pro odstranění dU při přípravě vzorků PCR a NGS, což zvyšuje kontrolu kvality DNA

Popis

Uracil-DNA Glykosyláza (UNG), Termolabilní je rekombinantní protein vyrobený v E. coli od mořské bakterie. Enzym hydrolyzuje uracil-glykosidové vazby v U-DNA v jednoduchých a dvojitém DNA, vyjmout uracil a vytvořit alkalické citlivé abasic sites v DNA. Enzym není aktivní na RNA a přirozeném, bezuracilovém DNA. Protože Uracil-DNA Glykosyláza (UNG), Termolabilní nemá žádné požadavky na kovy, je úplně aktivní přítomnosti EDTA.

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile lze použít spolu s dUTP pro eliminaci kontaminací PCR „přenosem“ z předchozích reakcí syntézy DNA. Aby byly produkty PCR citlivé na degradaci, je třeba v reakční směsi PCR nahradit dTTP za dUTP. Následné reakční směsi PCR musí být před PCR předzpracovány pomocí Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile k degradaci DNA obsahující uracil. Původní DNA neobsahuje uracil, takže vzorek touto procedurou není degradován.

Zdroj: Recombinant E. coli

Koncentrace a velikost: 1U/μL

Aplikace:

qPCR a Digital PCR: Eliminace uracilu z předchozích produktů PCR pro zabránění jejich opětovné amplifikaci v následných reakcích, čímž se zvyšuje citlivost a specifita testu.

Sekvencování nové generace (NGS): Klíčová součást pracovních postupů přípravy vzorků NGS pro odstranění uracilových základů z kontaminujících DNA molekul, což zlepšuje přesnost sekvenování a snižuje pozadí.

Forenzní analýza: Umožňuje přesnější a spolehlivější detekci stopových množství DNA v forenzních vzorcích díky minimalizaci křížového kontaminace.

Detekce methylace: V kombinaci s metodami konverze bisulfitu zajistí UNG léčení odstranění nemethylovaných cytosinů převedených na uracil, což usnadňuje analýzu methylace.

Odstranění inhibitory: Pomáhá čistit DNA tím, že tráví degradovanou nebo poškozenou DNA obsahující uracil, takže se zvyšuje čistota cílových DNA sekvencí.

Termolabilní enzym uracil-DNA glykosyláza je nezbytným nástrojem pro molekulární biology a výzkumníky zabývající se citlivými experimenty založenými na nukleových kyselinách, nabízí výbornou kontrolu nad integrity vzorků DNA a snižuje nechtěné artefakty, které by mohly kompromitovat výsledky experimentů.

Definice jednotky

Jedna jednotka je definována jako množství Uracil-DNA Glykosylázy (UNG), které je potřeba pro úplnou degradaci 1 μg vyčištěné jednoduché vlákenné DNA obsahující uracil při 37°C za 60 minut.

Úložný roztok

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0,1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0,5%(h/h) Tween-20, 0,5%(h/h) NP-40, 50%(h/h) glycerol.

Kontrola kvality

Čistota >99% podle SDS stránky

Beze znečištění Endonukleázou, Nickázou, Exonukleázou a RNázou.

Teplotní inaktivace

50°C po dobu 2 minut

Teplota reakce

20~37°C po dobu 10 minut.

Množství použití

0.1~1U enzymu UNG na reakci o objemu 50ul.

Doprava a úložiště

Ukládat při -20°C, dopravovat se studeným ledem.