vysoce čistý roztok inhibitoru ribonukleázy - inhibitor rnázy 40 u/μl, optimální pro ochranu rná v syntéze cdná a v molekulární biologii

popis výrobku

Představujeme vám naši vysoce čistou roztok ribonukleázového inhibitoru, prémiový kvalitní reagen, který obsahujeInhibitory rnázyv ultra-koncentrované koncentraci 40 jednotek/μl. Tento roztok je speciálně navržen tak, aby poskytoval maximální ochranu proti ribonukleázám během manipulace s RNA v různých postupech molekulární biologie.

hlavní vlastnosti

• výjimečná čistotě: inhibitor ribonukleázy je vyráběn rekombinantně a přísně čisten, aby byl zaručen vysoký stupeň čistoty, což zaručuje, že nebude mít žádný vliv na vaše pokusy.

• ultra-koncentrová formulace: tento inhibitor je dodáván v koncentraci 40 u/μl a umožňuje účinné použití v náročných aplikacích, kde mohou být výsledky ohroženy i v drobných množstvích rnázy.

• širokospektrální aktivita: inhibitor účinně neutralizuje širokou škálu rnas a, b, c a dalších endobonukleáz a exoribonukleáz, čímž chrání vaše vzorky rny před rozpadem.

• stabilní a aktivní: inhibitor je formulován pro stabilitu v rozmezí teplot a pH podmínek a zůstává aktivní během skladování a během různých experimentálních protokolů.

• kompatibilita: ideální pro použití s automatizovanými systémy a ručně připravenými reakcemi, je plně kompatibilní s pufry a enzymy běžně používanými v syntéze CDNA a manipulaci s nukleovými kyselinami.

aplikace

• syntéza CDNA: nezbytná pro prevenci kontaminace rnázy během reverzních transkripčních reakcí, čímž se zlepšuje výnos a integrita syntetizované CDNA.

• izolace a čištění rny: důležitá součást souprav pro extrakci rny a procesů čištění, které mají udržovat integritu rny před a po izolaci.

• Severní odběr: zajišťuje kvalitní přenos RNA a hybridizování inhibící aktivity rnanázy, která může rozkládat RNA na membránách.

• qpcr a rt-qpcr: chrání vzory RNA v kvantitativních pcr a reverzních transkripčních kvantitativních pcr testech, což zvyšuje citlivost a specificitu.

• Studie interakcí RNA- bílkoviny: zachovává RNA molekuly během koimunitní precipitace (rip) a jiných experimentů s interakcí RNA- bílkovin.

zdroj

kmen e. coli, který vyjadřuje rekombinantní klon, který je nositelem genu inhibitoru ribonukleázy z lidské placenty.

koncentrace

40 u/μl.

definice jednotky

jedna jednotka je definována jako množství rekombinantního inhibitoru ribonukleázy potřebného k omezování aktivity 5ng ribonukleázy a o 50%.

Aktivita je měřena inhibicí hydrolýzy cytidinu 23-cyklického monofosfátu ribonukleázou a.

skladovací puffer

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) glycerolu

skladování

uchovávat při -20°C

kontrola kvality

absence endonukleázy

1 μg lambda DNA se inkubací 200 jednotek inhibitoru ribonukleázy po dobu 16 hodin při teplotě 37°C.

po inkubaci se lambda DNA zobrazí jako neporušená na agarózovém gelu s ethidium bromidem, aby se ověřilo, zda není viditelná endonukleáza.

nepřítomnost nikázy

1 μg pbr322 typu i v supervalém stavu se inkubuje 200 jednotkami inhibitoru ribonukleázy po dobu 4 hodin při 37 °C.

po inkubaci se supervyvíjená DNA vizualizuje na agarózovém gelu s ethidium bromidem, aby se ověřilo, zda není viditelné odříznutí nebo odříznutí.

absence exonukleázy

1 μg markerů lambda dna/hindiii se inkubací 200 jednotek inhibitoru ribonukleázy po dobu 16 hodin při 37°C.

po inkubaci jsou markery lambda DNA/hindiii odděleny 1% agarózovým gelem a zabarveny bromidem ethidiu.

absence rnázy a latentní rnázy

k vyšetření na přítomnost aktivity rnázy se 1 ug rnázy inkubuje s 200 jednotkami inhibitoru ribonukleázy po dobu 4 hodin při 37°C.

Po inkubaci se RNA zobrazí jako neporušená páska na agarózovém gelu s ethidium bromidem, aby se ověřilo, zda není viditelná rnáza.

Pro zjištění přítomnosti latentní aktivity rnázy se 200 jednotek inhibitoru ribonukleázy denaturuje tepelně při 70 °C po dobu 15 minut a inkubuje se 1 ug rna po dobu 4 hodin při 37 °C.

Po inkubaci se RNA zobrazí jako neporušená páska na agarózovém gelu s ethidium bromidem, aby se ověřilo, zda není viditelná rnáza.

fyzická čistot

čistotě ≥ 95%, jak je posouzeno s sds-polyacrylamidovým gelem s modrým barvením coomassie.

Poznámka o použití

Standardní transkripce rt a in vitro používá inhibitor ribonukleázy v konečné koncentraci 1 u/ ul.