Vysoko čistá inhibítorová roztoková ribonukleázy - RNase inhibitor 40U/μl, optimální pro ochranu RNA v syntéze cDNA a aplikacích v molekulární biologii

Popis výrobku

Představujeme vám naši vysoce čistou roztok ribonukleázového inhibitoru, prémiový kvalitní reagen, který obsahuje Inhibitory rnázy v ultra-koncentrované koncentraci 40 jednotek/μl. Tento roztok je speciálně navržen tak, aby poskytoval maximální ochranu proti ribonukleázám během manipulace s RNA v různých postupech molekulární biologie.

Klíčové vlastnosti

• Vynikající čistota: Inhibitor ribonukleázy je rekombinantně vyroben a striktně vyčištěn, aby se zajistilo vysoké stupně čistoty, které zaručují, že se vaše experimenty nebudou žádným způsobem rušit.

• Ultra-konzentrovaný vzorek: Poskytován ve výšce koncentrace 40U/μl, tento inhibitor umožňuje efektivní použití v náročných aplikacích, kde i stopové množství RNase může kompromitovat výsledky.

• Širokospektrální aktivita: Inhibitor účinně neutralizuje široké spektrum RNas A, B, C a dalších endo- a exoribonukleáz, chránění tak vaše vzorky RNA před degradací.

• Stabilní a aktivní: Formulováno pro stabilitu přes široký rozsah teplot a pH podmínek, inhibitory zůstávají aktivní během úložení a v rámci různých experimentálních protokolů.

• Slučitelnost: Ideální pro použití s automatizovanými systémy a ručně připravenými reakcemi, je plně slučitelné s tampóny a enzymy běžně používanými při syntéze cDNA a manipulaci s nukleovými kyselinami.

Aplikace

• Syntéza cDNA: Nesmírně důležité pro prevenci kontaminace RNase během reverzní transkripce, čímž se zvyšuje výnos a integrity syntetizovaného cDNA.

• Isolace a očištění RNA: Klíčová součást v extrakčních sadech na izolaci RNA a v pracovních postupech očištění pro udržení integrity RNA před a po izolaci.

• Northern blotting: Zajišťuje vysokou kvalitu přenosu a hybridizace RNA tím, že inhibuje RNase aktivitu, která by mohla degradovat RNA na membránách.

• qPCR a RT-qPCR: Chrání RNA šablony v kvantitativních PCR a reverzně transkribovaných kvantitativních PCR asesech, čímž zvyšuje citlivost a specifitu.

• Studie interakcí RNA-bílkovin: Zachovává RNA molekuly během společné imunoprecipitace (RIP) a dalších experimentů s interakcemi RNA-bílkovin.

Zdroj

Šťáva E. coli vyjadřující rekombinantní klon, který nese gen inhibitoru ribonukleázy z lidské placenty.

Koncentrace

40 U/μl.

Definice jednotky

Jedna jednotka je definována jako množství rekombinantního inhibitoru ribonukleázy potřebné k inhibici aktivity 5 ng ribonukleázy A o 50 %.

Aktivita je měřena inhibicí hydrolyzy cytidinu 2’3’-cyclic monofosfátu ribonukleázou A.

Úložný roztok

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v/v) glycerol

úložiště

Uchovávejte při -20°C

Kontrola kvality

Nepřítomnost endonukleázy

1 μg Lambda DNA je inkubován s 200 jednotkami inhibitory ribonukleázy po dobu 16 hodin při 37°C.

Po inkubaci je Lambda DNA viditelná jako nepoškozená na agarásovém gelu obarveném bromidem etidiovým pro ověření nepřítomnosti viditelné endonukleázy.

Nepřítomnost nickázy

1 μg typu I nadvinutého pBR322 je inkubován s 200 jednotkami inhibitory ribonukleázy po dobu 4 hodin při 37°C.

Po inkubaci je nadvinutá DNA vizualizována na agarásovém gelu obarveném bromidem etidiovým pro ověření nepřítomnosti viditelného roztažení nebo řezání.

Nepřítomnost exonukleázy

1 μg Lambda DNA/HindIII Markers je inkubován s 200 jednotkami inhibitory ribonukleázy po dobu 16 hodin při 37°C.

Po inkubaci jsou Lambda DNA/HindIII Markers odděleny pomocí 1% agarásového gelu a obarveny bromidem etidiovým. Markery zůstávají jako nepoškozené pásky bez rozmazání.

Nepřítomnost RNase a latentní RNase

Pro testování přítomnosti aktivity RNase je inkubováno 1 µg RNA s 200 jednotkami Inhibitoru Ribonukleázy po dobu 4 hodin při 37°C.

Po inkubačním období je RNA viditelná jako neporušený pás na agarózovém gelu zakolorovaném bromidem etidiovým, aby se ověřila absence viditelné RNase.

Pro testování přítomnosti latentní aktivity RNase jsou 200 jednotek Inhibitoru Ribonukleázy termálně denaturóvány při 70°C po dobu 15 minut a následně inkubovány s 1 µg RNA po dobu 4 hodin při 37°C.

Po inkubačním období je RNA viditelná jako neporušený pás na agarózovém gelu zakolorovaném bromidem etidiovým, aby se ověřila absence viditelné RNase.

Fyzikální čistota

Čistota je ≥95% podle SDS-polyakrylamidového gelu s barvením Coomassie blue.

Poznámka k použití

Inhibitor Ribonukleázy je aktivní v širokém rozsahu pH (pH 5,5-9). Standardní RT a in vitro transkripce používají Inhibitor Ribonukleázy v konečné koncentraci 1 jednotka/µl.