Термомолябилен ензим урацил-ДНК гликозилаза (UNG) - високо специфичен за отстраняване на dU при PCR и NGS подготовка на проби, подобряващ контрола на качеството на ДНК

Описание

Урацил-ДНК Гликозилаза (UNG), Термолабилна е рекомбинантен белтък, произведени в E. coli, от морска бактерия. Ензимът хидролизира урацил-гликозидните връзки при U-ДНК в едновивчиствена и двувивчиствена ДНК, изсичайки урацила и създавайки алкално чувствителни безосновни места в ДНК. Ензимът е неактивен към РНК и природна, безурацилова ДНК. Тъй като Урацил-ДНК Гликозилаза (UNG), Термолабилна няма нужда от метални иони, тя е напълно активна в присъствие на EDTA.

Урацил-DNA Гликосилаза (UNG), Термолабилна може да се използва с dUTP за елиминиране на „переносими“ забраздания при PCR от предишни реакции на DNA синтеза. За да се направят продуктите на PCR уязвими за разлагане, dTTP трябва да бъде заменен с dUTP в сместа за PCR. Последвалите реакции на PCR трябва да бъдат предварително обработени с Урацил-DNA Гликосилаза (UNG), Термолабилна, преди PCR, за да се разгради DNA съдържащ урацил. Природният DNA не съдържа урацил, затова пробата не се разлага по този метод.

Източник: Рекомбинантен E. coli

Концентрация и размер: 1U/μL

Приложения：

qPCR и Дигитален PCR: Премахване на урацил от предишни продукти на PCR, за да се предотврати повторното усилване в последващи реакции, което повишава чутливостта и специфичността на теста.

Следващото поколение на секвенация (NGS): Критически елемент в NGS работни процеси за подготовкготвка на проби, за да се премахнат урациловите бази от забъркани ДНК молекули, подобряващ точността на секвенацията и намаляващ фоновия шум.

Форензическо анализиране: Осигурява по-точно и надеждно засичане на следи от ДНК в форензични пробы, минимизирайки кръстосаното забъркване.

Детекция на метилиране: В съчетание с методи на бисулфитова конверсия, лечението с УНГ гарантира премахването на неметилираните цитозини, преобразувани в урацил, което облеснява анализа на метилиране.

Премахване на инхибитори: Помага за очистяване на ДНК чрез деградиране на разрушената или повредената ДНК, съдържаща урацил, така че да се подобри чистотата на целевите ДНК последователности.

Термолабилният ензим Урацил-ДНК Гликосилаз е незаменим инструмент за молекулярните биолози и изследователите, ангажирани в чутките експерименти със засичане на нуклеинови киселини, предлагайки превъзходен контрол върху цялостта на ДНК пробите и намалява нежеланите артефакти, които биха могли да компрометират резултатите от експеримента.

Дефиниция на единица

Единица се дефинира като количеството Урациловата-DNA Гликозилаза (UNG), необходимо за пълното деградиране на 1μg чистиран единополинейчен DNA съдържащ урацил при 37°C за 60 минути.

Буфер за съхранение

20мM Tris-HCl (pH8.0), 0.1мM EDTA, 100мM KCl, 1мM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) глицерол.

Контрол на качеството

Чистота >99% по SDS page

Без контаминация с Ендонуклеаза, Никаза, Екзонуклеаза и RNase.

Топло инактивиране

50°C за 2 мин

Температура на реакцията

20~37°C за 10 мин.

Количество за употреба

0.1~1U от ензимите UNG за всяка 50ул реакция.

Доставка и съхраняване

Съхранявайте при -20°C, доставяйте с гел лед.