Високочист инхибитор на рибонуклеазата - инхибитор на RNase 40U/μl, оптимален за защита на РНК при синтез на cDNA и приложения в молекулярната биология
- Въведение
Въведение
Описание на продукта
Представяме ви нашето Високо Чисто Разтвор на Инхибитор на Рибонуклеаза, премиум качество реагент, съдържащ инхибитор на рназата при ултра-концентрация 40 Унции/μl. Този разтвор е специално проектиран да осигури максимална защита срещу рибонуклеази по време на работа с РНК в различни процедури по молекулярна биология.
Ключови характеристики
Изключителна Чистота: Рибонуклеазният Инhibитор е рекомбинантно произведена и строго очищена, за да се гарантира висока степен на чистота, което осигурява липса на помешения при вашите експерименти.
Ултра-Концентрирана Формула: Предоставяне на концентрация 40U/μl, този инhibитор позволява ефективно използване в изискващи приложения, където дори следовите количества на RNase могат да компрометират резултатите.
Широкоспектрен Дейност: Инhibитора ефективно нейтрализира широк спектър от RNases A, B, C и други ендo- и ексорибонуклеази, защитавайки вашия образец RNA от деградация.
Стабилност и Активност: Формулиран за стабилност при различни температури и pH условия, инхибиторът остава активен по време на съхраняването и през различните експериментални протоколи.
Съвместимост: Идеален за използване с автоматизирани системи и ръчно приготвени реакции, той е напълно съвместим с буферите и ензимите, често използвани в синтезата на cDNA и техниките за манипулиране на нуклеиновите киселини.
Приложения
cDNA Синтеза: Незаменим за предотвратяване на загадяване с RNаза по време на реакциите на обратна транскрипция, което подобрява добивката и целостта на синтетичното cDNA.
Изолация и очистка на RNA: Ключова компонента в наборите за екстракция на RNA и процесите за очистка, за да се запази цялостта на RNA преди и след изолацията.
Северен блотинг: Гарантира висококачествен прехвърляне и хибридизация на RNA чрез инхибиране на дейността на RNаза, която може да разрушава RNA на мембраните.
qPCR и RT-qPCR: Защитава RNA темплитите в асаянсите за количествена PCR и обратна транскрипция количествена PCR, подобряващ чувствителността и специфичността.
Изучаване на взаимодействията между РНК и белтъци: Запазва РНК молекулите по време на съвместната имунопречистяване (RIP) и други експерименти за взаимодействия между РНК и белтъци.
Източник
Штам Е. coli, изразяващ рекомбинантен клон, носещ гена на инхибитора на рибонуклеазата от плодородната тъкан.
Концентрация
40 U/μl.
Дефиниция на единица
Една единица е дефинирана като количеството Рекомбинантен Инхибитор на Рибонуклеаза необходимо за да инхибира дейността на 5 нг рибонуклеаза A с 50%.
Дейността се измерва чрез инхибирането на хидролизата на цитидин 2’3’-циклично монофосфат от рибонуклеаза A.
Буфер за съхранение
20мM HEPES-KOH(PH7.6), 50мM KCl, 8мM DTT, 50%(v/v) глицерол
Съхранение
Съхранявайте при -20°C
Контрол на качеството
Отсъствието на ендонуклеаза
1μg от DNA на Ламбда се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 16 часа при 37°C.
След инкубацията, DNA на Ламбда се визуализира като непокварено на агарозов гел, ок rencontен с бромов етидиум, за да се потвърди отсъствието на видими Ендонуклеази.
Отсъствие на Никейз
1μg от тип I суперспирално pBR322 се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубацията, суперспиралното DNA се визуализира на агарозов гел, ок<tool_call>ентен с бромов етидиум, за да се потвърди отсъствието на видими рези или разцепявания.
Отсъствие на Екзонуклеаза
1μg от DNA на Ламбда/HindIII Маркери се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 16 часа при 37°C.
След инкубацията, DNA на Ламбда/HindIII Маркери се отделя чрез 1% агарозов гел и се окрашва с бромов етидиум. Маркерите остават като непокварени полоски без размазване.
Отсъствие на RNase и латентна RNase
За тестиране на присъствието на активност на RNase, 1μg от RNA се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубацията, РНК се визуализира като цяла полоска на агарозов гел, оцветен с брометид етидиум, за да се потвърди отсъствието на видима РНаза.
За тестване на присъствието на латентна активност на РНаза, 200 единици от Инhibитор на Рибонуклеаза се термично денатурират при 70°C в продължителност 15 минути и се инкубират с 1 мкг от РНК в продължителност 4 часа при 37°C.
След инкубацията, РНК се визуализира като цяла полоска на агарозов гел, оцветен с брометид етидиум, за да се потвърди отсъствието на видима РНаза.
Физическа чистота
Чистотата е ≥95%, както се judge-ва по SDS-полиакриламиден гел с оцветяване с Кoomassie blue.
Забележка за употреба
Инhibиторът на Рибонуклеаза е активен в широк диапазон на pH (pH5.5-9). Стандартното РТ и in vitro транскрипция използват Инhibитор на Рибонуклеаза при крайна концентрация от 1u/ул.