Termolabile uracil-DNA glikozilaz (ung) enzim - pcr ve ngs örneği hazırlamada du'yu kaldırmak için yüksek spesifik, DNA kalitesi kontrolünü artırır
- giriş
giriş
açıklama
Uracil-DNA glikozilase (ung), termolabile, deniz bakterisinden gelen bir e. coli'deki rekombinant bir proteindir. Enzim, tek ve çift iplik DNA'da u-DNA'daki uracil-glikozidik bağları hidrolize ederek uracil'i kesiyor ve DNA'daki alkali duyarlı
Pcr ürünlerinin bozulma ihtimali olması için, pcr reaksiyon karışımında DTP ile değiştirilmelidir. Sonraki pcr reaksiyon karışımları, pcr'yi bozmadan önce pcr'yi bozmadan önce uracil-dna glikozilaz (ung), termolabile ile tedavi edilmelidir.
Kaynak: Rekombinant E. coli
Konsantrasyon ve boyut: 1 u/μl
Uygulamalar:
QPCR ve dijital PCR: daha sonraki reaksiyonlarda yeniden güçlenmesini önlemek için, test hassasiyetini ve spesifikliğini artırmak için önceki PCR ürünlerinden uracil' in ortadan kaldırılması.
Yeni nesil dizileme (ngs): sıralamayı doğru hale getirmek ve arka plan gürültüsünü azaltmak için, urecil bazlarını kirleten DNA moleküllerinden çıkarmak için ngs örnek hazırlama iş akışlarında kritik bir bileşen.
adli analiz: çapraz kontaminasyonu en aza indirerek adli örneklerde DNA'nın iz miktarlarının daha doğru ve güvenilir bir şekilde tespit edilmesini sağlar.
metileme tespiti: bisülfit dönüşüm yöntemleriyle birlikte, un tedavisi metileşmemiş sitosinlerin uracil'e dönüştürülmesini sağlar ve metileme analizini kolaylaştırır.
inhibitör çıkarma: Uracil içeren bozulmuş veya hasar görmüş DNA'yı sindirerek DNA'yı arındırmaya yardımcı olur ve böylece hedef DNA dizilerinin saflığını artırır.
Termolabile uracil-DNA glikozilase enzimleri, hassas nükleik asit bazlı deneylerde çalışan moleküler biyologlar ve araştırmacılar için vazgeçilmez bir araçtır, DNA örneği bütünlüğü üzerinde üstün bir kontrol sunar ve deney sonuçlarını tehlikeye atabilecek istenmeyen eserleri azaltır.
Birim tanımı
Bir birim, 1μg saflaştırılmış tek iplikçelik uracil içeren DNA'nın 37°C'de 60 dakikada tamamen parçalanması için gerekli olan uracil-dna glikozilaz (ung) miktarı olarak tanımlanır.
depolama tamponu
20 mm tris-hcl (ph8.0), 0.1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0. 5% (v/v) tween-20, 0. 5% (v/v) np-40, 50% (v/v) gliserol.
kalite kontrolü
Saflık %99'dan fazla
Endonükleaz, nikase, eksonükleaz ve rnase ile bulaşmamıştır.
ısı inaktivasyonu
2 dakika boyunca 50°C
Reaksiyon sıcaklığı
10 dakika boyunca 20~37°C.
Kullanım miktarı
50ul reaksiyon başına 0,1 ~ 1 u ung enzimleri.
Nakliye ve depolama
20°C'de saklanmalı, gel buzla gönderilmelidir.