Yüksek saflıkta ribonükleaz inhibitörü çözeltisi - rnase inhibitörü 40 u/μl, CDNA sentezinde ve moleküler biyoloji uygulamalarında rna koruması için optimal
- giriş
giriş
Ürün tanımı
Yüksek Saflıkta Ribonükleaz İnhibitörü Solüsyonumuzu tanıtıyoruz, premium kalitede bir reaktandırrnase inhibitörüultra konsantre 40 Ünite/μl içeren. Bu solüsyon, çeşitli moleküler biyoloji prosedürlerinde RNA işlemleri sırasında ribonükleazlara karşı maksimum koruma sağlamak için özel olarak tasarlanmıştır.
Ana özellikler
olağanüstü saflık: ribonükleaz inhibitörü, deneylerinize müdahale etmemek için yüksek saflık derecesini garanti etmek için rekombinant olarak üretilir ve sıkı bir şekilde arındırılır.
ultra yoğun formül: 40u/μl konsantrasyonda sunulan bu inhibitör, rnase'in iz miktarlarının bile sonuçları tehlikeye atabileceği zorlu uygulamalarda verimli bir şekilde kullanılmasını sağlar.
geniş spektrumlu aktivite: inhibitör, RNA örneklerinizin bozulmasını önleyerek, geniş bir dizi RNA a, b, c ve diğer endo ve egzoribonükleazları etkili bir şekilde etkisiz hale getirir.
istikrarlı ve aktif: bir sıcaklık aralığında ve pH koşullarında istikrarlı olmak için formüle edilmiş olan inhibitör, depolama sırasında ve çeşitli deneysel protokoller boyunca aktif kalır.
uyumluluk: Otomatik sistemlerle ve elle hazırlanan reaksiyonlarla kullanmak için idealdir, yaygın olarak CDNA sentezi ve nükleik asit manipülasyon tekniklerinde kullanılan tamponlarla ve enzimlerle tamamen uyumludur.
başvurular
CDNA sentezi: ters transkripsiyon reaksiyonları sırasında rnaz kontaminasyonunun önlenmesi için gereklidir, böylece sentezlenmiş CDNA' nın verimini ve bütünlüğünü artırır.
RNA izole ve arıtma: izole edilmeden önce ve sonra RNA bütünlüğünü korumak için RNA ekstraksiyon kitlerinde ve arıtma iş akışlarında hayati bir bileşen.
Kuzey lekesi: membranlarda RNA'yı bozabilecek RNA aktivitesi inhibe ederek yüksek kaliteli RNA transferi ve melezleşmesini sağlar.
qpcr ve rt-qpcr: Rna şablonlarını, hassasiyeti ve spesifikliği arttırarak, nicel pcr ve ters transkripsiyon nicel pcr testlerinde korur.
RNA-protein etkileşim çalışmaları: co-immünoprecipitation (rip) ve diğer RNA-protein etkileşim deneyleri sırasında RNA moleküllerini korur.
Kaynak
İnsan plasentasından ribonükleaz inhibitörü genini taşıyan rekombinant klonu ifade eden e. coli suşları.
konsantrasyon
40 u/μl.
Birim tanımı
Bir birim, rekombinan ribonükleaz inhibitörünün 5ng ribonükleaz a'nın etkinliğini %50 oranında inhibe etmesi için gerekli miktar olarak tanımlanır.
Aktivite, sitidin 23-siklik monofosfatın ribonükleaz a tarafından hidrolizinin inhibe edilmesiyle ölçülür.
depolama tamponu
20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, % 50 (v/v) gliserol
depolama
-20°C'de saklanmalıdır
kalite kontrolü
Endonükleaz yokluğu
1μg lambda DNA, 200 birim ribonükleaz inhibitörü ile 37°C'de 16 saat boyunca inkube edilir.
İnkubaasyondan sonra lambda DNA'sı, görünür endonüklezin yokluğunu doğrulamak için etidyum bromürle boyanmış agarose jeline sağlam olarak görüntülenir.
Nikase yok
1μg tip i süper sarmal pbr322, 200 birim ribonükleaz inhibitörü ile 37°C'de 4 saat boyunca inkube edilir.
İnkubasyon sonrası, görülebilir kesim veya kesimlerin yokluğunu doğrulamak için süper sarmal DNA, etidyum bromürle boyanmış bir agaroz jelinde görselleştirilmektedir.
Eksonükleaz yok
1μg lambda DNA/hindiii belirteçleri, 200 birim ribonükleaz inhibitörü ile 37°C'de 16 saat boyunca inkube edilir.
İnkubasyon sonrası lambda DNA/hindiii belirteçleri %1 agarose jeli ile ayrılır ve etidyum bromürle boyanır. belirteçler, boyanmadan sağlam bantlar olarak kalır.
rnase ve gizli rnase yokluğu
rnase aktivitesinin varlığını test etmek için, 1 ug rna, 200 birim ribonükleaz inhibitörü ile 37°C'de 4 saat boyunca inkube edilir.
İnkubaasyondan sonra, görünür rnazin yokluğunu doğrulamak için, RNA, etidyum bromürle boyanmış agaroz jeline sağlam bir bant olarak görüntülenir.
Latent rnase aktivitesinin varlığını test etmek için, 200 birim ribonükleaz inhibitörü 70°C'de 15 dakika boyunca ısı denatürüne alınır ve 1 ug rna ile 37°C'de 4 saat inkubasyon yapılır.
İnkubaasyondan sonra, görünür rnazin yokluğunu doğrulamak için, RNA, etidyum bromürle boyanmış agaroz jeline sağlam bir bant olarak görüntülenir.
Fiziksel saflık
Temizlik, coomassie mavi boyanma ile sds-polyacrylamide jel ile değerlendirildiğinde % 95'dir.
Kullanım notu
Standart rt ve in vitro transkripsiyonda ribonükleaz inhibitörü 1 u/ ul' un nihai konsantrasyonunda kullanılır.