Termolabilni encim uracil-dna glikozilaza (ung) - zelo specifičen za odstranitev du pri pripravi vzorca pcr in ngs, kar izboljša nadzor kakovosti DNK

opis

Uracil-dna glikozilaza (ung), termolabilna je rekombinantni protein v E. coli, iz morske bakterije. Enzim hidrolizira uracil-glikozidne vezi pri u-DNA v enostranski in dvojni DNA, ki izloča uracil in ustvarja alkalno občutljive abasne točke v DNA.

Za preprečevanje razgradnje je treba v pcr- reakcijski mešanici nadomestiti dttp. Naslednje pcr- reakcijske mešanice je treba predhodno obdelovati z uracil- dna- glikozilazo (ung), termoaktivno pred pcr- razgradnjo uracila- vsebne DNK.

vir: rekombinantna E. coli

koncentracija in velikost: 1 u/μl

uporabe:

qpcr in digitalni pcr: odstranitev uracila iz prejšnjih pcr izdelkov, da se prepreči ponovna povečanje v naslednjih reakcijah, povečanje občutljivosti in specifičnosti preskusa.

sekvenciranje naslednje generacije (ngs): ključna komponenta v delovnih procesih za pripravo vzorcev ngs za odstranitev uracilnih baz iz onesnaževal DNK molekul, izboljšanje natančnosti sekvenciranja in zmanjšanje hrupov v ozadju.

forenzična analiza: omogoča natančnejšo in zanesljivejšo odkrivanje sledi DNK v forenzičnih vzorcih z zmanjšanjem navzkrižne kontaminacije.

Odkritje metilacije: v kombinaciji z metodami pretvorbe bisulfitov obdelava z ung zagotavlja odstranitev nemetiliranih citosinov, ki se pretvorijo v uracil, kar olajša analizo metilacije.

Odstranitev zaviralca: pomaga pri čiščenju DNK z prebavo razgradljene ali poškodovane DNK, ki vsebuje uracil, s čimer povečuje čistost ciljne DNK zaporedja.

Termolabilni encim uracil-dna glikozilaza je nepogrešljivo orodje za molekularne biologe in raziskovalce, ki se ukvarjajo z občutljivimi poskusi na osnovi nukleinske kisline, saj omogoča boljši nadzor nad integriteto vzorca DNK in zmanjšuje neželene artefakte, ki bi lahko ogrozili rezultate

opredelitev enote

ena enota je opredeljena kot količina glikozilaze uracil-dna (ung), ki je potrebna za popolno razgradnjo 1 μg prečiščene enočrnane uracil-vsebne DNA pri 37 °C v 60 minutah.

skladiščni blažilnik

20 mm tris- hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0, 5% (v/v) med 20, 0, 5% (v/v) np-40, 50% (v/v) glicerol.

nadzor kakovosti

čistež > 99% na strani sds

brez kontaminacije endonukleaze, nikase, eksonukleaze in rnaze.

toplotna inaktiviranje

50°C 2 min

temperatura reakcije

20 do 37°C 10 minut.

količina uporabe

0,1 do 1 u ung encimov na reakcijo 50 ul.

ladjarstvo in skladiščenje

shranjujte pri temperaturi 20 °C, pošiljate z gelom.