raztopina visoko čistega zaviralca ribonukleaze - zaviralca rnaze 40 u/μl, optimalna za zaščito rna pri sintezi cdna in pri uporabi v molekularni biologiji
- uvod
uvod
opis izdelka
Predstavljamo našo visoko čisto Ribonukleazno inhibitorno raztopino, reagent vrhunske kakovosti, ki vsebujezaviralnik rnazepri ultra koncentraciji 40 enot/μl. Ta raztopina je posebej zasnovana za zagotavljanje maksimalne zaščite pred ribonukleazami med ravnanjem z RNA v različnih postopkih molekularne biologije.
ključne značilnosti
izjemna čistost: zaviralnik ribonukleaze se proizvaja rekombinantno in strogo prečiščeno, da se zagotovi visoka stopnja čistosti, ki zagotavlja, da ne posega v vaše poskuse.
ultrakoncentrirana formula: ta zaviralnik, ki se proizvaja v koncentraciji 40 u/μl, omogoča učinkovito uporabo v zahtevnih aplikacijah, kjer lahko tudi v majhnih količinah rnaze ogrozijo rezultate.
Aktivnost širokega spektra: zaviralnik učinkovito nevtralizira širok spekter rnaz a, b, c in drugih endoribonukleaz ter zaščiti vaše vzorce rne pred razgradnjo.
stabilen in aktiven: pripravljen za stabilnost v različnih temperaturah in pH pogojih, zaviralnik ostane aktiven med shranjevanjem in med različnimi eksperimentalnimi protokoli.
združljivost: idealen za uporabo z avtomatiziranimi sistemi in ročno pripravljenimi reakcijami, popolnoma združljiv z pufrji in encimi, ki se običajno uporabljajo pri sintezi CDNA in manipulaciji z nukleinskimi kislinami.
Uporaba
Sintesa CDNA: bistvena za preprečevanje kontaminacije rnaze med reakcijami reverzne transkripcije, s čimer se izboljša izkoristek in celovitost sintetiziranega CDNA.
Izolacija in čiščenje rne: ključna sestavina v kompletih za ekstrakcijo in postopkih čiščenja rne za ohranjanje integritete rne pred in po izolaciji.
Severno blotting: zagotavlja kakovostni prenos in hibridizacijo RNA z zaviranjem aktivnosti RNA, ki bi lahko razgradila RNA na membranih.
qpcr in rt-qpcr: ščiti vzorce RNA v kvantitativnih pcr in reverznih transkripcijskih kvantitativnih pcr preskusih, kar povečuje občutljivost in specifičnost.
Študije interakcij RNA- beljakovin: ohranja molekule RNA med koimunoprecipitacijo (rip) in drugimi poskusi interakcij RNA- beljakovin.
vir
e. coli sev, ki izraža rekombinantni klon, ki nosi gen za zaviranje ribonuklease iz človeške posteljice.
koncentracija
40 u/μl.
opredelitev enote
ena enota je opredeljena kot količina potrebnega zaviralca rekombinantne ribonuklease, ki zavira aktivnost 5ng ribonuklease a za 50%.
Aktivnost se meri z zaviranjem hidrolize citidin 23-cikličnega monofosfata s ribonukleaso a.
skladiščni blažilnik
20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% (v/v) glicerol
skladiščenje
shranjujte pri temperaturi -20°C
nadzor kakovosti
odsotnost endonukleaze
1 μg lambde DNK se inkubira s 200 enotami zaviralca ribonukleaze 16 ur pri 37°C.
po inkubaciji se lambda DNK prikaže kot nedotaknjena na agaroznem gelu z etidijevim bromidom, da se preveri odsotnost vidne endonuklease.
odsotnost nikasa
1 μg pbr322 tipa i v supervalji se inkubira s 200 enotami zaviralca ribonukleaze 4 ure pri 37 °C.
po inkubaciji se superzvitna DNK vizualizira na agaroznem gelu z etidijevim bromidom, da se preveri odsotnost vidnih odrezkov ali rezov.
odsotnost eksonukleaze
1 μg lambda dna/hindiii markerjev se inkubira s 200 enotami zaviralca ribonukleaze 16 ur pri 37°c.
po inkubaciji se lambda-dna/hindiii markerji ločijo z 1% agaroznim gelom in obarvajo z etidijevim bromidom.
odsotnost rnaze in latentna rnaza
Za testiranje na prisotnost aktivnosti rnaze se 1 ug rna inkubira s 200 enotami zaviralca ribonukleaze 4 ure pri 37 °C.
Po inkubaciji se RNA prikaže kot nedotaknjen trak na agaroznem gelu z etidijevim bromidom, da se preveri odsotnost vidne rnaze.
Za testiranje na prisotnost latentne aktivnosti rnaze se 200 enot zaviralca ribonukleaze 15 minut toplotno denaturira pri 70 °C in 4 ure inkubira z 1 ug rna pri 37 °C.
Po inkubaciji se RNA prikaže kot nedotaknjen trak na agaroznem gelu z etidijevim bromidom, da se preveri odsotnost vidne rnaze.
fizična čistost
čistež ≥ 95%, ki jo ocenjuje s sds-poliakrilamidskim gelom z modro barvo coomassie.
Opomba o uporabi
Standardna transkripcija in transkripcija in vitro uporablja zaviralca ribonukleaze v končni koncentraciji 1 u/ ul.