Izjemno čista raztopina za zaviralce ribonukleaze - zaviralca RNase 40U/μl, optimalen za zaščito RNA pri sintezi cDNA in pri uporabi v molekularni biologiji

Opis produkta

Predstavljamo našo visoko čisto Ribonukleazno inhibitorno raztopino, reagent vrhunske kakovosti, ki vsebuje zaviralnik rnaze pri ultra koncentraciji 40 enot/μl. Ta raztopina je posebej zasnovana za zagotavljanje maksimalne zaščite pred ribonukleazami med ravnanjem z RNA v različnih postopkih molekularne biologije.

Ključne značilnosti

• Izjemna čistočnost: Inhibitor ribonukleaze je rekombinantno proizveden in strogo očiščen, da se zagotovi visoka stopnja čistočnosti, ki poskrbi za neusmerjenost vaših poskusov.

• Ultra-konzentrirana formula: Dostavljeno pri koncentraciji 40U/μl, ta inhibitor omogoča učinkovito uporabo v zahtevnih aplikacijah, kjer lahko sledne količine RNase ogrožajo rezultate.

• Širokospektrna dejavnost: Inhibitor učinkovito neutralizira širok obseg ribonukleaz A, B, C in drugih endo- in eksoribonukleaz, hranijo vaše vzorce RNA pred razgradnjo.

• Stabilen in aktiven: Sestavljen za stabilnost v različnih temperaturnih in pH pogojev, inhibitor ostane aktiven med shranjevanjem in skozi različne eksperimentalne protokole.

• Sprejemljivost: Idealen za uporabo z avtomatiziranimi sistemami in ročno pripravljenimi reakcijami, povsem je združljiv s puščici in enzimi, ki jih pogosto uporabljamo v sintezi cDNA in tehnikah manipulacije nukleinske kisline.

Aplikacije

• Sintезa cDNA: Ključnega pomena za preprečevanje onesnaženja RNazom med obratno transkripcijo, s čimer se izboljša dobiček in celovitost sintetiziranega cDNA.

• Izolacija in očiščenje RNA: Pogost komponent v setih za ekstrakcijo RNA in delovnih postopkih očiščenja, da ohrani celovitost RNA pred in po izolaciji.

• Severni transfer (Northern Blotting): Vsebovanje visoke kakovosti prenosu in hibridizacije RNA tako, da preprečuje dejavnost RNaze, ki bi lahko degradovala RNA na membranah.

• qPCR in RT-qPCR: Zaščita RNA predloge v kvantitativnih PCR in obratno transkripcijskih kvantitativnih PCR analizah, s čimer se izboljšata občutljivost in specifičnost.

• Studije interakcij RNA-proteina: Ohranja molekule RNA med skupno imunoprecipitacijo (RIP) in drugimi poskusi z interakcijami RNA-protein.

vir

Štrik E. coli, ki izraža rekombinantni klon, ki nosi gen inhibitorja ribonukleaze iz človeške plodne čebelice.

Koncentracija

40 U/μl.

Definicija enote

Enota je določena kot količina rekombinantnega inhibitorja ribonukleaze, ki jo potrebujemo za 50% zmanjšanje dejavnosti 5 ng ribonukleaze A.

Dejavnost je merjena s preprečevanjem hidrolize citozinske 2'3'-ciklične monofosfatne ribonukleaze A.

Shrani v tamnici

20mM HEPES-KOH (pH 7,6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50% (v/v) glicerol

SHRANJEVANJE

Shranjevaj pri -20°C

Kontrola kakovosti

Odsotnost endonukleaze

1 μg Lambda DNA je inkubiran s 200 enotami inhibitorja ribonukleaze v temperaturi 37 °C v roku 16 ur.

Po inkubaciji se Lambda DNA prikazuje kot nedotaknjeno na etidijevi bromidno obarvanem agarskem gelu, da se potrdi odsotnost vidne endonukleaze.

Odsotnost Nickase

1 μg superzavijanega pBR322 tipa I se inkubira z 200 enotami inhibitorja ribonukleaze v tesl 4 ure pri 37 °C.

Po inkubaciji se superzavijana DNA prikazuje na etidijevi bromidno obarvanem agarskem gelu, da se potrdi odsotnost vidnih razsečenj ali režanja.

Odsotnost exonukleaze

1 μg Lambda DNA/HindIII oznak se inkubira z 200 enotami inhibitorja ribonukleaze v tesl 16 ur pri 37 °C.

Po inkubaciji se Lambda DNA/HindIII oznake ločijo na 1% agarskem gelu in obarvajo z etidijevim bromidom. Oznake ostanejo kot nedotaknjene črte brez smearinga.

Odsotnost RNaze in latentne RNaze

Da se preveri prisotnost RNazne aktivnosti, se 1 μg RNA inkubira z 200 enotami inhibitorja ribonukleaze v tesl 4 ure pri 37 °C.

Po inkubaciji se RNA vidi kot nepoškodovana pika na agarskem gelu, ki je obarvan s etidijem bromida, da se potrdi odsotnost vidne RNaze.

Za preizkus prisotnosti skrite aktivnosti RNaze se 200 enot inhibitorja ribonukleaze denaturoira pri 70 °C v teploti 15 minut in ga inkubirajo z 1 μg RNA v temu 4 ure pri 37 °C.

Po inkubaciji se RNA vidi kot nepoškodovana pika na agarskem gelu, ki je obarvan s etidijem bromida, da se potrdi odsotnost vidne RNaze.

Fizična čistota

Čistota je ≥95%, kot jo ocenjuje SDS-poliakrilamidni gel s barvaniem Coomassie blue.

Opomba o uporabi

Inhibitor ribonukleaze je aktiven v širokem obsegu pH (pH 5,5-9). Standardni RT in transkripcija v vitro uporabljata inhibitor ribonukleaze pri končni koncentraciji 1 e/μl.