A Importância Do Inibidor De Rnase Nos Ensaios De RT-PCR
A reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa (RT-PCR) é considerada uma das técnicas mais eficientes capazes de detectar e quantificar moléculas de RNA. Por outro lado, as ribonucleases (RNases) podem criar defeitos internos para amostras de RNA. Este artigo vai abordar o papel de Inibidores de Rnase nos ensaios de RT-PCR e apresentar os resultados da análise de RT-PCR.
Compreendendo RNases e seu impacto
As RNases podem aparecer como uma barreira, pois são enzimas não específicas que a ribonuclease pode usar para degradar códigos do vírus do mofo do tabaco (TEV) indiscriminadamente. Uma pequena quantidade de RNases ainda pode estar presente em amostras de RNA, o que pode resultar em avaliações falsamente negativas ou imprecisas da carga viral nos ensaios de RT-PCR.
O Papel do Inibidor de RNase
O inibidor de Rnase é uma proteína que impede a atividade de ribonuclease ao se ligar à RNase. Embora todas as reações nas quais a sequência de ácido ribonucleico é usada para RT PCR não sejam suaves em condições insensíveis, fatores limitantes como excesso de transcriptase reversa e inibidores de RNAse não interferem.
Garantindo a Integridade do RNA
O inibidor de Rnase é, portanto, considerado um reagente de vedação terminal para eliminar a possibilidade de alteração induzida por coesão pipetundeoctyamina de limpeza de patógenos induzida ou mesmerizante da transcrição do genoma viral contagioso de engajamento potente celular. Isso possibilita alcançar uma representação relevante para mais de um caso.
Aumentando a Sensibilidade e Especificidade dos Ensaios
O inibidor de Rnase pode melhorar a eficácia dos ensaios diagnósticos de RT-PCR ao prevenir a degradação do RNA. Isso é particularmente verdadeiro no caso de transcrições de baixa cópia ou vírus de RNA, onde até mesmo uma pequena degradação do RNA pode comprometer o desempenho do ensaio.
Uso na Prática Clínica e Pesquisa
O inibidor de Rnase mestre é uma característica comum no diagnóstico clínico baseado em RT-PCR e aplicações de pesquisa. É um reagente essencial no diagnóstico de doenças infecciosas, análises de expressão gênica e estudos de RNA.
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