Ургамал Урацил-ДНК Гликозилаз (UNG) фермент - ПЦР болон НГС-ийн үзмэр бэлтгэхэд дУ-г хасах өндөр специфик, ДНХ-ийн чанарыг хянах чадвар сайжирсан
- Танилцуулга
Танилцуулга
Тайлбар
Урацил-DNA Гликосидаз (UNG), Халдваргүй нь E. coli-д рекомбинант протеин, тус бодисын эх сурвалж ашигладаг. Энзим нь гал ёсны болон хоёр хавтгайн DNA-д U-DNA-г агуулсан урацилын гликосидик хамбарт хидролиз хийх, урацилыг гаргаж авах, DNA-д алкали хамаарах чадваргүй цэгүүд үүсгэнэ. Энзим нь RNA болон урацилгүй естэй DNA-нд ямар ч үйлчилгээгүй. Урацил-DNA Гликосидаз (UNG), Халдваргүй нь мөсний ионуудад шаардлагатай биш учраас EDTA-д байдлаар ихэвчлэн үйлчлэх боломжтой.
Уракил-DNA Гликосидаз (UNG), Хүчирхэг хэмжээнд суурийн PCR-ийн “татсан” саналыг өмнөх DNA синтез ажиллалын үр дүндээс устгахад dUTP-тай ашиглах боломжтой. PCR үр дүнг засварлах боломжтой болгохын тулд PCR ажиллагааны хувьд dTTP-г dUTP-руу солино. Дараагийн PCR ажиллагааны хувьд Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile-г PCR-ээс өмнө засварлах шаардлагатай бөгөөд уракил агуулсан DNA-г засварлахад ашигладаг. Эх бус DNA-д уракил байхгүй учраас энэ аргаар нь удамшсан хяналтыг хийх боломжгүй.
Эх: Давтангаар E. coli
Нягтрал ба Урт: 1U/μL
Хэрэглээ:
qPCR болон Digital PCR: Өмнөх PCR үр дүнгээс уракилыг устгах, дараагийн ажиллагаанд дахин ихээхийг хязгаарлах, шалгах үйлдлийн нарийвчлалыг нэмэгдүүлэх болон нарийн хэрэгслүүдийг сайжруулах.
Дараах Зургийн Секвенцинг (NGS): НГС-ийн удамшуулалын ажиллагаанд уракил нөөцийг устгах гол бүтэц, секвенцины зөвхөн нэмэгдүүлэх болон босоо олонлогыг багасгах.
Форензик анализ: Форензик нүгэлсэн утгын дагуу хамгийн зөв, тодорхой байдлыг олоход асуудалтай DNA-ийн жинхэнэ тооцооллыг хяналтанд илүү чухал болгоно.
Метилчлэлтэй шалгалт: Бисульфит хувиргах аргаар хамтран ажилладаг УНГ үндэслэлийн хариултанд орсон цитозинийг урацилд шилжүүлэхийг анхаарна.
Хамгаалагчийн хасах: Урацилтай эсвэл хэрэглэгчийн DNA-г хамгийн сонгогдох хувьд хасахад туслана.
Термолабиль Урацил-DNA Гликозилаз энзим нь молекулар биологчид, шинжлэх ухааны судлаачидад маш их хэрэглэгддэг, энэ нь DNA-ийн зөвхөн байдалд хамгийн сайн хариулагчийг авахад тусална.
Нэгжийн тодорхойлолт
Нэг нэгж нь 37°C-н температурт 60 минутанд 1μg-ийн чанарын хамгийн их урацилтэй ерөнхий страндын DNA-г цөөнгөөр шинэчлэх шаардлагатай Uracil-DNA Glycosylase (UNG)-г тодорхойлно.
Хадгалалтын буфер
20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) глицерол.
Чанарын хяналт
SDS page-ар Пурити>99%
Эндонуклеаз, Никкейс, Эксонуклеаз, RNase-тай холбогдох оюун ухааны мэдрэмж байхгүй.
Үүрэгтэй хөдөлгөөнтэй
50°C 2 минут байдлаар
Хариуцагчийн температур
20~37°C 10 минут байдлаар
Ашиглалтын хэмжээ
50ул хариуцагчдад 0.1~1U УНГ энзим
Зөөлөн, хадгалал
-20°C-д хадгалах, гел үсгээр зөөх