熱可変性ウラシルDNAグリコシラース (ung) 酵素 - pcrとngsサンプル準備でdu除去に特異性が高いため,DNA品質管理を強化する

記述

酵素は,単鎖および二鎖DNAのu-DNAでuracil-glycosidic結合を水解し, uracilを切断し,DNA内のアルカリ敏感なアバシスサイトを作成します.酵素は,RNAとネイティブ,uracilフリーDNAに不活性です. uracil-dna glycosylase

初期DNA合成反応からの pcr 汚染を排除するために,pcr 溶性剤と使用できます. pcr 製品が分解に疑われるようにするために,pcr 反応混合物では,dttp を dutp で置き換えなければなりません.この手順によってサンプルが分解されないように,原生DNAには

源: 複合性大腸菌

濃度とサイズ: 1u/μl

適用:

qpcr とデジタルpcr: 以前のpcr 製品からウラシルを除去し,後の反応で再増幅を防止し,測定の感性と特異性を高めます.

次世代配列化 (NGS): 検体準備作業の重要な要素であるNGSは,汚染されたDNA分子からウラシル基を除去し,配列の精度を向上させ背景ノイズを減らす.

検診分析: 検診サンプルにおけるDNAの微量をより正確かつ信頼性の高い検出に,交差汚染を最小限に抑える.

甲基化検出:ビスルファイト変換方法と併用して,治療により,甲基化されていない細胞素がウラシルに変換され,甲基化分析が容易になります.

抑制剤除去: ユラシルを含む分解または損傷したDNAを消化することによってDNAを浄化するのに役立ちます. これにより標的DNA配列の純度が向上します.

熱可変性ウラシルDNAグリコシラース酵素は 繊細な核酸ベースの実験に従事する分子生物学者と研究者のための不可欠なツールで DNAサンプルの完全性を優越的に制御し 実験結果に 影響を及ぼす不必要な人工物を減らすことができます

単位定義

1ユニットは,60分間で37°Cで1μgの純粋化単鎖ウラシルを含むDNAを完全に分解するために必要なウラシルDNAグリコシラース (ung) の量として定義される.

貯蔵バッファ

20mm tris-hcl (ph8.0), 0.1mm edta, 100mm kcl, 1mm dtt, 0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v/v,0.5%v

品質管理

純度>99%

エンドヌクレアース,ニケアース,エクソヌクレアース,RNAースの汚染はなく

熱不活性化

2分間50°C

反応温度

20~37°C 10分間

消費量

反応ごとに0.1~1Uのung酵素

輸送と保管

保存温度は20°Cで ゲルアイスで送る