L'Importanza Dell'inibitore Di Rnase Nei Test RT-PCR

La reazione a catena della polimerasi con trascrizione inversa (RT-PCR) è considerata una delle assay più efficienti in grado di rilevare e quantificare molecole di RNA. Al contrario, le ribonuclease (RNasi) possono creare difetti interni per i campioni di RNA. Questo articolo affronterà il ruolo di Inibitori di Rnase nelle assay RT-PCR e presenterà i risultati dell'analisi RT-PCR.

Comprensione delle RNasi e del loro impatto

Le RNasi possono rappresentare un ostacolo poiché sono enzimi non specifici che la ribonucleasi può utilizzare per degradare indiscriminatamente i codici virali di tabacco etch masonite (TEV). Un piccolo numero di RNasi può ancora essere presente nei campioni di RNA, il che può portare a falsi negativi o valutazioni imprecise del carico virale nelle assay RT-PCR.

Il Ruolo dell'Inibitore di RNase

L'inibitore di Rnase è una proteina che preclude l'attività della ribonucleasi legandosi all'RNase. Sebbene tutte le reazioni in cui la sequenza di acido ribonucleico viene utilizzata per RT PCR non siano condizioni delicate insensibili, i fattori limitanti come il sovrappiù di retrotrascrittasi e gli inibitori di RNAse non interferiscono.

Garantire l'integrità dell'RNA

L'inibitore di Rnase viene quindi considerato un reagente di cappuccio terminale per eliminare la possibilità di alterazione indotta da coerenza pipetundeoctyamine o chiarimento patogeno indotto, modificando la trascrizione del genoma virale mesmerizzante contagioso coinvolgendo un'attivazione potente cellulare. Ciò consente di ottenere una rappresentazione rilevante per più di un caso.

Migliorare la sensibilità e specificità dei test

L'inibitore di Rnase può migliorare la rilevanza dei test diagnostici RT-PCR prevenendo la degradazione dell'RNA. Questo è particolarmente vero quando si tratta di trascrizioni a basso numero di copie o virus RNA dove anche una piccola degradazione dell'RNA può compromettere le prestazioni del test.

Utilizzo nella Pratica Clinica e Ricerca

L'inibitore di Rnase Master è una caratteristica comune nella diagnosi clinica basata su RT-PCR e nelle applicazioni di ricerca. È un reagente essenziale nella diagnostica delle malattie infettive, negli studi di espressione genica e nelle ricerche sul RNA.

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