Termozilli uracil-DNA glikoziláz (ung) enzim - a pcr és ngs minták előkészítésében a du eltávolításához nagyon specifikus, ami fokozza a DNS minőségének ellenőrzését
- bevezető
bevezető
leírás
Az urácil-dna glikoziláz (ung), termolabil egy rekombináns fehérje az e. coli-ban, tengeri baktériumokból. Az enzim urácil-glikozid kötéseket hidrolizál az u-DNA-ban az egy- és kettősláncos DNS-ben, eltávolítva az urácilt és
A pcr- szintézishez szükséges anyagokat a pcr- reakció keverékében a dttp- t dutp-vel kell helyettesíteni. A következő pcr- reakció keverékeket az urácil- dna glikozilázsal (ung) kell előkezelni, mielőtt a pcr- t urácil- tart
forrás: rekombináns E. coli
koncentráció és méret: 1 u/μl
alkalmazások:
qpcr és digitális pcr: az uracil eltávolítása a korábbi pcr- termékektől a későbbi reakciókban történő újbóli erősítés megelőzése érdekében, növelve az elemzés érzékenységét és specifikuságát.
Next-generation sequencing (ngs): az ngs minta előkészítő munkafolyamainak kritikus eleme az uracilbázisok eltávolítása a szennyező DNS-molekulákból, a szekvenciák pontosságának javítása és a háttérzavar csökkentése érdekében.
törvényszéki elemzés: a keresztfertőzés minimalizálásával pontosabb és megbízhatóbb DNS-nyommennyiségek felderítését teszi lehetővé a törvényszéki mintákban.
Metiláció kimutatása: a biszulfit-konverziós módszerekkel együttes kezelés biztosítja az uracil-ra átalakított nem metilált citosinok eltávolítását, ami megkönnyíti a metiláció elemzését.
Inhibitor eltávolítás: segít a DNA tisztításában az uracilt tartalmazó degradált vagy sérült DNA emésztésével, ezáltal növeli a cél DNS-sorozatok tisztaságát.
A hőmozgatható uracil-DNA glikoziláz enzim nélkülözhetetlen eszköz a molekuláris biológusok és a kutatók számára, akik érzékeny nukleinsavokon alapuló kísérleteket végeznek, mivel kiválóan ellenőrzik a DNS minta integritását, és csökkenti a nem kívánt műalkotásokat, amelyek veszélyeztethetik a
egység meghatározása
egy egység az uracil-DNA glikoziláz (ung) mennyiségének minősül, amelyre szükség van ahhoz, hogy 1 μg tisztított, egyláncos uraciltartalmú DNA 37°C-on 60 perc alatt teljesen lebomoljon.
tároló puffer
20 mm tris- hcl (ph8.0), 0,1 mm edta, 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0, 5% (v/v) tween-20, 0, 5% (v/v) np-40, 50% (v/v) glicerol.
minőségellenőrzés
tisztaság> 99% sds oldal
nem fertőzött endonukleáz, nikáz, exonukleáz és rnáz.
hőinaktivizáció
50°C 2 perc alatt
reakciós hőmérséklet
20-37°C 10 percig.
felhasználási mennyiség
0,1 ~ 1 u ung enzim 50ul reakcióonként.
szállítás és tárolás
20°C-on tárolni, jéggel szállítani.