A termoizolálható uracil-DNA-glikoziláz (UNG) enzim - nagy specifikus a dU eltávolításához a PCR-ben és az NGS-ben végzett mintaelőkészítésben, javítva a DNS minőségellenőrzést

Leírás

Az Uracil-DNA Glikozidáz (UNG), Termolabil egy rekombináns fehérje E. coli-ban, tengeri baktériumokból származik. Az enzim hidrolizálja az uracil-glikozidikus kötéseket az U-DNAban egyetlen- és kétcsigányos DNA esetén, kivágja az uracilt, és alkális érzékeny abasis helyeket hoz létre a DNAban. Az enzim inaktivitású az RNA-ra és az eredeti, uracil-tartalmazó DNA-ra. Mivel az Uracil-DNA Glikozidáz (UNG), Termolabil nem igényel fémionokat, teljesen aktív az EDTA jelenléte esetén is.

Az Uracil-DNA Glicoziláz (UNG), Termolabil használható dUTP-vel a PCR „átviteli” terhelések korábbi DNA szintézis reakciókból történő megszüntetésére. A PCR termékek degradációra való érzékenységének létrehozásához a dTTP-t a PCR reakciós keverékben dUTP-ra kell cserélni. A következő PCR reakciós keverékekkel előtte a Uracil-DNA Glicoziláz (UNG), Termolabil-vel kell megelőzően kezelni a PCR-t, hogy degradálja az uracil-tartalmazó DNA-t. Az eredeti DNA nem tartalmaz uracil-t, ezért a minta ezzel eljárás nem romlik.

Forrás: Recombináns E. coli

Konzentráció és méret: 1E/μL

Alkalmazások:

qPCR és Digitális PCR: Az uracil korábbi PCR termékekbeli eltávolítása annak megakadályozására, hogy újra felamplifikálnák a következő reakciókban, amely növeli a teszt érzékenységét és specifitását.

Következő Generációú Sorréteg (NGS): Fontos összetevő az NGS minta előkészítési folyamatokban a terhelő DNA molekulák uracil-bázisainak eltávolítására, amely javítja a sorrend pontosságát és csökkenti a háttér zajt.

Forenzi analízis: Képes pontosabb és megbízhatóbb rögzítésre keresztül a forenzi mintákban található DNA nyomorult mennyiségeinek észlelésére, miközben csökkenti a keresztmosszaodást.

Metilációs észlelés: A biszulfíttal való konverziós módszerekkel együtt az UNG-kezelés biztosítja az unmethilált citozínok, amelyek uracillé váltottak, eltávolítását, elősegítve így a metilációs elemzést.

Inhibitor eltávolítása: Segít a DNA tisztításában az uracil-tartalmazó romlott vagy sérült DNA megsemmisítésével, így növeli a célcsoportos DNA-sorozatok tisztaságát.

A Thermolabil Uracil-DNA Glikoziláz Enzim egy elengedhetetlen eszköz a molekuláris biológusok számára és azoknak a kutatóknak, akik érzékeny nukleinsav-alapú kísérleteket végeznek, biztosítva a DNA-minta integritásának jobb ellenőrzését és csökkentve azokat a nem kívánt artefaktusokat, amelyek kompromittálni fognák a kísérleti eredményeket.

Egység definíció

Egy egység azon Uracil-DNA Glikozidáz (UNG) mennyisége, amely teljesen felbont 1μg purifikált egyedes láncú uracil-tartalmazó DNA-t 37°C-on 60 perc alatt.

Tárolási búfer

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0,1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0,5%(v/v) Tween-20, 0,5%(v/v) NP-40, 50%(v/v) glycerin.

Minőségbiztosítás

Tisztaság >99% SDS page szerint

Nincs endonukleáz, nickáz, exonukleáz és RNáz kontamináció.

Hőinaktiválás

50°C 2 percig

Reakcióhőmérséklet

20~37°C 10 percig.

Használati mennyiség

0.1~1U UNG enzim per 50ul reakció.

Szállítás és tárolás

Tárolni -20°C-n, geljéggel szállítani.