Magas tisztaságú ribonukleáz-inhibitor oldat - RNáz-inhibitor 40U/μl, optimális a cDNA-szintézissel és a molekuláris biológia alkalmazásokkal kapcsolatos RNS-védelemhez
- Bevezetés
Bevezetés
Termékleírás
Bemutatjuk a Magas Puritású Ribonukleáz Inhibitor Oldatunkat, egy prémium minőségű reagenst, amely rnaza- gátló ultra-koncentrált 40 Egység/μl mennyiségben. Ez az oldat kifejezetten arra lett tervezve, hogy maximális védelmet nyújtson a ribonukleázok ellen RNA kezelés során különböző molekuláris biológiai eljárásokban.
Főbb jellemzők
Kiválóan Tisztított: A Ribonukleáz Inhibitor rekombinánsan termelődik és szigorúan tisztítják, hogy garantáljanak magas fokú tisztaságot, így biztosítva, hogy nem zavarják meg kísérleteit.
Ultra-Konzentált Képlet: 40E/μl koncentrációban szállítják ezt az inhibítort, amely lehetővé teszi a hatékony használatot igényes alkalmazásokban, ahol akár nyomkövet mennyiségű RNase is kompromittálni tudja az eredményeket.
Széles Spektrumú Tevékenység: Az inhibítor hatékonyan neutralizál egy széles környezetű RNase-t A, B, C, valamint más belső és külső ribonukleázokat, így védelmet biztosítva az RNA-mintái ellenséges bontásától.
Stabil és aktív: Olyan összetevőkkel van kidolgozva, amelyek biztosítják a stabilis működést különböző hőmérséklet- és pH-feltételek között, az inhibitor aktív marad a tárolás során és számos kísérleti protokollon keresztül.
Kompatibilitás: Kiválóan alkalmas automatizált rendszerekben és kézzel előkészített reakciókban, teljesen kompatibilis a cDNA-szintézisben és a nukleinsav-manipulációs technikákban gyakran használt pufferekrel és enzimikkal.
Alkalmazások
cDNA szintézis: Fontos a RNáz kontamináció megelőzésére fordított transzkripciói reakciók során, így javítja a szintetizált cDNA fokozatos termelését és integritását.
RNA izoláció és tisztítás: Élénk elem az RNA-extraktionszkíkokban és a tisztítási folyamatokban, hogy az izoláció előtt és után fenntartsa az RNA integritását.
Északi boltozás: Minőséges RNA-tátételt és hibridizációt biztosít, mivel megakadályozza az RNáz tevékenységét, amely az emzimeken kívül lenne degradálva.
qPCR és RT-qPCR: Védje az RNA-sablonokat a kvantitatív PCR-ben és a fordított transzkripció-kvantitatív PCR-asszayokban, amely növeli a érzékenységet és specifikusságot.
RNA-proteinnymagászati tanulmányok: Az RNA-molekülök megtartására szolgálnak a ko-immunoprecipitáció (RIP) során és más RNA-proteinnymagászati kísérleteken.
forrás
E. coli sztema, amely egy rekombináns klónot tartalmaz, amely a humán placenta Ribonuclease Inhibitor génet kifejezi.
Koncentráció
40 E/μl.
Egység definíció
Egy egység azon mennyiség Recombinant Ribonuclease Inhibitor, amely szükséges ahhoz, hogy 5 ng ribonuclease A tevékenységét 50%-ra csökkentse.
A tevékenység a cytidin-2’3’-ciklikus monofoszfát hidrolizisének megakadályozásával méri a ribonuclease A által.
Tárolási búfer
20mM HEPES-KOH (pH 7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50% (k/k) glycerin
Tárolás
Tárolni -20°C-n
Minőségbiztosítás
Endonukleáz hiányzása
1 μg Lambda DNA-t 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral inkubálnak 16 óraig 37°C-ön.
Az inkubáció után a Lambda DNA-t érintetlenül látják az etidium bromid-fényes agároz gélen, hogy megőrizzék az észlelhető Endonukleáz hiányát.
Nickáz hiányzása
1 μg I. típusú szuperkarikált pBR322-t 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral inkubálnak 4 óraig 37°C-ön.
Az inkubáció után a szuperkarikált DNA-t érintetlenül látják az etidium bromid-fényes agároz gélen, hogy megőrizzék az észlelhető nyírást vagy vágást.
Exonukleáz hiányzása
1 μg Lambda DNA/HindIII Jelölőket 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral inkubálnak 16 óraig 37°C-ön.
Az inkubáció után a Lambda DNA/HindIII Jelölőket egy 1%-os agároz gélen választják el és etidium bromiddal festik. A jelölők érintetlen sávok maradnak, anélkül, hogy elterülnek.
RNázés és latens RNázés hiányzása
Az RNáz aktivitás jelenlétének teszteléséhez 1 µg RNA-t inkubálnak 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral 4 óraig 37°C-ben.
Az inkubáció után az RNA-t intakt sávkként látják el egy etidium bromid-festésű agároz gelén, hogy meggyőződjenek a látható RNáz hiányáról.
A rejtett RNáz aktivitás jelenlétének teszteléséhez 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral természetesítik hővel 70°C-ben 15 percig, és 1 µg RNA-val inkubálnak 4 óraig 37°C-ben.
Az inkubáció után az RNA-t intakt sávkként látják el egy etidium bromid-festésű agároz gelén, hogy meggyőződjenek a látható RNáz hiányáról.
Fizikai Tisztaság
A tisztaság ≥95%, ahogy az SDS-polyacrilamid gélen Coomassie kék festéssel megbízhatóan mutatja.
Használati Megjegyzés
A Ribonukleáz Inhibitor aktív széles pH tartományban (pH 5,5-9). A szokásos RT és in vitro transkripció Ribonukleáz Inhibitorral végezhető 1 µ/µl végleges koncentrációban.