उत्पाद

थर्मोलाबिल यूरासिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज़ (यूएनजी) एंजाइम - पीसीआर और एनजीएस नमूना तैयारी में डीयू हटाने के लिए अत्यधिक विशिष्ट, डीएनए गुणवत्ता नियंत्रण में सुधार

परिचय

परिचय

विवरण

यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलैबिल एक पुनर्युक्त प्रोटीन है E. coli में, समुद्री बैक्टीरियम से। यह एंजाइम एकल- और दोहरे-स्ट्रैंड डीएनए में U-डीएनए पर यूरेसिल-ग्लाइकोसिडिक बांधनों को हाइड्रोलाइज करता है, यूरेसिल को काटकर डीएनए में क्षार संवेदनशील अबेसिक साइट्स बनाता है। यह एंजाइम RNA और प्राकृतिक, यूरेसिल-मुक्त डीएनए पर निष्क्रिय है। चूंकि यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलैबिल कोई मीटल आयन आवश्यकता नहीं है, इसलिए यह एडीटीए की उपस्थिति में पूरी तरह से सक्रिय है।

यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलेबल, dUTP के साथ उपयोग किया जा सकता है ताकि पिछले डीएनए संश्लेषण प्रतिक्रियाओं से PCR 'केरी ओवर' प्रदूषण को खत्म किया जा सके। PCR उत्पादों को विघटन के लिए संवेदनशील बनाने के लिए, PCR प्रतिक्रिया मिश्रण में dTTP को dUTP से बदलना पड़ता है। अगले PCR प्रतिक्रिया मिश्रण को PCR से पहले यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलेबल से पूर्व-इलाज करना आवश्यक है ताकि यूरेसिल-युक्त डीएनए को विघटित किया जा सके। मूल डीएनए में यूरेसिल नहीं होता है, इसलिए यह प्रक्रिया सैंपल को नुकसान नहीं पहुंचाती है।

स्रोत: पुनर्जीवित E. coli

केंद्रितता और आकार: 1U/μL

अनुप्रयोग：

qPCR और डिजिटल PCR: पिछले PCR उत्पादों से यूरेसिल को हटाने के लिए, ताकि अगली प्रतिक्रियाओं में पुनर्पुन: विस्तार को रोका जा सके, परीक्षण की संवेदनशीलता और विशिष्टता में वृद्धि करता है।

अगली पीढ़ी की अनुक्रमण (NGS): NGS सैंपल तैयारी कार्यक्रम में एक महत्वपूर्ण घटक है जो प्रदूषित डीएनए परमाणुओं से यूरेसिल आधारों को हटाने के लिए काम करता है, अनुक्रमण की सटीकता में सुधार करता है और पृष्ठभूमि शोर को कम करता है।

फोरेंसिक विश्लेषण: क्रॉस-प्रदूषण को न्यूनीकृत करके फोरेंसिक नमूनों में ट्रेस मात्रा के DNA का अधिक सटीक और विश्वसनीय पता लगाना संभव बनाता है।

मेथिलेशन पता लगाना: बिसल्फाइट रूपांतरण विधियों के साथ, UNG उपचार उन गैर-मेथिलेशन साइटोसाइन को हटाने का आश्वासन देता है जो यूरेसिल में बदल जाते हैं, जिससे मेथिलेशन विश्लेषण सुगम हो जाता है।

निवारक हटाना: यूरेसिल युक्त क्षतिपूर्ण या खराब DNA को पाचकर DNA को शुद्ध करने में मदद करता है, इससे लक्षित DNA क्रमांकों की शुद्धता में वृद्धि होती है।

थर्मोलैबिल यूरेसिल-DNA ग्लाइकोसिलेज़ एन्जाइम मौलिक जीवविज्ञानियों और अनुसंधानकर्ताओं के लिए एक अपरिहार्य उपकरण है जो संवेदनशील न्यूक्लिक अम आधारित प्रयोगों में लग रहे हैं, जो DNA नमूने की अखंडता पर अधिक नियंत्रण प्रदान करता है और ऐसे अवांछित विकृतियों को कम करता है जो प्रयोग के परिणामों को खतरे में डाल सकते हैं।

इकाई परिभाषा

एक इकाई को 37°C पर 60 मिनट में 1μg शुद्ध यूरेसिल-युक्त एकक रेखीय DNA को पूरी तरह से विघटित करने वाली यूरेसिल-DNA ग्लाइकोसिलेज़ (UNG) की मात्रा के रूप में परिभाषित किया जाता है।

स्टोरेज बफर

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(व/आ) Tween-20, 0.5%(व/आ) NP-40, 50%(व/आ) ग्लाइसरॉल।

गुणवत्ता नियंत्रण

पुरीता>99% SDS पेज द्वारा

एंडोन्यूक्लियेस, निकेस, एक्सोन्यूक्लियेस और RNase की कोई प्रदूषण नहीं।

गर्मी से निष्क्रिय

50°C के लिए 2 मिनट

अभिक्रिया तापमान

20~37°C के लिए 10 मिनट।

उपयोग की मात्रा

50ul अभिक्रिया प्रति 0.1~1U UNG एंजाइम।

शिपिंग और स्टोरेज