उच्च शुद्ध रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक समाधान - आरएनएज़ अवरोधक 40u/μl, सीडीएनए संश्लेषण और आणविक जीव विज्ञान अनुप्रयोगों में आरएनए सुरक्षा के लिए इष्टतम

उत्पाद का वर्णन

हमारे उच्च शुद्ध राइबोन्यूक्लियेज अवरोधक समाधान का परिचय, एक प्रीमियम गुणवत्ता वाला अभिकर्ता जिसमेंआरएनएएस अवरोधकअत्यधिक संकेंद्रित 40 यूनिट्स/μl पर है। यह समाधान विशेष रूप से विभिन्न आणविक जीवविज्ञान प्रक्रियाओं में RNA हैंडलिंग के दौरान राइबोन्यूक्लियेज के खिलाफ अधिकतम सुरक्षा प्रदान करने के लिए इंजीनियर किया गया है।

मुख्य विशेषताएं

• असाधारण शुद्धताः रिबोन्यूक्लेएज अवरोधक को पुनः संयोजन के माध्यम से निर्मित किया जाता है और उच्च स्तर की शुद्धता सुनिश्चित करने के लिए सख्ती से शुद्ध किया जाता है, जिससे आपके प्रयोगों में कोई हस्तक्षेप सुनिश्चित नहीं होता है।

• अति-सघन सूत्रः 40u/μl एकाग्रता में आपूर्ति, यह अवरोधक मांग वाले अनुप्रयोगों में कुशल उपयोग की अनुमति देता है जहां आरएनएएस के भी निशान मात्रा परिणामों को खतरे में डाल सकती है।

• व्यापक स्पेक्ट्रम गतिविधि: अवरोधक प्रभावी रूप से आरएनए ए, बी, सी और अन्य एंडो- और एक्सोरिबोन्यूक्लेएज़ की एक विस्तृत श्रृंखला को बेअसर करता है, आपके आरएनए नमूनों को अपघटन से बचाता है।

• स्थिर और सक्रिय: तापमान और पीएच स्थितियों की एक श्रृंखला में स्थिरता के लिए तैयार, अवरोधक भंडारण के दौरान और विभिन्न प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के दौरान सक्रिय रहता है।

• संगतताः स्वचालित प्रणालियों और हाथ से तैयार प्रतिक्रियाओं के साथ उपयोग के लिए आदर्श, यह बफर और एंजाइमों के साथ पूरी तरह संगत है जो आमतौर पर सीडीएनए संश्लेषण और न्यूक्लिक एसिड हेरफेर तकनीकों में उपयोग किए जाते हैं।

आवेदन

• सीडीएनए संश्लेषण: रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन प्रतिक्रियाओं के दौरान आरएनएज़ संदूषण को रोकने के लिए आवश्यक है, इस प्रकार संश्लेषित सीडीएनए की उपज और अखंडता में सुधार होता है।

• आरएनए पृथक्करण और शुद्धिकरणः आरएनए पृथक्करण से पहले और बाद में आरएनए अखंडता बनाए रखने के लिए आरएनए निष्कर्षण किट और शुद्धिकरण कार्यप्रवाहों में महत्वपूर्ण घटक।

• उत्तरी ब्लटिंगः आरएनए गतिविधि को रोककर उच्च गुणवत्ता वाले आरएनए हस्तांतरण और संकरण सुनिश्चित करता है जो झिल्ली पर आरएनए को गिरा सकता है।

• qpcr और rt-qpcr: मात्रात्मक pcr और रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन मात्रात्मक pcr परीक्षणों में आरएनए टेम्पलेट की सुरक्षा करता है, संवेदनशीलता और विशिष्टता को बढ़ाता है।

• आरएनए-प्रोटीन बातचीत अध्ययनः आरएनए अणुओं को सह-प्रतिरक्षा (रिप) और अन्य आरएनए-प्रोटीन बातचीत प्रयोगों के दौरान संरक्षित करता है।

स्रोत

ई. कोलाई स्ट्रेन जो मानव प्लेसेंटा से रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक जीन ले जाने वाले एक पुनर्मिलन क्लोन को व्यक्त करता है।

एकाग्रता

40 यू/एमएल

इकाई की परिभाषा

एक इकाई को रिकॉम्बिनेंट रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है जो रिबोन्यूक्लेएज़ ए के 5ng की गतिविधि को 50% तक बाधित करता है।

गतिविधि को राइबोन्यूक्लेज़ ए द्वारा साइटीडिन 23-साइक्लिक मोनोफोस्फेट के हाइड्रोलिसिस के अवरोध द्वारा मापा जाता है।

भंडारण बफर

20 मिमी हेप्स-कोह ((ph7.6), 50 मिमी केसीएल, 8 मिमी डीटीटी, 50% ग्लिसरिन

भंडारण

-20°सी पर रखा जाए

गुणवत्ता नियंत्रण

अंतोन्यूक्लेज़ की अनुपस्थिति

लैंब्डा डीएनए का 1μg 200 इकाइयों के रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक के साथ 37°C पर 16 घंटे तक बुदबुदाया जाता है।

प्रजनन के बाद, लैंब्डा डीएनए को एथिडियम ब्रोमाइड से सना एगरोज जेल पर बरकरार के रूप में देखा जाता है ताकि दृश्यमान एंडोन्यूक्लेज़ की अनुपस्थिति की पुष्टि की जा सके।

निकेस की अनुपस्थिति

प्रकार I सुपरकोइल pbr322 के 1μg को 200 इकाइयों के रिबोन्यूक्लेज़ अवरोधक के साथ 37°C पर 4 घंटे तक बुदबुदाया जाता है।

प्रजनन के बाद, सुपरकोइल डीएनए को एथिडियम ब्रोमाइड से सना हुआ अगरोज जेल पर दृश्यमान रूप से प्रदर्शित किया जाता है ताकि यह सत्यापित किया जा सके कि कोई दृश्यमान निशान या कटौती नहीं है।

एक्सोन्यूक्लेज़ की अनुपस्थिति

लैंब्डा डीएनए/हिंदीआईआई मार्करों के 1μg को 200 इकाइयों के रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक के साथ 37°सी पर 16 घंटे तक बुदबुदाया जाता है।

प्रजनन के बाद, लैम्बडा डीएनए/हिंदीआईआई मार्करों को 1% अगरोज जेल से अलग किया जाता है और एथिडियम ब्रोमाइड से रंग दिया जाता है। मार्कर बिना मैश किए बरकरार बैंड के रूप में रहते हैं।

र्नाज़ की अनुपस्थिति और लटकती र्नाज़

आरएनएएस गतिविधि की उपस्थिति के लिए परीक्षण करने के लिए, आरएनए के 1 यूजी को 200 इकाइयों के रिबोन्यूक्लेज़ अवरोधक के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर 4 घंटे के लिए बुदबुदाया जाता है।

इनक्यूबेशन के बाद, आरएनए को एथिडियम ब्रोमाइड से सना एगरोज जेल पर बरकरार बैंड के रूप में दृश्यमान आरएनएज़ की अनुपस्थिति की पुष्टि करने के लिए कल्पना की जाती है।

गुप्त आरएनएएस गतिविधि की उपस्थिति के लिए परीक्षण करने के लिए, रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक के 200 यूनिट को 70°C पर 15 मिनट के लिए गर्मी-विनाश कर दिया जाता है और 37°C पर 1 यूजी आरएनए के साथ 4 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

इनक्यूबेशन के बाद, आरएनए को एथिडियम ब्रोमाइड से सना एगरोज जेल पर बरकरार बैंड के रूप में दृश्यमान आरएनएज़ की अनुपस्थिति की पुष्टि करने के लिए कल्पना की जाती है।

शारीरिक शुद्धता

शुद्धता ≥ 95% है, जो कि कोमासी नीले रंग के साथ एसडीएस-पोलियाक्रिलामाइड जेल द्वारा आंका गया है।

उपयोग नोट

रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक व्यापक पीएच सीमा (पीएच5.5-9) पर सक्रिय होता है। मानक आरटी और इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन में 1 यू/ यूएल की अंतिम एकाग्रता पर रिबोन्यूक्लेएज़ अवरोधक का उपयोग किया जाता है।