L'Importance De L'Inhibiteur De Rnase Dans Les Tests RT-PCR
La réaction en chaîne par polymérase avec transcription inverse (RT-PCR) est considérée comme l'une des méthodes les plus efficaces pour détecter et quantifier les molécules d'ARN. À l'inverse, les ribonucléases (RNases) peuvent créer des défauts internes pour les échantillons d'ARN. Cet article va aborder le rôle de Inhibiteurs de Rnase dans les tests RT-PCR et présenter les résultats de l'analyse RT-PCR.
Comprendre les RNases et leur impact
Les RNases peuvent apparaître comme un obstacle car ce sont des enzymes non spécifiques que la ribonucléase peut utiliser pour dégrader indistinctement les codes du virus de l'étiquetage du tabac (TEV). Un petit nombre de RNases peut encore être présent dans les échantillons d'ARN, ce qui peut entraîner des résultats faux négatifs ou une évaluation inexacte de la charge virale dans les tests RT-PCR.
Le rôle de l'inhibiteur de RNase
L'inhibiteur de Rnase est une protéine qui empêche l'activité ribonucléase en se liant à la RNase. Bien que toutes les réactions utilisant la séquence d'acide ribonucléique pour le RT-PCR ne soient pas réalisées dans des conditions douces insensibles, les facteurs limitants tels qu'un excès de transcriptase inverse et les inhibiteurs de RNAse n'interfèrent pas.
Assurer l'intégrité de l'ARN
L'inhibiteur de Rnase est donc considéré comme un réactif de calottage terminal pour éliminer la possibilité de modification induite par la cohérence pipetundoctamine des voies de clairance des pathogènes ou des altérations virales du génome viral en transcription contagieuse. Cela permet d'obtenir une représentation pertinente pour plus d'un cas.
Améliorer la sensibilité et la spécificité des tests
L'inhibiteur de Rnase peut améliorer la fiabilité des tests diagnostiques RT-PCR en empêchant la dégradation de l'ARN. Cela est particulièrement vrai pour les transcriptions à faible nombre de copies ou les virus à ARN, où même une petite dégradation de l'ARN peut compromettre les performances du test.
Utilisation en pratique clinique et en recherche
L'inhibiteur de Rnase maître est une caractéristique commune dans le diagnostic clinique basé sur la RT-PCR et les applications de recherche. C'est un réactif essentiel dans le diagnostic des maladies infectieuses, les analyses d'expression génétique et les études sur l'ARN.
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