تاہکی طریقے سے Taq ڈی این اے پولیمریز PCR امپلی فیکیشن میں کیسی ہے
پالیمرائز چین ری ایکشن (PCR) ایک طریقہ ہے جو مخصوص DNA تسلسل کی بڑھوتری کے مقصد کے لیے تیار کیا گیا ہے۔ اس تناظر میں، ٹی اے کیو ڈی این اے پالیمریز DNA بڑھوتری کے عمل کی کارکردگی اور مخصوصیت کے لحاظ سے یہ ایک اہم خامرہ کے طور پر ابھرتا ہے۔
کیا ہے ٹی اے کیو ڈی این اے پالیمریز ?
ٹی اے کیو ڈین اے پولیمریز ایک انزایم ہے جو گرموفر فطرت والے باکٹیریا ٹرمس آئیکوڈس سے حاصل کی جاتی ہے، جو عام طور پر گرم چشموں میں ملتا ہے۔ اس انزایم کو اس کی عجیب و غریب درجہ حرارت کے خلاف صبرداری کے لحاظ سے بھی شناخت کی جاتی ہے، جو باری باری سے ڈین اے کے ٹکڑوں کو گرم اور سرد کرنے کے ذریعے PCR کو کیٹلائزر کرنے کی وجہ بناتی ہے۔
PCR میں کام
PCR کے پہلے مرحلے میں، دوسری ڈین اے کی نمونے کو گرما جاتا ہے تاکہ دونوں ٹرینڈز الگ ہوجائیں۔ ٹی اے کیو ڈین اے پولیمریز کو داخل کیا جاتا ہے اور پھر نئے ڈین اے کے ٹرینڈز کو ایکلے ٹرینڈ کے طور پر نیوکلیوٹائیڈز کے طور پر استعمال کرتے ہوئے بنایا جاتا ہے؛ ٹی اے کیو ڈین اے نیوکلیوٹائیڈ کے ٹیمپلیٹ ٹرینڈ کو صحیح بیسیں لاگتی ہیں۔ یہ عمل ضروری ہے کیونکہ یہ مندرجہ بالا مندرجہ بالا کی تعداد اور کوالٹی کو تعین کرتا ہے۔
بالقوه درجہ حرارت
ٹی اے کی ڈی این اے پولیمریز کا سب سے زیادہ ظاہرہ خصوصیت یہ ہے کہ وہ کمپیوٹر کی ماکسیمم سرگرمی کو 75-80 °C کے درجہ حرارت پر دیتا ہے۔ یہ علیحدہ درجہ حرارت نہ صرف ڈی این اے رشتے کو پہننا میں مدد کرتی ہے بلکہ پرائمر بانڈنگ کی خاصیت میں بھی بہتری لاتی ہے، جس سے غیر مخصوص تضخیم کے موقعات کو روکا جاتا ہے۔ دوسرے اس طرح کی حدود نہیں پیش کرسکتے۔ یہ ٹی اے کی کوئی فائدہ بناتا ہے جو سب سے زیادہ PCR پروٹوکال میں استعمال ہوتا ہے۔
تیزی اور کارآمدی
ٹی اے کی ڈی این اے پولیمریز کو تضخیم میں تیزی بھی ظاہر کرنے کے قابل ثابت کیا گیا ہے۔ یہ اس لیے ہے کہ اس کی لمبائی کی شرح کفایتی طور پر زیادہ ہوتی ہے، جو PCR سائیکل کو تیز کرتی ہے۔ یہ کارآمدی بہت سے عمل کے لیے بہت مہتمل ہے، جس میں کلوننگ، سیکوئینسنگ، ڈائنوسٹکس اور فارینکشن کے طریقے شامل ہیں۔
یہ نتیجہ کہ، Taq DNA پالیمریز کو اس کے خواص جیسے بہت زیادہ درجہ حرارت کے تحمل، کارآمدی اور مخصوصیت کی بنا پر جایگزین نہیں کیا جا سکتا، جو یہ ریجنٹ PCR وضاحت میں خاص طور پر مہم ہے۔ اس وقت سے، پردیاتی حیاتیات کی تحقیق نے انzyme کے آمدنے سے بہت فائدہ اُٹھایا ہے جو سائنسدانوں کو زندگی کے مواد اور اس کے ژن کو دیکھنے میں مدد کی ہے جیسا کبھی نہیں تھا۔ یہ حقیقت کہ Taq DNA پالیمریز لب کے طور پر روزمرہ کے استعمال میں ریجنٹ ہے، یہ واضح شہادت ہے کہ ریجنٹ سائنس اور طب میں اپنا مقصد بہترین طریقے سے پورا کرتا ہے۔