la taq DNK polimeraza, polymerasa dolgega pcr
- uvod
uvod
Dolga PCRtaq DNK polimeraza, 5U/μl
opis
La taq dna polimeraza je trikrat večja od taq dna polimeraze
polymerasi z dolgim pcr, ki sinergično ustvarjajo izdelke z dolgim pcr z večjim iznosom in zvestobo kot samo polymerasi z taq DNA.
PCR je trikrat bolj zanesljiv kot taq-dna polimeraza.
La taq je optimiziran za ustvarjanje zelo dolgih amplikonov: do 40 kb z virusno DNK in do 15 kb z genomsko DNK predlogo. Posebno oblikovan pufer La taq ščiti DNK pred depurinacijo in izločanjem med dolgim toplotnim ciklom.
PCR proizvodi, proizvedeni z la taq DNA polimerazo, so večinoma 3'-da repni, ki se lahko klonirajo v ta vektor.
značilnosti
- dolgi izdelki
- do 40 kb z virusno DNK kot predlogo
- do 15 kb z genomsko DNK kot predlogo
- idealen za vzorce z visoko vsebnostjo GC do 85% GC.
- Vrednost je trikrat večja kot pri taq DNA polimerazi.
- Vključuje spremenjene nukleotide.
nadzor kakovosti
funkcionalno preskušena pri generaciji 40 kb amplikona z lambda DNK kot predlogo.
koncentracija: 5 u/μl
skladiščenje
skladiščni bufer: encim je v obliki: 20 mm tris-hcl (ph 8,0); 0,1 mm edta; 1 mm dtt; 100 mm kcl; stabilizatorji; 50% glicerol.
skladiščenje: skladiščite pri temperaturi -20°C.
odziv
Reakcija pcr mešanica nastavila in priporočena termalnih ciklusa pogojev: tok je samo primer, ki vzame 20kb človeškega genomske DNK kot predlogo, da samo za referenco, lahko prilagodite glede na dolžino in zaporedje predloge in primer.
sestavni del | prostornina | končna koncentracija |
predloga | DNA < 1 ug | kot je potrebno |
prednji primer (10 μm) | 1 μl | 0,2-0,4 μm vsak |
obrnjeni primer (10 μm) | 1 μl | 0,2-0,4 μm vsak |
10x pufer za davčne obveznosti | 5 μl | 1x |
2,5 mm dntps | 4 μl | 0,2 mm |
la taq DNK polimeraza | 0,5 μl | 2,5 enote |
ddh2o do končne prostornine | 50 μl | ne velja |
94°C 3 min
94°c 30 sekund
55°c 30 sek 30 ciklov
72°C 1 min
72°C 5 minut.
red
PC08 | la taq DNK polimeraza | dolga pcr taq DNA polimeraza, 5 u/μl |