Kako je Taq DNA polimeraza ključna v PCR amplifikaciji
Polimerazna verižna reakcija (PCR) je metoda, razvita z namenom amplifikacije specifičnih DNK sekvenc. V tem kontekstu, taq DNK polimeraza se pojavi kot določujoči encim v smislu učinkovitosti in specifičnosti procesa amplifikacije DNK.
Kaj je taq DNK polimeraza ?
Taq DNA polimeraza je enzim, ki ga pridobimo iz toploljubive bakterije Thermus aquaticus, ki jo pogosto nađemo v termalnih izvoriščih. Enzim je tudi značilen po svoji neverjetni temperature odporu, kar mu omogoča kataliziranje PCR, ki je ponavljajoči postopek segrevanja in hlajenja odlomkov DNA.
Funkcija v PCR
V prvem koraku PCR se dvopasmična DNS vzorec podreja segrevanju, da se ločita dva pasma. Nato sledi uvedba Taq DNA polimeraze in sinteza novih pasmov DNS, ki jih sintetiziramo iz enopasmičnih predložil, ki služijo kot nukleotidi; Taq DNA pritegne prave bazne pare k predložnemu pasmu nukleotidov. Ta postopek je ključnega pomena, ker določa količino in kakovost, ki jo pričakujemo od produkta.
Toleranca visokih temperatur
Ena od najbolj izraženih lastnosti Taq DNA polimeraze je, da zagotavlja optimalno dejavnost pri visokih temperaturah okoli 75-80 °C. Ta visoka temperatura služi ne le za pomoč pri tajenju DNS verig, ampak tudi izboljša specifičnost vezave početnikov, s čimer se zmanjšajo morebitne nespecifične amplifikacije. Drugi proizvodi morda ne ponujajo takih ekstremov. To da Taq prednost v večini PCR protokolov.
Hitrost in učinkovitost
Taq DNA polimeraza je bila tudi pokazana kot imela hitrost v amplifikaciji. To je zato, ker ima relativno višjo hitrost podaljševanja, kar omogoča hitrejše PCR cikle. Ta učinkovitost je zelo pomembna v številnih postopkih, vsebine kloniranja, sekvenciranja, diagnostike in forenzike med drugim.
Da zaključimo, Taq DNA polymeraza ne more biti zamenjana, saj jo lastnosti izredne visoke temperaturne odpornosti, učinkovitosti in specifičnosti čine posebej pomembno v PCR pojasnitvi. Od tedanjega časa je raziskovanje molekularne biologije bilo ogromno olajšano s prihodom tega enzima, ki je omogočil znanstvenikom, da se spustijo v sam essenc living matter in njegove gene kot nikoli prej. Temele, da se Taq DNA Polymeraza še vedno redno uporablja v laboratorijih, je jasen dokaz dejstva, da ta sestavinca dobro izpolnjuje svoje namen v znanosti in medicini.