Hladno občutljiva mutantna HotStar Taq DNA Polymeraza
- Uvod
Uvod
Opis izdelka:
Naš mutant HotStart, občutljiv na mraz taq DNK polimeraza je edinstvena različica tradicionalne Taq polimeraze, zasnovana z mutacijo, občutljivo na mraz, ki preprečuje aktivnost pri sobni temperaturi. Ta inovativna zasnova zagotavlja, da encim ostane neaktiven do začetnega denaturacijskega koraka PCR, kar zmanjšuje nespecifično amplifikacijo in tvorbo primer-dimerov.
Ključne značilnosti:
- Hladno občutljiva mutacija za nadzorovano aktivacijo
- Brez aktivnosti pri sobni temperaturi, kar minimizira nespecifično amplifikacijo
- Povečana specifičnost in dobiček ciljne DNA
- Prilostno za dot-down PCR in gradient PCR
- Poboljšana učinkovitost v multiplex PCR reakcijah
- Idealna za avtomatizirane sisteme obdelave tekočin
Uporabe:
- Dot-down PCR in gradient PCR
- Multiplex PCR za istočasno amplifikacijo več ciljnih sekvenc
- Avtomatizirane nastavitve PCR z uporabo robotov za ravnanje s tekočino
- Diagnostični preskusi, ki zahtevajo visoko specifičnost
- Raziskovalne aplikacije, ki vključujejo zapletene ali nizke predloge
- Forenzična in klinična preskušanja, pri katerih je specifičnost najpomembnejša
Naša hladno občutljiva mutanta HotStart Taq DNA polimeraza ponuja pomembno prednost pri uporabi PCR, saj omogoča čist začetek procesa ojačevanja. Njeno nadzorovano aktiviranje zagotavlja bolj ciljno usmerjen in učinkovit rezultat, zaradi česar je dragoceno sredstvo za laboratorije, ki želijo optimizirati svoje tokove dela s PCR.
Opis
CSM Taq polimeraze (Cold sensitive mutant Taq polymerases) so vrsta HotStar polimeraze. Vir iz mutirane E. coli. CSM Taq polimeraza je za razliko od monoklonskih protiteles na osnovi vročega začetka Taq ali kemično spremenjenega vročega začetka Taq, hladni Taq je hladno občutljiv mutant Taq. Ohrani sposobnost vročega zagona skozi celoten cikel ojačanja.
Mutanti Taq polimeraz, občutljivi na hlad, so zasnovani za PCR s "Hot Start", kar pomeni, da ne delujejo pri nizkih temperaturah. Ponujajo izjemno specifičnost in dvakrat večjo zanesljivost kot divja Taq polimeraza. Zasnovana je za PCR z težkimi predložki, kot so fragmenti bogati GC in mikrosateliti.
Mutanti Taq polimeraz, občutljivi na hlad, so posebej primereni za podaljševanje poenostavitev pri oznakih enoosnovčinske polimorfizme (SNP).
Mutanti Taq polimeraz, občutljivi na hlad, ohranjajo izjemno specifičnost in minimalno ozadje tudi v pogojevih, ki so zasnovani za visoko izdelano količino. Resnično pa lahko enzyme uporabljate tudi na genomskih predložkih z koncentracijo MgCl2+ do 10 mM.
Mutanti Taq polimeraz, občutljivi na hlad, lahko podaljujejo skozi težave regije, na primer regije, ki vsebujejo obrnjeni tandemni ponovitve in tiste z visoko stopnjo sekundarne strukture.
Mutanti Taq polimeraz, ki so občutljivi na hlad, delujejo na popolnoma edinstven način, vključno s povečanim izbirom nukleotidov na aktivni strani in zasnovanim hitrejšim tempom neustreznega razširjanja, kar pomeni, da se bodo razširjevale le popolno poravnane primere. V zaključku lahko ta enzim zagotovi še večjo specifičnost kot tehnike zagona pri visoki temperaturi (ročne ali avtomatske), brez nepoželenih predhodnih inkubacijskih korakov.
Aplikacije
- Zagon PCR po amplifikaciji
- Specifična amplifikacija kompleksnih cDNA in genomskih predložil za amplifikacijo težkih predložil, kot so GC-bogata odseka in mikrosateliti
- Razširjanje primerov SNP oznak
- Amplifikacija genomicnih DNS ciljev do 10 kb z visoko usklajenostjo, specifičnostjo in občutljivostjo
- Amplifikacija iz predlogov s nizkim številom kopij DNS, visoko stopnjo Hot Start PCR z visoko specifičnostjo, občutljivostjo in izdobijo
- Redna diagnostična Hot Start PCR, ki zahteva visoko ponovljivost.
- Real-Time PCR
- Večkratni PCR
- Izdelava PCR produkta za TA kloniranje
Kontrola kakovosti
- Funkcionalna odsotnost dejavnosti dvojnega in enostranskega endonukleaza;
- Čistota > 99 % preizkušena s SDS gel elektroforezijo;
- Vsaka serija CSM Taq DNA Polimeraze je preverjena za povečavo iz vsaj 10 ng človeške genomsko DNA;
- Obdrži polno aktivnost pri sobni temperaturi skozi en teden;
- Brez ostankov gostiteljske DNA.
Sestavitev reakcijske mešanice
Sestavka | Prostornina | Konečna koncentracija |
Predloga | DNA <1 ug | Po zahtevi |
Prednji primer (10 μM) | 2 μl | 0.4 μM |
Obratni primer (10 μM) | 5 μl | 1x |
2.5mM vsak dNTPmix | 4 μl | 200μM vsak |
CSM Taq DNA polimeraza, 5U/μl | 0.4 μl | 2 enoti |
ddH 2O do končnega volumena | 50μl | Neveljavno |
Koncentracija : 5 en./μl
SHRANJEVANJE : Hranje pri -20°C
Paket : Veliki količini
vrstni red
PC05 | csm Taq DNA Polimeraza | Mutanti Taq DNA polimeraz, občutljive na hlad, 5U/μl |