Cum Este Esențial Polimeraza Taq Dna În Amplificarea Pcr

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) este o metodă dezvoltată în scopul amplificării secvențelor specifice de ADN. În acest context, taq polimerază ADN apare ca enzima definitorie în ceea ce privește eficiența și specificitatea procesului de amplificare a ADN-ului.

Ce este taq polimerază ADN ?

Taq DNA Polymerase este un enzyme obținut din bacteriul termofil Thermus aquaticus, care se găsește frecvent în sursele termale. Enzima este de asemenea caracterizată prin rezistența sa remarcabilă la temperatură, ceea ce permite să catalizeze PCR-ul, care este un proces repetitiv de încălzire și răcire a fragmentelor de ADN.

Funcție în PCR

În primul pas al PCR-ului, un exemplar de ADN cu două șiruri este supus căldurii pentru a separa cele două șiruri. Apoi se adaugă Taq DNA Polymerase și apoi se sintetizează noile șiruri de ADN folosind șabloane cu o singură șiruire care acționează ca nucleotide; Taq DNA le atașează bazelor corect pe șirul de nucleotide din șablon. Acest proces este crucial, deoarece determină cantitatea și calitatea produsului așteptat.

Toleranță la Temperaturi Înalte

Una dintre caracteristicile cele mai remarcabile ale polimerazei DNA Taq este că oferă o activitate optimă la temperaturi ridicate de aproximativ 75-80 °C. Această diferență de temperaturi ridicate servește nu doar pentru a ajuta la desfășurarea lanțurilor de DNA, ci și pentru a îmbunătăți specificitatea legăturii primelor, inhibând astfel șansele de amplificare ne-specifică. Altele nu oferă astfel de extreme. Acest lucru conferă Taq un avantaj în majoritatea protocolelor PCR.

viteză și eficiență

Polimeraza DNA Taq a demonstrat de asemenea să aibă viteză în amplificare. Acest lucru se datorează faptului că are o rată relativ mai mare de elongare, ceea ce face ciclurile PCR mult mai rapide. Această eficiență este foarte importantă în numeroase proceduri, inclusiv clonarea, secvențarea, diagnosticul și abordările forense, printre altele.

În concluzie, Taq DNA polymerase nu poate fi înlocuită, deoarece proprietățile sale de toleranță la temperaturi foarte mari, eficiență și specificitate fac ca acest reagent să fie deosebit de important în amplificarea PCR. Din atunci, cercetarea în biologia moleculară a fost semnificativ facilitată de apariția acestei enzyme, care a permis cercetătorilor să exploreze esenta vieții și genele acesteia ca niciodată înainte. Faptul că Taq DNA Polymerase este încă un reagent folosit rutinier în laboratoare este o mărturie clară că acest reagent își îndeplinește rolul cu succes în știință și medicină.