Como a Taq DNA Polymerase é Essencial na Amplificação por PCR

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é um método desenvolvido com o propósito de amplificar sequências específicas de DNA. Neste contexto, taq polimerases de ADN emerge como a enzima definidora em termos de eficiência e especificidade do processo de amplificação de DNA.

O que é taq polimerases de ADN ?

A Taq DNA Polymerase é uma enzima obtida da bactéria termofílica Thermus aquaticus, que é comumente encontrada em fontes termais. A enzima também se caracteriza por sua notável resistência à temperatura, o que por sua vez permite que ela catalise a PCR, que é um processo repetitivo de aquecimento e resfriamento de fragmentos de DNA.

Função na PCR

Na primeira etapa da PCR, uma amostra de DNA de duas fitas é submetida ao calor para separar as duas fitas. Em seguida, introduz-se a Taq DNA Polymerase e as novas fitas de DNA são sintetizadas utilizando os modelos de fita única que atuam como nucleotídeos; a Taq DNA liga as bases corretas ao modelo de fita dos nucleotídeos. Este processo é crucial, pois determina a quantidade e qualidade esperadas do produto.

Tolerância a Alta Temperatura

Uma das características mais pronunciadas da Taq DNA Polymerase é que ela oferece atividade ótima em altas temperaturas, de aproximadamente 75-80 °C. Essa alta faixa de temperatura não só ajuda no derretimento das cadeias de DNA, como também melhora a especificidade do enlace dos iniciadores, inibindo assim as chances de amplificação não específica. Outros podem não oferecer tais extremos. Isso dá à Taq uma vantagem em muitos protocolos de PCR.

Rapidez e Eficiência

A Taq DNA polymerase também foi mostrada ter velocidade na amplificação. Isso ocorre porque ela possui uma taxa de alongamento relativamente maior, tornando os ciclos de PCR mais rápidos. Essa eficiência é muito importante em diversos procedimentos, incluindo clonagem, sequenciamento, diagnósticos e abordagens forenses, entre outros.

Para concluir, a Taq DNA polymerase não pode ser substituída, pois suas propriedades de tolerância a altíssimas temperaturas, eficiência e especificidade tornam este reagente especialmente importante no processo de amplificação por PCR. Desde então, a pesquisa em biologia molecular foi grandemente facilitada pela chegada deste enzima, que permitiu aos cientistas investigar a essência mesma da matéria viva e seus genes como nunca antes. O fato de que a Taq DNA Polymerase ainda é um reagente usado rotineiramente em laboratórios é uma clara prova de que o reagente desempenha bem seu papel na ciência e na medicina.