Pfu DNA Polymerase သည် မိုလက်ကျူဘောလီဂျီနှင့် ဘော့လီတက်နှိုလိုဂျီတွင် ပြောင်းလဲခြင်းဖြစ်သည်
မိုလက်ယူလာရေးနှင့် ဘီယာတက်နောက်ဆိုင်ရာချဉ်းကပ်မှုသည် တcstdint ဖြစ်ပြီး၊ အေးဇီမ်းများသည် သုတေသနနှင့် ဖွံ့ဖြိုးရေးတွင် အရေးကြီးသော အပါအဝင်ဖြစ်လာခဲ့သည်။ အထူးသဖြင့် သုတေသနနှင့် ဖွံ့ဖြိုးရေးတွင် အရေးကြီးသော အثرကို ဖြစ်စေခဲ့သည်။ Pfu DNA Polymerase ပြီးပြီးဆုံး အေးဇီမ်းကို Pyrococcus furiosus ဟူသော hyperthermophilic bacterium မှ ဆောင်းထုတ်ထားပြီး၊ အခြား DNA polymerases များနှင့် မတူသော အထူးသတ္တိများရှိပြီး၊ ဒီဇိုင်းများသည် အရာဝတ္တုတွင် အသုံးဝင်သည်။
Pfu DNA Polymerase ရဲ့ အထူးသတ္တိများ:
ကမ္ဘာလုံးရှိ မိုလက်ယူလာရေးလေ့လာခန်းများတွင် Pfu DNA polymerase ရဲ့ အဓိကအချက်များကြောင့် အသုံးပြုလေ့ရှိသည်။ သူတို့မှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။
1. စစ်ဆေးရေးမှုရှိသည်: Pfu DNA polymerase သည် အခြားများနှင့် မတူဘဲ inherent 3' to 5' exonuclease activity ရှိပြီး၊ ကိုယ့်ကိုယ်ပိုင်အလုပ်များကို မှားယွင်းမှုများကို စစ်ဆေးနိုင်သည်။ ထို့ကြောင့် PCR amplification အတွင်းတွင်၊ မှားယွင်းမှုနံပါတ်များကို ထင်းပြီး ပြင်ဆင်နိုင်သည်။
2. အိမ်သွင်ခြင်း: ဟာ့ပါထားရမ္ဖိလ်စက်ဝတ်မှ ဆေးချိန်တယ်၊ Pfu DNA polymerase က အေးချမ်းသော အပူအပေါ်တွင် အလွန်မြင်မြန်သော အဆင်မပြေမှုရှိသည်။ ဒါဟာ 95°C (203°F) အထိ လုပ်ဆောင်နိုင်ပြီး၊ GC-ရှိ template များ သို့မဟုတ် အလျော့တွဲများကို PCR amplification လုပ်ရန်အတွက် အရေးကြီးသည်။
3. မှန်ကန်မှု: proofreading အင်အားနှင့် thermostability ကို ပေါင်းစပ်လိုက်သည့်အခါ၊ Pfu DNA polymerase က Taq polymerase ထက် မှန်ကန်မှုအဆင့်မြင့်လာသည်။ ဒါက precision အရေးကြီးသော cloning နှင့် mutagenesis experiments တွင် ideal ဖြစ်သည်။ enzyme ကိုသုံးလိုက်တဲ့အခါ error rate က Taq polymerase ကိုသုံးလိုက်တဲ့အထက်နီးစပ်ပါသည်။
Pfu DNA Polymerase ရဲ့ အသုံးပြုချက်များ:
PFU-DNA-polymerase ရဲ့ properties တွင် ထူးခြားချက်တွေက molecular biology methods များတွင် အသုံးပြုခြင်းကို များများလေ့လာခြင်းကို ကန့်သတ်ခဲ့သည်။
1.PCR ပြန်လည်ထုတ်လုပ်ခြင်း: Pfu DNA polymerase သည် မြင့်မားသော ကျွမ်းကျင်မှုနှင့် အမှားယူရှင်းလင်းမှုရှိသဖြင့် PCR ပြန်လည်ထုတ်လုပ်ခြင်းတွင် ရွေးချယ်ထားသော အင်ဆိုင်ဖြစ်သည်၊ အထူးသဖြင့် ပြန်လည်ထုတ်လုပ်ထားသော ထုတ်-produce ၏ တိကျမှုသည် အရေးကြီးပါသည်။ GC-ric templates သို့မဟုတ် အခြား polymerases အတွက် ပြဿနာဖြစ်နိုင်သည့် 悠-long templates ကို ပြန်လည်ထုတ်လုပ်ခြင်းတွင်လည်း ထူးဆန်းသည်။
2.ကိုးကားခြင်းနှင့် Mutagenesis: Pfu DNA polymerase နှင့် ဆက်စပ်သော အမှားများ၏ အနည်းငယ်သော ဖြစ်ပွားမှုသည် accidental mutations တို့ဖြင့် အဖြေများကို ဖျက်သိမ်းနိုင်ရန် cloning နှင့် site-directed mutagenesis experiments တွင် အားကစားသော အရွယ်အစားဖြစ်သည်။
3.DNA Sequencing: ဒီဗားစ်ကြောင့် Pfu DNA polymerase သည် sequence data သည် original template ကို တူညီစွာ ကိုယ်စားပြသနိုင်စေရန် DNA sequencing tools တွင် အသုံးပြုနိုင်သည်။
Pfu DNA Polymerase သည် proof reading ability၊ thermostability နှင့် high fidelity စသည့် အထူးချက်များဖြင့် molecular biology နှင့် biotechnology ရဲ့ မျိုးမျိုးသော ဘက်များကို ပြောင်းလဲစေခဲ့ပါသည်။ ဒါကြောင့် PCR amplification မှ cloning၊ DNA sequencing အထိ အကျိုးအတွေ့အကြုံတွေရှိပြီး modern molecular biology research နှင့် development တွင် လိုအပ်ချက်အရမှာဖြစ်လာခဲ့ပါတယ်။ технологီရဲ့ ဆင့်ကြီးမှုတွေနဲ့ တိုးတက်လာမည့် high-fidelity enzymes လို့ PFU-DNA-polymerase တွေရဲ့ လိုအပ်ချက်တွေလည်း မြင့်တက်လာမည်ဖြစ်ပြီး molecular biology ချဲ့ထွက်ရေးအတွက် အရေးကြီးဆုံး tool တစ်ခုအဖြစ် နှစ်များလောက်အတွင်း အရေးကြီးလာမည်ဖြစ်ပါသည်။