F’tħieb tal-Secreti: L-Istruzzjoni ta’ PFU DNA Polymerase

F’biologija molekulari, l-ispjiegħa tal-dettagli jekk DNA tirikopja hija ċentrali. Fil-centru tar-proċessu dan jagħmlu partiż ippreżenzija tal-enzimi ta’ DNA polymerase li huma mašini molekulari bħalaġħieri u għal dawn jgħibu rol kritiku fil-ħoloq ta’ ġdid tal-filamenti ta’ DNA. Minn dawn, PFU polymerase hi wieħed minnha, li aqbel ma’ siegħa għall-komunitarji ta’ riċerka fl-iskienzi globalment.

PFU DNA polimeraza tigħdal minn Pyrococcus furiosus, xaduna arkejon ipertermofilika li tikkarekterizza b’proprjetajiet ekstraordinarji li jgħidhom indispensabbli f’varji applikazzjonijiet ta’ biologija molekulari. L-termostabilità eċċepzjonali ta’ din l-enzim jippermetti li tipperfu biexx ikunu effettivi f’temperaturi diffikili, fatt li jifassihom ideali għall-użu fit-tekniki kif PCR (reazzjoni ta’ polimeraza catena) u in-nisa oħra diretti għall-amplifikazzjoni tal-DNA.

L-istruttura għaldaq li tiffurja PFU minn polymerasi oħrajiet hi l-ġabbija tal-korrezzjoni tagħha. Mhux kif polymerasi oħrajiet, PFU jgħidma mal-attività ta' exonuclease li tirpermettir li tikkorregiż żballijiet li jagħmlu skont is-sintesi tal-DNA. Bħala riżultat, dawn il-ġabbja inharenti tirpermettir li tiniċja l-preċiżjoni fil-proċessi ta' riproduzzjoni li jkunu meħtieġa fis-sekwenza, kloning u applikazzjonijiet oħrajiet li jdemandaw informazzjoni genetika preċiża.

Mhux biss kif ħsara oħrajiet, PFU Pr ipperċepi proċessività għoliema li tirpermettir produr fili twila mingħajr terminazzjoni prematura mentliex qed jkemmunki sintesi estensiva fuq DNAs. Dan il-karatteristika hija partikolarmenti importante meta jkollu lokarijiet speċifiki ta' DNA billi jkunu pausa miżminija bejn dawl successivi.

Ħafna oħra avantatži tal-PFU wara enzyme relatati użati fil-applicazzjoni tal-PCR huwa l-ġabbija tagħha biex jagħmlu varjieti funzjonijiet ukoll minn li jistgħu jkunu attivitajiet ta 'proofreading inklużivament site directed mutagenesis, sintesi cDNA u etikettar DNAs bliex jkunu oħrajn. Dawn l-enzimi għandhom kienu magħrufin mill-prattiti għal effiċjenza u fedeltà waqt il-provini tagħhom billi jiġu mhux biss riżultati dependable imma ukoll riproducibli.

Ġeneralment, huma disponibbli wkoll bħala formi ta 'protejna rekombjanti li jifassilaw purifikazzjoni jew konstruzzjoni secundar kondizzjonijiet eksperimentali speċifiki; ukoll huma disponibbli kommercjalment. Inda minn li jkunu qed jimgħudu provini normali tal-PCR jew huma miżjudin ma' tas-sakajjef kompleks fis-skelett tal-bioloġija molekulari, PFU DNA polymerase hija l-enzim skelta għall-klijenti tiegħu billi tista 'tqabbel aktar prevedibilment u konsejstanti.

Liema tagħmil, is-sens PFU DNA polymerase kien ġew parti fondamentali fl-riċerka tal-bioloġija molekulari, agħti l-issienziati l-oportunità li jiskopru l-segreti wara ir-replikazzjoni tal-DNA bmod akkurat u preċiż. Din l-eksepsjonalità ta' termostabilità, l-ġabra ta' ikkoreġi u t-proċessivtà jagħmlu xi assett prezzjuż fuq il-ħadd tas-scientja tal-iskoperta. Skont ma tkun ittieġi l-teknoloġija, hija ċjara li is-sens PFU DNA polymerase se tkun semper fil-prima linja tal-riċerka ġenetika skont li tispinta limiti bioloġiji trid invenzjonijiet innovaċenti.