ir-rwol u l-applikazzjonijiet ta' m-mlv reverse transcriptase fil-bijoloġija molekulari

L-enzimi kienu ċentrali għal reazzjonijiet bijokimiċi varji fir-rigward tal-qasam dejjem dinamiku tal-bijoloġija molekulari.m-mlv transkriptażi inversa(m-mlv rt), li hija waħda minn dawn l-enżimi, riċentement irċeviet attenzjoni kbira minħabba li hija kapaċi tisintetizza cdna minn mudelli ta' rna. Din l-enżima li tinkiseb mill-virus tal-lewkimja murina Moloney (m-mlv), issib użu est

l- istruttura u l- funzjoni ta'm- mlv reverse transcriptase

m-mlv reverse transcriptase funzjonijiet bħala DNA-dipendenti DNA polimerase mal-dwan rna-dipendenti DNA polimerase u ribonuclease h (rnase h) attivitajiet. Dan jirrikonoxxi rna mudelli u jwettaq sinteżi ta'CDNA strands bl-użu dntps bħala substrati

Applikazzjonijiet ta'm-mlv reverse transcriptase

Sinteżi ta' CDNA: metodi ta' traskrizzjoni inversa li jużaw m-mlv rt huma proċeduri komuni użati għat-trasformazzjoni ta' kontenut ta' RNA f'CDNA.

Il-klonazzjoni tal-ġeni: billi jużaw m-mlv rt, ir-riċerkaturi jistgħu jikklonjaw ġeni speċifiċi mill-kampjuni tal-RNA tagħhom. Konsegwentement, ġeni partikolari jistgħu jiġu iżolati u amplifikati sabiex ikunu jistgħu jiġu analizzati aktar f'termini ta' funzjoni.

analiżi ta' espressjoni: pass essenzjali fi kwalunkwe teknika ta' analiżi ta' espressjoni bħal qpcr jew analiżi ta' mikroarray jinvolvi s-sintesi ta' cdnas medjat mill-enżima permezz tal-attività rnase h tagħha.

Ġenomiċi funzjonali: fil-ġenomiċi funzjonali, m-mlv rt jintuża biex iħejji libreriji CDNA minn popolazzjonijiet kumplessi ta' RNA. Dawn il-libreriji mbagħad jiġu skrinjati għal ġeni b'funzjonijiet jew fenotipi speċifikati u b'hekk jiżvelaw għarfien ġdid dwar il-funzjoni u

vantaġġi u kunsiderazzjonijiet

Il- transkriptażi inversa m-mlv għandha diversi vantaġġi bħal effiċjenza għolja, speċifiċità u riproduċibbiltà. Madankollu, għandu jiġi nnutat li l- enżima topera sew taħt kundizzjonijiet speċifiċi bħal temperatura ottimali, valuri ta'ph kif ukoll konċentrazzjoni ta'melħ. xi kultant waqt is- sinteżi

B'konklużjoni, m-mlv reverse transcriptase hija għodda utli fir-riċerka tal-bijoloġija molekulari biex tisintetizza cdna minn mudelli ta' rna għal diversi applikazzjonijiet. Il-klonazzjoni tal-ġeni, l-analiżi tal-espressjoni u l-istudji tal-ġenomiċi fun