Funkzjoni ta' Taq DNA Polymerase fil-Biologija Molekulari
Tehniki moħdida tal-bioloġija molekulari jagħmlu użu kbir ta’ taq polymerase tad-dna , li tiftix min il-batterja termofila, Thermus aquaticus. L-istenni tal-polimerasi biex tirretin tempjar alti wkoll u jikkiproċessaw effiċjentement id-DNA trassformazzjoniha fi ġabra importanti flabbjazzjonijiet tal-bioloġija molekulari.
Struttura u Funksjoni
Il-polimerasa ta’ DNA Taq hija enzim eżtraordinarju bħall-kmass approssimatament 94 kDa. Hi mibnija mill-waħda catena peptidika u tippreżenti attività nuova 5'→3' polimerasa li tippermittilu li tinsintetizza DNA bissmilli primers speċifiki jkunu preżenti. Żgħar min dawn, għandha aktarwaqtijiet 5' → 3' exonuclease li jippermettu l-verifikazzjoni u korezzjoni tal-ġeħżien wara is-sintesi tal-DNA.
Applikazzjonijiet fil-reazzjoni tal-katena tal-polimerasi (PCR)
Ħafna minn iż-żommijiet ikklijentijali ta' dawn enzyme hija użu tagħha f’reakżjoni tal-poliċarizzazzjoni (PCR). Dan jifisseru li jkun importanti għall-amplifikazzjoni ta' sekwenzi tal-DNA minħabba li polymerasi Taq tista' tippermetter tempjarati ħaddien bħala li jkunu meħtieġin għall-denaturation. Bħala resulta, l-riċerkaħi jistgħu jagħmlu kopji esponenzjalmenti jew jirriprouduċu reġjunijiet particolari tal-DNAs għal ħsara varjanti applikazzjonijiet wieħed ma' sekwenza, kloning jew analisi genetika.
Avvanzati u Konsiderazzjonijiet
Ilsena ta' Taq DNA Polymerase tirpermettiex il-użu tagħha fis-sitwazzjonijiet varjanzjali inkluża dak li jinvolver template kompleksijiet jew reazzjonijiet subottime. Għalbix, ma tikkontenjax attivitajiet 3′-5′ exonuclease imbiex ix-xeħar jistgħu jkunu miġbor fil-reproduzzjoni, li tiddaqgħod milliċija u validazzjoni fl-interpretazzjoni tad-desjenji eksperimentali wid-data sets.
Innovazzjoni u Direzzjonijiet Futuri
T’għandhom l-ebda jipprova biex jagħmlu aħjar l-performanza u l-fleksibiltà ta’ Taq DNA Polymerase. L-modifikarji huma fl-ħajja biex jogħġbu l-fedeltà, il-processivtà waqt li ġeneralment jikkonfrontaw ma’ is-saħħa tal-enzimi wild-type. F’mod similari, applicazzjonijiet ġdida li jiktegmu dawn it-teknoloġija mal-diagnostika point-of-care kif l-amplifikazzjoni isoterma huma probabbliex jistendu aktar użu hemm f’rid tal-riċerka għall-applikazzjonijiet kliniċi differenti.
Il-Taq DNA polymerase kien t-oqsar is-sena fil-biołoġija molekulari u għaddej b’modiweni s-sħiħ u d-diskoprijiet. S-saħħa distinktiva tiegħu u l-applicazzjonijiet numeriċi tagħha jagħmlu li l-ebda jipprovvja fid-disciplina, waqt li qed jrimanju protaġonisti permanenti fit-tass ta’ l-materjali genetiku ta’ l-ħajja u manipolazzjoni tiegħu.