M-MLV Reverse Transcriptase: Is-Ssem Ġdid f’Bioloġija Molekulari

F’l-ambjent kompleks ta’ bioloġija molekulari, l-enzimi għandhom ruoli ħaddiema f’liġġi differenti reazzjonijiet bioċemikali. Fihom, il-reverse transcriptasi jippermeettu li jkunu konsiderati enzimi ta’ interes kbir għall-kapacità tagħhom biex jagħmlu l-konverżjoni tal-RNA mal-DNA, proċess skont li jinkemm reverse transcription. Il-M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus) Reverse Transcriptase t’għodda bħala wieħed minn varjetajiet differenti ta’ reverse transcriptase li tutilizzjaw fl-applicazzjonijiet ta’ riċerka u dijagnostika.

Li tkun taf dwar m-mlv transkriptażi inversa

M-MLV Reverse Transcriptase hija mit-tnija min il-Moloney Murine Leukemia Virus (Mo-MuLV), virs retro li jista' dan l-enzim għall-replikaċċjoni tal-gjenom tagħha f'silja ospitali. Dan jagħmelha ġabra ta' awsaġġ importanti għall-klonarju molekulari, l-analisi tal-espressjoni tal-geni u l-istudju tal-mekanizmi tal-replikaċċjoni virali billi l-enzim jista' jipprodusijja cDNA (komplementari DNA) bħala modell ta' RNA. Il-varjanza tal-M-MLV kienet dizajnata biex tigħmil l-istabilità tagħha u tinbidel perfurmanza fil-varieta' ta' kondizzjonijiet laboratorju.

Fitt x-Xejt u Bnefici

Fideltà u Sinsibiltà Għoli

Ħadd minn M-MLV Reverse Transcriptase huwa li jagħmlu b’fideliġà alti, ikollok minimizzar l-erruri meta jikkonvertixxiRNA fil-DNA. Għal dawn il-properjati, tista’ tintfeksa l-informazzjoni genetika skont ir-reverse transcription, ġewwa studi tal-espressjoniġenetika li tagħtu riżultati rifinati. Żgħar, b’sensibiltà alti, tista’ tirreċogniżixxi molekuli ta’ RNA fi kantità żgħar, fatt li jifalliha utli għall-istudja ta’ tranziskwi rari jew ġene skont espressjoni żgħara.

Flessibiltà fl-Ikkondizzjonijiet tar-Reazione

Huwa wkoll miftuħ li M-MLV Reverse Transcriptase tista’ tippera f’ikkondizzjonijiet varjanti effettivament. Pji specificament, varjazzjonijiet wieħed kom’ il-temperatura estrema, fluktuazzjonijiet ta’ pH u differenzi tas-sali ma jafuš ix-xogħol tiegħu, fatt li jagħmlu jiġi sabbat lejn iċ-ċertifikatijiet eksperimentali. Bħala liex, ir-riċercaturi jistgħux jogħlu protokoll tiegħhom għall-applikazzjonijiet speċifiki, iffiċju perfurmanza u riproduċibbilità.

Kompatibiltà ma' Templateijiet Luni

Mhux kif RTs oħrajn, m-mlv transkriptażi inversa tista' tranzkribi molekoli tal-RNA luni fi cDNA komplieta. Dan jista' jagħmel biżżejjed speċjalment meta tikkrea librarijiet ta' cDNA minn il-messenger RNA (mRNA) jew meta tikkopja ġeni kbir. Għalhekk, is-Sintrasija Reversa M-MLV trid cDNA kopji kompleti u tagħmlu profili tal-espressjoni tal-ġeni jekkemm funzjonali.

Aplikazzjonijiet fil-Ġabra u Fil-Diagnosi

Analizz tal-Espressjoni tal-Ġeni

Il-konverżjoni tal-mRNA fi cDNA bill-użu tal-Sintrasija Reversa M-MLV hi ħafna għalba fil-ħarġa tal-espressjoni tal-ġeni, fejn it-tivell ta' mRNA jistgħu jiċċekkjaw b'modiż tas-sigħat kif qPCR (reazzjoni tal-polinemeraz quantitattiva). Bħala dan, ir-reċerċaturi jistgħu jkompara livelli ta' espressjoni tal-ġeni f'dawk ikliem jew fuq kondizzjonijiet differenti, qed jipprovdew inċiżjonijiet dwar proċessijiet ċellulari u meħanizmi tal-mara.

Klona u Bioloġija Molettjar

M-MLV Reverse Transcriptase hija indispensabbli għall-esperjenzi tal-klonarjan ġara li tista' tagħmel sintesi ta' cDNAs kompli kif ukoll minn modelli ta' RNA. Ir-reċerċaturi jistgħu li jridu jogħġbu libri tal-cDNA li jagħmlu identifikazzjoni ta' ġeni speċifiki għall-iskruċija wara, jikklonhom f'sistemi vettoriali għall-analizzijiet awtonoma jew jissibu lill-użu għall-probji f'testi basati fuq l-ibridazzjoni.

Riċerka fil-Viroloġija

Kif li virusi retroviralijiet oħrajn jafu, dawn ir-riċerka li jinvolvero M-MLV Reverse Transcriptase kienet uża fit-tiżied dwar riproduzzjoni u patogenessi retroviraliji. Dawn il-istudji jagħmlu intrezz milli jekk jippermettu l-integrazzjoni tal-genomijiet viraliji, kif jipproċedwu biex jinkattivu u li jikkausa l-indegradament tal-saħħa tal-pazjenti, li jagħmlu contribuzzjoni fit-twelwie ta' antiviralijiet u vaksini kontra hemm.

Konklużjoni

M-MLV Reverse Transcriptase tista' tkun summata fliha kif enzima versatile uAFFIDABLE li għallmiet riforma diversi settori tal-riċerka ta' bioloġija molekulari u diagnostika. Tista' tkun utizza għal l-analisi tal-espressjoni tal-ġeni, esperimenti ta' klonarju u viroloġija kif is-sena importanti din aħjar li dawn il-karakteristiki tagħha: fideltà alta, natura sensittiva u adattabilità għall-kondizzjonijiet f’ reazzjonijiet. Indipendentment minn dawn il-frontijiet li l-inqwiżizzjoni Scientifica tinqablu għall-bidu ta' ċienċi, M-MLV Reverse Transcriptase japparix sabi fiċ-ċikkat tal-biologu molekulari.